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Identificacion de staphylococcus

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Un vistazo sobre el genero Staphylococcus

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Identificacion de staphylococcus

  1. 1. La dy J oha na S e rna V e la z q u e
  2. 2. • “Staphylé”, CGP en racimos• De 0.5 – 1 µm, anaerobios facultativos, algunos aislamientos requieren de CO2.• Soportan Tpº de 18-40ºC• Presentes en piel y mucosas de seres humanos.
  3. 3. BIOPELICULA PROTEINA ACAPSULA COAGULASA PEPTIDOGLUCANO
  4. 4. • CAPSULA: 11 serotipos capsulares de S.aureus (5 y 7). Serotipos 1 y 2 (colonias de aspecto mucoide)• BIOPELICULA : (capa de polisacáridos extracelular).• PEPTIDOGLUCANO: actividad endotoxigénica.• ACIDOS TEICOICOS: polisacárido A (S.aureus) y polisacárido B (S.epidermidis).• PROTEINA A: En mayoría de cepas de S.aureus• COAGULASA: Factor de agregación (Fibrinógeno Fibrina insoluble)• PROTEINAS ADHESINAS: MSCRAMM
  5. 5. TOXINAS ESTAFILOCOCICAS: TOXINA ALFA: altera musculo liso, forma poros en células huésped. TOXINA BETA: “esfingomielinasa C”; cataliza hidrólisis de fosfolípidos TOXINA DELTA: actividad citolitica, surfactante que altera membrana c TOXINA GAMMA: lisan neutrófilos y macrófagos. LEUCOCIDINA DE PANTON -VALENTINE: leucotoxicalas dos ultimas toxinas están formadas por componente S y componente, ambas forman poros que provocan inestabilidad osmótica.
  6. 6. TOXINAS ESTAFILOCOCICAS: TOXINAS EXFOLIATIVAS: Síndrome de la piel escaldada estafilocócica; son dos (ETA y ETB) que se unen a glucolipidos GM4. ENTEROTOXINAS: (A a E; G a I); y tres subtipos de enterotoxina C. la enterotoxina a se asocia con mayor frecuencia a enfermedad, C y D a productos lácteos contaminados y B produce colitis pseudomenbranosa estafilococica. TOXINA 1 DEL SINDROME DEL SHOCK TOXICO (TSST-1): es un superantígeno que estimula la liberación de citocinas y provoca extravasación de células endoteliales. A altas concentraciones tiene efectos citotoxicos en células.
  7. 7.  COAGULASA: ligada ( a la  FIBRINOLISINA: pared de estafilococo, puede “estafilocinasa”; disuelve los convertir directamente fibrinogeno coágulos de fibrina en fibrina) o libre ( reacciona con  LIPASAS: importante en un factor del plasma para formar invasión a tejidos cutáneos y una estafilotrombina. subcutáneos e infecciones CATALASA: cataliza la cutáneas superficiales ( forúnculos, conversión de H2O2 en agua y carbunco). oxigeno.  NUCLEASA: termoestable. HIALURONIDASA:  PENICILINASA (β lactamasa): hidroliza los ácidos hialuronicos la presencia de plásmidos (matriz acelular del tejido transmisibles aseguro la conectivo). Diseminación de distribución de esta enzima. S.aureus.
  8. 8. Escuche bien… catalasa negativa
  9. 9. AGAR MANITOL SALADOColonias amarillas Colonias rojas S.aureus S.epidermidis
  10. 10. COAGULASA (+) (-) S.aureus S. No aureusFUNDAMENTO a. Una endocoagulasa o "clumping factor" que está unida a la pared celular (test en placa). b. Una exocoagulasa o que actúa mediante la activación de un factor (CRF), formándose un complejo coagulasa-CRF, el cual reacciona con el fibrinógeno produciéndose un coágulo de fibrina
  11. 11. PRESENCIA DE DNAsa (+) (-) S.aureus S.epidermidis S.saprophyticus S.haemolyticus S.capitis Enzima termoestable DNAsa es capaz de clivar los enlacesFUNDAMENTO fosfodiester internos de la molécula de ADN. Se siembra una colonia de estafilococo en forma de moneda enPROCEDIMIENTO una placa de medio sólido que contiene DNA y verde de metilo. Se incuba 18 horas a 35º.
  12. 12. POSITIVONEGATIVO
  13. 13. SUCEPTIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA RESISTENTE SENSIBLE S.aureus S.epidermidis S.saprophyticus Varias especies del Género Staphylococcus son resistentes a laFUNDAMENTO novobiocina (disco de 5 µg). Se siembra una placa de agar sangre con un hisopo embebidoPROCEDIMIENTO en una suspensión de la cepa a estudiar. Luego se aplica el disco de novobiocina y se incuba a 35º por 18 horas.
  14. 14. • Producción de una nueva proteína fijadora de penicilina.• PBP2 (no esta en cepas sensibles), codifican un gen llamado mecA . CUANDO LA CEPA ES RESISTENTE A METICILINA, SIGNIFICA:Resistente a todos los antibioticos β-lactamicos (penicilinas, cefalosporinas y carbapenems).
  15. 15. • RESISTENCIA A LOS GLUCOPEPTIDOS• RESISTENCIA A LOS MACROLIDOS• RESISTENCIA A LOS AMINOGLUCOSIDOS• RESISTENCIA A LAS QUINOLONAS (MUTACIONES DEL GEN Gyr)
  16. 16. CEPAS BACTERIANAS (sospechosas de SARM) SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA (OXACILINA)DETERMINACIÓN DE RESISTENCIA A OXACILINA CON FOX (30 µG)DETERMINACIÓN DE LA RESISTENCIA A OXACILINA MEDIANTE EL MÉTODO DE DESCARTE (SCREENNING TEST) DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN INHIBITORIA MÍNIMA (CIM) A OX
  17. 17. DETERMINACIÓN DE LA PRODUCCIÓN DE PBP2A PROCEDIMIENTO DE EXTRACCIÓN DE LA PBP2A PROCEDIMIENTO DE LA AGLUTINACIÓN DE PARTÍCULAS DE LÁTEXDETECCIÓN DEL GEN mecA (DETERMINANTE DE LA RESISTENCIA A OXACILINA) http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0075-52222008000100004&script=sci_arttext

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