5.hranjive podloge koje se koriste u izolaciji i

4,711 views

Published on

0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total views
4,711
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
2
Actions
Shares
0
Downloads
31
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide

5.hranjive podloge koje se koriste u izolaciji i

  1. 1. Hranjive podloge koje se koriste u izolaciji iidentifikaciji mikroorganizama iz namirnicaSvrha kultivisanja mikroorganizama:• Izolacija i identifikacija• Određivanje broja bakterija• Kontrola sterilnosti• Kultivisanje kontrolnih sojeva• Antibiogram
  2. 2. Faktori potrebni za rast irazmnožavanje mikroorganizama Hranjive materije Voda pH TemperaturaO 2 Osmotski pritisak Faktori rasta
  3. 3. Sastojci hranjivih podloga Voda NaCl i druge soli Peptoni Boje i indikatori Puferi Agensi kojima se postiže selektivnost Agar Dodaci za obogaćenje - krv Redukujuće supstance - tioglikolat
  4. 4. Podela podlogaPrema čvrstini – čvrste, tečne i polučvrstePrema nameni – jednostavne i složene Složene selektivne – stimulacija jedne vrste, a inhibicija rasta ostalih elektivne – daju prednost jednoj vrsti, a ostali MO rastu sa zadrškom diferencijalne - mogućnost prepoznavanja određene vrste podloge za obogaćenje rasta – selektivni tečni medijum u cilju povećanja broja “target” MO biohemijske – ispitivanje biohemijske aktivnosti
  5. 5. Sled postupaka pri izolaciji iidentifikaciji MO iz namirnica Predobogaćenje – neselektivni tečni medijum u cilju oporavka subletalno oštećenih ćelija Obogaćenje – selektivni tečni medijum sa svrhom povećanja broja “target” MO Izolacija – selektivni čvrsti medijum - dobijanje pojedinačnih kolonija Identifikacija – makro i mikromorfologija, fenotipizacija, serologija, PCR metode
  6. 6. Staphylococcus aureusBaird Parker agar(ETPGA)E – egg yolk, žumance jajeta(obogaćenje i aktivnostlecitinaze, lipazeT – K-telurit, selektivni agens,inhibira G -, redukcija dotelurida- kolonije tipične crnebojeP- Na-piruvat, faktor rasta,neutrališe toksične peroksideG- glikokol, faktor rastaLiCl – inhibicija popratnemikroflore
  7. 7. Escherichia coliBrilijant zeleni laktozažučni bujon• brilijant zeleno i žuč – selektivniagensi, inhibicija G+ mikroflore• laktoza – fermentacija i stvaranjegasa•Selektivnost podlogepovećavamo i uslovima kultivacije,T 42-44oCLjubičasto crveni žučniagar (VRB –Violet RedBile)• žučne soli i kristal violet –selektivni agensi, inhibicija većineG+•Neutral crveno je indikator
  8. 8. Biohemijski niz dvostrukišećer po Kligleru, indol, metil crveno, VP, citrat - potvrda
  9. 9. Kvasci i plesniSabouraud agar• selektivnost se postiženiskim pH (5,6) – inhibicijavećine vrsta bakterija• dodatna selektivnost –kloramfenikol, ali i uslovikultivacije, inkubacija prisobnoj T• dve varijante, maltoza idekstroza
  10. 10. Starter kulture Bakterije mlečne kiseline- Lactococcus spp. i Lactobacillus spp.M-17 bujon i agar- laktokoke dinatrijum β-glicerofosfat-povećanje puferskog kapaciteta podloge askorbinska kiselina-stimuliše rast MgSO -obezbeđuje esencijalne jone za 4 rastMRS bujon i agar - laktobacili zahtevni u pogledu hranjivih materija:polisorbat, acetat, Mn i Mg-sulfat kao specifični faktori rasta selektivnost podloge - niski pH podloge 5,7, ali i mikroaerofilni uslovi inkubacije

×