Métodos en hematopatología

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Una revisión bibliográfica de un artículo interesante que revisa los métodos diagnósticos auxiliares en las enfermedades hematológicas. Una revisión de su fundamento teórico principalmente sin profundizar en aspectos técnicos. Un tema interesante de las pruebas que se usan día a día en el diagnóstico de hematología.

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Métodos en hematopatología

  1. 1. Revisión : Dr. Luis Humberto CruzContrerasHospital general,Morelia, Mich
  2. 2. CLASIFICACIÓN DEPADECIMIENTOSHEMATOLÓGICOS• Puramente morfológicaHistóricamente• Clínica-Morfológica-Genética-MolecularActualmente interdisciplinaria• Cromosoma Philadelphia 1970La gota que derramó el vaso
  3. 3. CROMOSOMA FILADELFIAPeter Nowell y David Hungerford• 1960 Philadelphia, Universidad dePensilvania y centro de cáncer FoxChase1973 Identifican Translocación• Janet D. Rowley
  4. 4. CROMOSOMA PHILADELPHIATranslocación cromosoma9:22• BCR, Breakpoint Cluster Región• ABL, virus ABELSON (Causante deLeucemias)
  5. 5. CLASIFICACIÓN WHOLeucemias LinfomasSíndromesmieloproliferativosSíndromesmielodisplásicosWHO, Cambios,evolución
  6. 6. CLASIFICACIÓN WHOAceptada por que estábasada encaracterísticasgenéticas que impactandirectamente enpronóstico y tratamiento
  7. 7. MÉTODOS DE ESTUDIOCariotipoFISH,CISHCitometríade flujoPCR
  8. 8. CARIOTIPOEstudia el arreglo y la morfología delos cromosomas• Se ha usado para enfermedadescongénitas,• Síndromes mielodisplásicos, enfermedadesmieloproliferativas, leucemias agudas• Requiere células en división• Nó útil en linfomas
  9. 9. CARIOTIPO• REQUIERE EXPERIENCIAPROCESO LABORIOSO• Puede requerir cariotipos seriadosLas enfermedadeshematopoyéticas van adquiriendoalteraciones en el curso de suenfermedad
  10. 10. SÍNDROME MINUS 5Q(MENOS 5Q)Pérdida del brazo largodel cromosoma 5Conjunto decaracterísticas clínicas ymorfológicas importantesRiesgo bajo deprogresión a leucemiaagudaSP ANEMÍAMACROCÍTICA, MOHIPERPLASIAMEGACARIOCITOS,MEGACARIOCITOSPEQUEÑOSHIPOLOBULADOS,DISMINUCIÓN SERIEROJA
  11. 11. FISHFLUORESCENCEIN-SITUHIBRIDIZATIONDetecta anormalidades más dirigidasen el genoma• NO requiere células en división• Se puede realizar en más especímenesSe incuba el tejido con PRIMERSfluorescentes (segmentos de AND)• Se unen a un segmento específico de ADN• Se analiza con un microscopio parafluorescencia
  12. 12. FISHVentajas : MásrápidoPermite detectaralteraciones másespecíficasLeucemia agudapromielocítica(t15:17):QuimioterapiaespecialLinfoma de Burkitt(sobreexpresión delC-myc) EN Ch8Para células queNO están división
  13. 13. PCR, POLIMERASECHAIN REACTIONMétodo mássensible yespecíficoPara detectaranormalidadesgenéticas yCUANTIFICARLASLABORIOSA yrequiere personalaltamenteentrenadoTejido fijado y sinfijar
  14. 14. PCRRealiza copias-copias del GENSe somete aelectroforesisen geSe Valora lapresencia y/oausencia debandasSe mide que tanobscura labanda
  15. 15. KARY BANKS MULLISInventor de la PCR• Premio Nobel de química en 1993Nació en Columbia (carolina del Sur)• Lic. Química en Georgia Institute of Technology• Trabajos diversos• 1985, Cetus corporation, desarrollo técnica de PCR
  16. 16. KARY BANKS MULLISInventor de la PCR• Complicada por falta de Polimerasatermoestable• Posteriormente Taq POLIMERASA (thermusaquaticus)DE OTRO COSTAL…• Argumento de Jurassic Park• Disidente del SIDA
  17. 17. CITOMETRÍA DE FLUJOPermite separar engrupos celularesDe acuerdo a laexpresión o ausenciade moléculas en susuperficie ycitoplasmaEstas moléculaspueden ir de la manocon alteracionesgenéticasClasificación deLeucemias
  18. 18. FLOW CYTOMETRYLas células pasan porun tubo fino, una a unason expuestas a unLASERSENSORES, midendispersión de la luzlaserInferencia en tamaño,morfología y moléculasen la célulaANALISISMULTIPARAMÉTRICO
  19. 19. FLOW CYTOMETRY

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