T%C3%A9cnicas Inmunol%C3%B3gicas

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T%C3%A9cnicas Inmunol%C3%B3gicas

  1. 1. TECNICAS INMUNOLOGICAS Dr. Oscar Walter Torres
  2. 2. Técnicas inmunológicas <ul><ul><li>Fundamento: reacción específica entre Ags-Acs. </li></ul></ul><ul><ul><li>Utilidad : </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Detección, identificación, tipificación y cuantificación de microorganismos, Ags y Acs. de grupos sanguíneos </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Detección y cuantificación de enzimas microbianas y toxinas de origen microbiano </li></ul></ul></ul><ul><ul><li>Clasificación </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Lectura directa </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><li>Aglutinación </li></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><li>Precipitación </li></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Lectura indirecta </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><li>Reacción de Fijación de Complemento </li></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><li>Neutralización </li></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><li>Inmunomarcado </li></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><ul><li>Radioinmunoensayo (RIE) </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><ul><li>Enzimoinmunoensayo (ELISA) </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><ul><li>Inmunofluorescencia </li></ul></ul></ul></ul></ul>
  3. 3. Técnicas inmunológicas <ul><li>Sensibilidad: capacidad para detectar pequeñas cantidades de Ags ó Acs. </li></ul><ul><li>Especificidad: capacidad para distinguir entre Ags o microorganismos diferentes y no dar falsos negativos </li></ul><ul><li>Uso de Testigos +/- </li></ul>
  4. 4. Técnicas inmunológicas Aglutinación <ul><li>Definición : técnica de lectura directa, efectuada “in vitro” en medio líquido o sólido. </li></ul><ul><li>Clasificación </li></ul><ul><ul><li>Activa (Ag. particulado natural: GR, virus, bacteria, hongo, parásito, etc.) </li></ul></ul><ul><ul><li>Pasiva (Ag particulado artificial: GR, látex, gelatina) </li></ul></ul><ul><ul><li>Reversa pasiva: se adsorbe el Ac a un soporte sólido </li></ul></ul><ul><li>Anticuerpo : aglutinina </li></ul><ul><li>Característica : técnica cualitativa y/o cuantitativa (por titulación) </li></ul><ul><li>Título : máxima dilución que da positiva una reacción </li></ul>
  5. 5. Técnicas inmunológicas Aglutinación: etapas <ul><li>Sensibilización </li></ul><ul><ul><li>Temperatura, afinidad Ag-Ac, pH, tiempo de incubación, concentración relativa entre Ag y Ac y fuerza iónica del medio </li></ul></ul><ul><li>Aglutinación </li></ul><ul><ul><li>Potencial Z, tipo de Ig y densidad del Ag </li></ul></ul>
  6. 7. AGLUTINACION
  7. 8. Técnicas inmunológicas Precipitación <ul><li>Definición : técnica de lectura directa, efectuada “in vitro” en medio líquido o semisólido (inmunodifusión). </li></ul><ul><li>Ag: soluble </li></ul><ul><li>Ac: precipitina </li></ul><ul><li>Ejemplos: ID radial, inmunoelectroforesis </li></ul>
  8. 9. Técnicas inmunológicas Precipitación
  9. 10. Técnicas inmunológicas Precipitación
  10. 11. Técnicas inmunológicas Precipitación
  11. 12. Técnicas inmunológicas Reacción de Fijación de Complemento (RFC) <ul><li>Definición : técnica de lectura indirecta, efectuada “in vitro” en medio líquido. </li></ul><ul><li>Ag: soluble </li></ul><ul><li>Ac: fijador de complemento </li></ul><ul><li>Fundamento: 2 sistemas Ag-Ac. </li></ul><ul><ul><li>Problema </li></ul></ul><ul><ul><li>Detector o mezcla hemolítica </li></ul></ul>
  12. 13. Técnicas inmunológicas Reacción de Fijación de Complemento
  13. 14. Técnicas inmunológicas Reacción de Fijación de Complemento Reacción Positiva Reacción Negativa
  14. 15. Técnicas inmunológicas
  15. 16. Técnicas inmunológicas
  16. 17. Técnicas inmunológicas
  17. 18. Técnicas inmunológicas
  18. 19. Técnicas inmunológicas

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