SlideShare a Scribd company logo
1 of 88
PEMERIKSAAN SEROLOGIPEMERIKSAAN SEROLOGI
TUBERKULOSIS, DEMAM TIFOIDTUBERKULOSIS, DEMAM TIFOID
DAN SIFILISDAN SIFILIS
Prof. Dr. JUSAK NUGRAHA, dr., Sp.PKProf. Dr. JUSAK NUGRAHA, dr., Sp.PK
(K-GH, K-PTI, K-AI) MS.(K-GH, K-PTI, K-AI) MS.
KULIAH FK ‘15KULIAH FK ‘15
PenyakitTuberkulosis
Menyerang 1
/3 penduduk dunia
Indonesia menduduki peringkat ke 5
Survey terbaru: prevalensi lebih tinggi
daripada perkiraan sebelumnya
Dampak sosio ekonomi besar
Meningkatnya kekebalan thd OAT
MDR-TB
XDR-TB
TB + HIV
TB DI INDONESIATB DI INDONESIA
• PENYEBAB KEMATIAN KE DUA ( SKRT 92)
• KASUS 445.000/TAHUN
• PREVALENSI TB : 0,29 % ( SKRT 79-82 )
• MENINGGAL 175.000/TAHUN
• HIV + TB
• MULTIPLE DRUG RESISTANCE ( RIF + INH )
• USIA PRODUKTIF ( ¾ )
• SEPARUH TIDAK TERDIAGNOSIS !
TB : salah satu pembunuh terbesar bersamaTB : salah satu pembunuh terbesar bersama
AIDS dan malariaAIDS dan malaria
• Setiap tahun membunuh sekitar 2 juta orang danSetiap tahun membunuh sekitar 2 juta orang dan
bertambahnya 9 juta kasus barubertambahnya 9 juta kasus baru
• TB sebagai pembunuh utama bersama HIV/AIDSTB sebagai pembunuh utama bersama HIV/AIDS
• Hampir setengah juta kasus baru multi-drugHampir setengah juta kasus baru multi-drug
resistance (MDR) TB terjadi setiap tahunresistance (MDR) TB terjadi setiap tahun
• KasusKasus extensively drug-resistantextensively drug-resistant (XDR) TB(XDR) TB
diketahui semakin meningkat (ancaman global)diketahui semakin meningkat (ancaman global)
BTA DAHAK MIKROSKOPIS
LANGSUNG
• Keunggulan:
– Murah, praktis, cepat, spesifik
• Kelemahan:
– Kurang sensitiv
• Usaha meningkatkan sensitifitas:
– Pelaksanaan SPS (Sewaktu-Pagi-Sewaktu)
– Pengecatan Auramine, Rhodamine
RAPID DIAGNOSIS OF DRUG-RAPID DIAGNOSIS OF DRUG-
RESISTANT TUBERCULOSISRESISTANT TUBERCULOSIS
1.1. Xpert MTB/RIFXpert MTB/RIF
2.2. line probe assay (LPA)line probe assay (LPA)
Xpert MTB/RIF testing we might be
underestimating the burden of drug-
resistant tuberculosis and indicate that
country-specific probes need to be
designed to increase the sensitivity of the
Xpert MTB/RIF.
SEROLOGI & REVERSESEROLOGI & REVERSE
SEROLOGY FOR TB DETECTIONSEROLOGY FOR TB DETECTION
Serologi (antibodi detection) tidak dipakaiSerologi (antibodi detection) tidak dipakai
menggantikan BTA untuk diagnosis TBmenggantikan BTA untuk diagnosis TB
Hanya dipakai untuk membantu diagnosisHanya dipakai untuk membantu diagnosis
bersama pemeriksaan lain , terutamabersama pemeriksaan lain , terutama
bila antigen sulit didapat.bila antigen sulit didapat.
