Control de Calidad en el Laboratorio de microbiologia

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Control de Calidad en el Laboratorio de microbiologia

  1. 1. LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA<br />María Isabel Durango lozano<br />
  2. 2. Rol del Laboratorio de microbiología<br /><ul><li>Apoyo en el diagnóstico de las enfermedades infecciosas</li></ul> Identificación del agente etiológico: selección del mejor examen y de la mejor muestra.<br /> Informe de susceptibilidad a antimicrobianos.<br /> Contribuir al control de la resistencia bacteriana<br /> Implementación de tecnología moderna: tiempo de respuesta, sensibilidad y especificidad.<br />
  3. 3. Métodos de diagnóstico microbiológico<br /><ul><li>Observación c/s tinciones
  4. 4. Cultivos: Identificación/sensibilidad
  5. 5. Detección de antígenos
  6. 6. Detección de anticuerpos: serología
  7. 7. Detección de ácidos nucleicos
  8. 8. Mayor rapidez
  9. 9. Alta calidad
  10. 10. Costo/beneficio</li></li></ul><li>Tinción de Gram<br /><ul><li> Se debe solicitar siempre
  11. 11. De bajo costo y gran utilidad: </li></ul>1.Orientación diagnóstica rápida<br /> 2. Características inflamatorias <br /> 3. infecciones mixtas (anaerobios)<br /><ul><li> Sensibilidad analítica: 100.000 bacterias/ml muestra</li></li></ul><li>Baciloscopía<br /><ul><li>Se debe solicitar en TODO paciente con síntomas respiratorios.
  12. 12. De bajo costo y gran utilidad: </li></ul>1. Rápida<br /> 2. Fácil disponibilidad<br /> 3. Indice de infectividad<br /><ul><li> Sensibilidad analítica: 5.000 a 10.000 bacilos por ml de muestra.</li></ul>Tinción de Ziehl Neelsen<br />
  13. 13. Tinciones para Hongos<br /><ul><li>Diagnóstico de infecciones invasoras en muestras clínicas es difícil.
  14. 14. Blanco de calcoflúor es una tinción específica para hongos (quitina).
  15. 15. Mejora la sensibilidad</li></li></ul><li>Cultivos<br /><ul><li>Se considera el método de referencia porque permite la confirmación de género y especie y la determinación de la susceptibilidad a drogas.
  16. 16. En el caso de bacterias y hongos la automatización ha permitido disminuir los tiempos de respuesta (mejores sistemas de detección).</li></li></ul><li>Cultivos bacterianos y de hongos<br /><ul><li> Requiere bacterias y hongos viables
  17. 17. Requieren medios de transporte, especialmente anaerobios
  18. 18. Medios líquidos son más sensibles que los sólidos
  19. 19. Una buena alternativa en punciones y muestras líquidas es la inoculación en botellas de hemocultivos</li></li></ul><li>Cultivos bacterianos y de hongos<br /><ul><li> Diagnóstico macroscópico y microscópico
  20. 20. Identificación y sensibilidad a drogas</li></ul>Diferentes plazos de entrega: <br />Cultivo corriente: 48 horas<br />Cultivo anaeróbico: 7 días<br />Cultivo de hongos: 7 días a 4 semanas<br />Cultivo de Micobacterias: 8 semanas<br />
  21. 21. Susceptibilidad bacteriana<br /><ul><li>La resistencia bacteriana es un problema emergente</li></ul>Staphylococcus aureus R a meticilina<br />Streptococcus pneumoniae R a penicilina<br /> Enterococcus R a Vancomicina<br /> E. coli y K. pneumoniae R a todos los -lactámicos (ESBL)<br /><ul><li>Test de susceptibilidad:</li></ul>Estandarización de AAM ensayados e informados<br /> Depende de complejidad de los pacientes y patrones locales de R<br /> Resultado requiere reporte selectivo e interpretación adecuada<br />Kirby-Bauer<br /> S -I - R<br />
  22. 22. 2 <br />4<br />8<br />16<br />2<br />4<br />8<br />16<br />2<br />4<br />8<br />16<br />2<br />4<br />8<br />16<br />2<br />4<br />8<br />16<br />Susceptibilidad bacteriana<br />Concentración inhibitoria mínima<br />Métodos: Dilución en agar<br />Ej. Cefazolina, Escherichia coli <br />Cortes : Sensible=  2 g/ml Intermedio =4- 8 g/ml Resistente: 16<br />CIM  2 S 2<br />CIM = 4 I 4<br />CIM = 8 I 8<br />CIM = 16 R16<br />CIM  16 R  16 <br />
  23. 23.
  24. 24. microbiología<br />Cumplimiento de la fase pre analítica<br />Adecuada muestra<br />Medios de cultivos atemperados <br />Libres de agua de condensación.<br />Trabajar en una campana de <br /> bioseguridad muestras.<br />Uso de mecheros o incinerador<br />Fernández y cols. 2005. Gestión de calidad en el laboratorio Clínico.<br />
  25. 25. <ul><li>Recogida de muestras