Reverse serology (antigen detection)Reverse serology (antigen detection)
dengan Rapid Test (lateral flow/ICT) :dengan Rapid Test (lateral flow/ICT) :
metode mudah / cepat dan dapatmetode mudah / cepat dan dapat
membedakan MTB dan NTMmembedakan MTB dan NTM
INDIKASI SEROLOGI TBINDIKASI SEROLOGI TB
1.1. BTA DAHAK NEGATIFBTA DAHAK NEGATIF
2.2. TB EKSTRAPULMONUMTB EKSTRAPULMONUM
3.3. TB ANAKTB ANAK
4.4. SPESIFISITAS: TGT JENISSPESIFISITAS: TGT JENIS
ANTIGEN (REAKSI SILANG)ANTIGEN (REAKSI SILANG)
Fishman AP, Elias JA.Pulmonary disease and disorder.4ed, New york, Mcgrawhill,2008.p792
Patogenesis (Paradigma Th1 / Th2)
Mycobacterium tuberculosis
ESAT-6 protein lain
Faktor Virulensi
Infeksi
Respons imun
Proteksi
Selluler
Th1 → IFN-γ, IL12
Marka
diagnostik
Humoral
Th2 → Sel B → Ab
Sehat
Th1 >> Th2
Sakit (TB aktif)
Th2 >> Th1
Th2
dominan
Th1
dominan
DETEKSI TUBERKULOSISDETEKSI TUBERKULOSIS
LATENLATEN
Pengganti Uji tuberculin (PPD) : deteksi adanya
serokonversi
Pengukuran IFN-γ dari limfosit T, setelah stimulasi
dengan PPD/ESAT-6
• ELISPOT
• QuantiFERON-TB (IGRA = Interferon γ Release
Assay)  diakui ISTC
Adanya reaksi: pernah kontak dgn M. tb
Aktif atau Latent  ditentukan oleh cutoff point.
TES SKRINING
1. Tuberculins Skin Test / Mantoux / PPD
2. IGRA (Interferon gamma release assay) :
mendeteksi adanya Sel T memory terhadap
Antigen TB, contoh:
a) QuantiFERON TB-Gold
b) T-Spot TB
Diagnosis of tuberculosis
Latent Infection Active tuberculosis
Smear examination
Solid and liquid culture
Identification
Susceptibility testing methods
TST
IFN-γ techniques
Molecular
Epidemiology
RFLP
Spoligotyping
MIRU
Molecular methods
-Detection
-Identification
-Detection of resistance
• RFLP (RFLP (IS6110)IS6110)
• SpoligotypingSpoligotyping
• MIRUsMIRUs
Molecular epidemiologyMolecular epidemiology
• Insertion sequence present exclusively in the
M.tuberculosis complex: IS6110
• High polymorphism between no related strains
regarding the number of copies and their
localization in the chromosome.
• Advantages: High discriminative power.
• Disadvantages: Slow, laborious and with
certain complexity.
Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP)
• The DR sequences (direct repeat) are repeated
sequences of 36 bp in only one locus of the
M.tuberculosis chromosome, separated by sequences
of 34 to 41 bp.
• The technique is based on a PCR of the locus where
the DR sequences are located. The amplification
product is hybridized with oligos synthesized from the
inter-DR spaces.
• The presence or absence of different DR allows a
specific pattern for each strain.
• Advantages: Few DNA is required, easy interpretation
• Disadvantages: Lesser discriminative power than the
RFLP.
Spacer oligonucleotype typing (Spoligotyping)
• Determine the number of repetitive units in 12 (15 or 20)
different locus of one genetic sequence called
“mycobacterial interspersed repetitive units (MIRUs)”. The
number of repetitions is detected by PCR.
• The number of repetitive units in each locus is calculated
by the size of the fragment amplified with the specifics
primers.
• MIRU-VNTR is more discriminative than the spoligotyping
and similar to the RFLP-IS6110.
• Advantages: rapid, simple and automatic.
• Disadvantages: In study
Mycobacterial Interspersed Repetitive Units (MIRU)Mycobacterial Interspersed Repetitive Units (MIRU)
O'Garra A, et al. The immune response in tuberculosis. Annu Rev Immunol. 2013;31:475-527. doi: 10.1146/annurev-immunol-
032712-095939.
Heterogeneity Resulting From M. tuberculosis
Infection
KESIMPULANKESIMPULAN
DIAGNOSIS LABORATORIUM UNTUK TB
MASIH TERUS DIKEMBANGKAN
• Baku emas: tetap Biakan / KulturBaku emas: tetap Biakan / Kultur
• BTA dahak: ditingkatkan sensitivitasnyaBTA dahak: ditingkatkan sensitivitasnya
• Metode lain: terutama pada BTA negatifMetode lain: terutama pada BTA negatif
• Metode canggih: lebih cepat , lebih mahalMetode canggih: lebih cepat , lebih mahal
• Perlu dipelajari untung ruginya setiapPerlu dipelajari untung ruginya setiap
diagnostik barudiagnostik baru
• Lab perlu berhati-hati memilih tes diagnostik,Lab perlu berhati-hati memilih tes diagnostik,
sesuaikan dengan kebutuhan.sesuaikan dengan kebutuhan.
TERIMA KASIH ATAS
PERHATIAN ANDA
UJI SEROLOGI DEMAMUJI SEROLOGI DEMAM
TIFOIDTIFOID
Dr. Jusak Nugraha, dr, MS,SpPK (KGH,KIm,KT-I)Dr. Jusak Nugraha, dr, MS,SpPK (KGH,KIm,KT-I)
Bagian Patologi KlinikBagian Patologi Klinik
FK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, SurabayaFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya
PEMERIKSAANPEMERIKSAAN
LABORATORIUM DEMAMLABORATORIUM DEMAM
TIFOIDTIFOID
1.1. TES WIDALTES WIDAL
2.2. TES IgM SalmonellaTES IgM Salmonella
3.3. ELISAELISA
4.4. Deteksi cepat Antigen (reversed serology)Deteksi cepat Antigen (reversed serology)
5.5. BIAKAN / KULTUR DARAHBIAKAN / KULTUR DARAH
6.6. PCRPCR
7.7. BIAKAN URINE / TINJABIAKAN URINE / TINJA
INDIKASI
Membantu menegakkan Dx & menentukan Px
dari penyakit DEMAM TIFOID
SUPAYA MENDAPAT PENGERTIAN YANG JELAS
MENGENAI LANDASAN DASAR& INTERPRETASI
TES, PERLU DIKETAHUI :
- Sifat-sifat antigenik dari S. typhi/paratyphi
- PATOGENESIS demam tifoid
Gambar 34. Struktur antigen Salmonella
Jenis AntigenJenis Antigen
• Antigen O" :: polysaccharides associated with
the lipopolysaccharide (LPS) of the bacterial
outer membrane.
• "H" antigens are proteins associated with the
bacterial flagella (singular; flagellum).
• Pathogenic strains of Salmonella typhi carry an
additional antigen, "Vi", so-called because of the
enhanced virulence of strains that produce this
antigen, which is associated with a bacterial
capsule.
Salmonella Antigen O Antigen H
Fase I
Antigen H
Fase II
Grup A:
S. paratyphi A
Grup B:
S. paratyphi B
S. Derby
S. Typhimurium
S. Heildelberg
Grup C:
S. cholerae-suis
S. pratyphi C
S. oranienburg
S. garoli
S. thompson
S. bareilly
Grup D:
S. typhi
S. enteritidis
S. pullorum-gallinarum
Grup E:
S. weltevreden
S. anatum
Grup F:
S. durham
S. worthington
S. cubana
1, 2, 12
1, 4, 5, 12
1, 4, 5, 12
1, 4, 5, 12
(1), 4, 5, (12)
6, 7
6, 7, (Vi)
6, 7
6, 7
6, 7
6, 7
9, 12, (Vi)
1, 9, 12
1, 9, 12
3, 10
3, 10
13, 23
1, 13, 23
1, 13, 23
a
b
f, g
i
r
c
C
m, t
i
k
y
d
g, m
-
r
e, h
b
z
z29
-
1, 2
(1, 2)
1, 2
1, 2
1, 5
1, 5
-
1, 6
1, 5
1, 5
-
-
-
z6
1, 6
enz 15
1, w
-
38
Tabel 1. Antigen Salmonella yang menyebabkan demam tifoid dan paratifoid
Tabel 2. Antigen O yang spesifik pada demam tifoid
(WHO, 2003. Background document : The diagnosis, treatment and prevention of typhoid fever)
39
d. thorac
Sirkulasi
Bakteriemi 1
Pl. Player
PATOGENESIS DEMAM TIFOID
Organ2
7-10 hari
Bakteriemi 2
Hepar
Lien
Ren
Sutul
S. typhi
≥ 105
Gambar 36. Patogenesis demam tifoid
BAKTERIEMI 2 KAPSEL Vi
Fagositosis sukar
Jalur alternatif
komplemen
Lisis
ENDOTOKSIN ( AG
– O )
GEJALA KLINIS
7 – 10 HARI ( PERUBAHAN KAPSEL )
Fagositosis Pembengkakan
organ-organ
Sel-sel
imunokompeten
Tak ada bakteriemi
(akhir mgg. Ke 2)
AGLUTININ
O H Vi
Gambar 37. Imunopatogenesis demam tifoid
Gambar 38. Roseola di dada anak dengan demam tifoid
Sensitivity of TUBEX TF vs Antibody respond & Days after infection
Ag. pada permukaan sel
Ab.