  26. 26. Responsabilidad y supervisión facultativa
  27. 27. Normas de asepsia
  28. 28. Muestra representativa del proceso
  29. 29. Cantidad/Recipiente/Identificación correcta
  30. 30. Evitar contaminación con flora saprófita
  31. 31. Retrasar tratamiento
  32. 32. Transporte rápido (refrigeración)</li></li></ul><li>ORINA<br /><ul><li>Frasco de boca ancha y tubo con vacío
  33. 33. Porción media de 1ª orina de la mañana
  34. 34. Limpieza escrupulosa de genitales
  35. 35. La bolsa (niños) se cambiará cada hora
  36. 36. Volumen mínimo 10 ml para cultivo bacterias y Levaduras
  37. 37. 50 ml para tuberculosis</li></li></ul><li>HECES (coprocultivo)<br /><ul><li>No se admitirán heces formes
  38. 38. Frasco de boca ancha
  39. 39. 2-5 g de heces recientes (pus, moco, sangre)
  40. 40. Remitir rápidamente al laboratorio</li></ul>mantener a 4ºC si se demora el envío<br />
  41. 41. Exudados /Abscesos<br />Limpiar la superficie con suero fisiológico y gasa<br />Recoger el pus mediante jeringa y aguja aspirando de las zonas profundas<br />Cuando sea necesario instilar suero y aspirarlo nuevamente<br /> Sólo cuando lo anterior no sea posible se utilizaran escobillones enviando<br />
  42. 42. FASE ANALITICA<br />
  43. 43. microbiología<br />Uso de asas calibradas ( recuento de microorganismos ).<br />Buena siembra en estría. ( trabajar con colonias perfectamente aisladas ).<br />
  44. 44. Elston D. 2008. Clin Lab Med 28:173-177<br />
  45. 45. Medios de cultivo<br />Selección de medios de cultivo<br />Generales, selectivos, selectivos- diferenciales.<br />Necesidades particulares de cada hospital<br />Comunicación laboratorio – área clínica .<br />Realización de tablas de siembra.<br />2007. Clinical Microbiology Procedures Hanbook 2nd Edition . ASM<br />
  46. 46. Identificación de microorganismos<br />PRIMERA ETAPA :<br />Observación de la colonia.<br />Ahorro de tiempo y dinero en el Dx.<br />Morfología, color<br />Interacción con el medio ( hemolisis )<br />
  47. 47. Segunda etapa : Diagnostico presuntivo<br />Medios cromogénicos<br />Sensibilidad a antibióticos:<br /> S. pneumoniae S opt<br /> S. pyogenes S bac<br />Pruebas complementarias:<br /> Oxidasa,catalasa,coagulasa<br />Aglutinación con antisueros específicos.<br />
  48. 48. Tercera etapa: dx. confirmativo<br />Basa en realización pruebas bioquímicas<br /> A partir de cultivos puros.<br />Bioquímicas: manuales o por sistemas semi automatizado.<br />
  49. 49. Control de calidad en el laboratorio microbiológico<br />Toma de muestra y adecuado transporte.<br />Manipulación de la muestra rigurosamente.<br />Control de material y equipos:<br /> Temperatura estufas, refrigeradores<br /> Campanas de incubación<br /> Pipetas automáticas: calibración<br /> Sistemas automatizados<br />
  50. 50. CONTROL DE MEDIOS CULTIVO<br />Esterilidad del medio: se comprobara en cada lote<br />Eficacia del medio (utilización de cepas ATCC).<br />
  51. 51. Control de reactivos y discos pruebas diferenciales<br />Los reactivos se controlan cada vez que se preparan o nuevo frasco<br />Colorantes de tinción, fijadores reveladores de pruebas bioquímicas.<br />Eficacia se comprueba con microorganismos que dan respuesta positiva y negativa.<br />Discos para pruebas diferenciales <br /> refrigerado con un desecante<br />
  52. 52. Control de discos de antibiograma : cepas cuya sensibilidad conocida: E. coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.<br />Control de antisuero y antígenos<br />Control de resultados intralaboratorios e interlaboratorios.<br />
  53. 53. Fase Postanalítica.<br />Captura de resultados : manual o<br /> automática.<br />Validación de resultados<br />Envió de resultados impresos- internet<br />Impresión de Diarios de Trabajo.<br />
  54. 54. Indicadores de calidad fase Postanalítica<br />Tiempo de respuesta del lab para sol urgentes ( min )<br />Proporción de reediciones diarias de informes ya entregados: <br /> No. reediciones de informes/No. total informes<br />Proporción de informes reclamados por demoras.<br />Indicadores herramientas objetivas evaluar las disposiciones establecidas y ver posibilidades de mejora.<br />
  55. 55.
  56. 56. Errores en el proceso<br />
  57. 57. Uffff…gracias<br />

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