Aglutinasi
Tak larut
PRINSIP DASAR UJI WIDAL yi. UJI AGLUTINASI
Gambar 39. Prinsip dasar reaksi aglutinasi
ANTIGEN UNTUK TES WIDAL :
2. Ag. H ( flagella ); S. typhi yang motil → + dg formalin 0,3%
1. Ag. O ( somatik ); S. typhi tak motil → + dg alkohol abs.
Pengawet larutan phenol 0,5%
3. Ag. PA; S.paratyphi A → + dg formalin 0,3%
4. Ag. PB; S.paratyphi B → + dg formalin 0,3%
Ad 1, sebelum dipakai → encerkan → kons. Alk, 12%
PROSEDUR PEMERIKSAAN
- DI ATAS GELAS OBYEK
- 2 TETES ( ± 40 µl ) SERUM YG DIENCERKAN
- 2 TETES ( ± 40 µl ) SUSPENSI
ANTIGEN (O, H, PA, PB)
DIGOYANG
AGLUTINASI
t° RUANGAN 5 MENIT
POSITIF LANJUTKAN dg. PENGENCERAN
SELANJUTNYA
NEGATIF STOP DILAPORKAN : NEGATIF
Pengenceran serum:
O
H
PB
Dimulai titer : 1: 40
PA
Untuk : Dimulai titer : 1: 80
Dimulai titer : 1:20
AMBANG ATAS NILAI NORMAL
- DILAKUKAN PADA 120 ORANG SEHAT
- AGLUTININ O 1: 80
H 1: 80
PA 1: 40
PB 1: 160
KRITERIA DIAGNOSTIK
DEMAM TIFOID
I. TITER AGLUTININ O atau
AGLUTININ O&H
≥ 2X ambang
atas nilai normal
II. DALAM JANGKA WAKTU 5 - 7 HARI :
TITER MENINGKAT 4x
2.1. CARA KLASIK :
: Pengenceran serial dalam 4 baris
Baris 1 diberi Ag O,
Baris 2 diberi Ag H,
Baris 3 diberi PA,
Baris 4 diberi PB,
Inkubasi ; 37°C, 24 jam
2.2 CARA STOKES :
Prinsip hampir sama dengan cara klasik
2. Uji tabung.
PERBEDAANNYA
a. Serumnya ; waterbath 56°C, ½ jam
b. Diluent-nya ; PBS, pH 7,4.
c. Inkubasinya ; tbg O → waterbath 37°C, 4 jam
H, PA, & PB → waterbath 50°C, 2 jam
Pembacaannya : - Segera
- Lebih baik setelah semalam pada 4°C
`
Gambar 41. Aglutinat di dasar tabung uji Widal yang
positif
Gambar 42. Endapan antigen pada dasar tabung uji
Widal yang positif
FAKTOR-FAKTOR YANG PERLU DIPERHATIKAN.
4.1. Dr hasil 1X tes belum dapat ditarik kesimpulan yang
berarti. Perlu ulangan setelah 5-7 hari
4.2. Harga normal tes Widal tabung.
Aglutinin O : 1/160
Aglutinin H : 1/160
Aglutinin PA : 1/80
Aglutinin PB : 1/320
4.3. Vaksinasi; aglutinin H dapat dipertahankan beberapa
tahun,
4.4. Antibiotika ; dapat memperlambat kenaikan titer
4.5. Febris ; dapat memberikan kenaikan titer
4.6. Narkotik ; Ketagihan → hasil pos. semu
4.7. Stadium penyakit ; mgg ke 1 → neg./dlm batas normal
mgg ke 2 titer mulai naik → puncaknya mgg ke 5 - 6;
4.8. Obatnya-2 imunosupresif; hambat pembentukan
aglutinasi
4.9. Peny.-2 tertentu ; agamaglobulinemia & keganasan.
4.10. Infeksi campuran ; mis TB milliair → sering neg.
semu.
IgM SalmonellaIgM Salmonella
- pemeriksaan antibodi terhadap antigen O9,pemeriksaan antibodi terhadap antigen O9,
lebih spesifik dari Widallebih spesifik dari Widal
- semi kuantitatif,semi kuantitatif,
Ada beberapa metode:Ada beberapa metode:
1.Inhibitions Magnetic Binding Immunoassay
(IMBI)
2.2.Rapid test (Immunochromatography / lateralRapid test (Immunochromatography / lateral
flow)flow)
Hasil: dalam skala warna
tc
1. Penetesan Brown Reagen 45 µl
ke dalam V-shape wells.
2. Penambahan spesimen &
kontrol 45 µl ke dalam V-shape
dan dilarutkan.
3. Penetesan Blue Reagen 90 µl.
4. Inkubasi dan homogenasi 2
menit pada suhu kamar.
5. Pemisahan magnetik 5 menit
dan pembacaan hasil.
58
Interpretasi hasil
1 2 3
Kontrol Neg Kontrol Pos Serum Sampel Pos
5 min
Pemisahan Magnetik
0 48
Interpretasi hasil
0 2 4 6 8 10
Skor 0-2: negatif, 3-10: positif
59
- percobaan: antigen
(simulasi bahan terlarut pada bufer, serum, & urine; bakteri utuh
pada media kultur)
antigen mengikat partikel indikator dan menghambat ikatan
partikel indikator dengan partikel magnet
Gambar 1a. Ilustrasi ikatan inhibisi antigen–antibodi pada pemeriksaan antibodi dan antigen
60
UJI SEROLOGIKUJI SEROLOGIK
UNTUK SYPHILIS ( STS )UNTUK SYPHILIS ( STS )
Bagian Patologi KlinikBagian Patologi Klinik
FK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, SurabayaFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya
STS MEMEGANG PERANAN PENTING
DALAM Dx LAB. DR LUES SEBAB :
- Perjalanan penyakit lama
- Belum berhasil membenihkan T. pallida pada
media pembenihan.
- Pemeriksaan mikroskop memberi bbp. kesukaran a.l. ;
* bahan harus diambil dari lesi yang manifes dalam
waktu singkat,
* sering memberi hasil negatif semu.
INFEKSI DG T.pallida AKAN MENIMBULKAN
2 JENIS Ab.
1. Ab Non-treponemal/reagin ; baru terbentuk setelah
infeksi → kel. Limfe regional ( kerusakan jaringan ).
2. Ab Treponemal ; bereaksi dg T.pallida /closely
related strains.
Dapat dibedakan 2 jenis Ab.
a. Group Treponemal Ab ; thd Ag somatik dr
semua treponema
b. Specific Treponemal Ab ; thd Ag spesifik
dr T.pallidum.
IgG Treponemal Ab
Reagin
IgM
Treponemal Ab
Gambar 29. Kadar beberapa Ab selama perjalanan Syphilis
2560
640
160
40
10
Rx
Ig. G-FTA-AbsTPHA
Ig. M
-FTA-Abs.
RPR /VDRL
Waktu
Kontak
Titer
Gambar 30. Pengaruh Rx pada titer Ab thd Syphilis
Gambar 31. Ulcus durum Lues I
Gambar 32. Syphilis Stadium II ( Condylomata Lata )
BEBERAPA STS YANG DAPAT DIKERJAKAN DI
INDONESIA
1. Tes VDRL
2. Tes Treponema pallidum Immobilization ( TPI )
3. Tes Treponema pallidum Hemagglutination ( TPHA ).
4. Tes Fluorescence Treponemal Antibody Absorption
( FTA-ABS )
5. Enzyme – linked Immunosorbant Assay ( ELISA )
UJI V.D.R.L.
Prinsip dasar : Uji presiptasi
Ag. : Lipoid Ag (Cardiolipin-lecithin-cholesterol)
Serum : Waterbath 56°C, 30 men. → Inaktivasi C
Dikenal 2 macam teknik.
1. Uji Tabung ; dibaca secara Makroskopis.
2. Uji Slide ; dibaca secara Mikroskopis.
PEMBACAAN HASIL UJI V.D.R.L
A. Kualitatif : di bawah mikroskop ( pemb. 100 X )
a. Gumpalan besar/sedang → Positif
b. Gumpalan kecil → Positif
lemah
c. Tiada gumpalan/sedikit kasar → Negatif
B. Semi-kuantitatif : Pd serum yg pos./pos. lemah
pengenceran secara serial → Titer
Titer 1:4 ;Di Indonesia dianggap syphilis
Pembagian Uji VDRL atas Dasar Cara
Pengambilan Sampel.
1. Uji VDRL Mikro
- 5 tetes drh ujung jari tengah +0,15 ml PZ
- Hasil dinyatakan secara kualitatif (+/-)
- Bila pos.,sesuai dengan titer ≥ 1 : 2
- Dipakai untuk survei lapangan/uji saring
2. Uji VDRL Makro
- 5 cc drh dr V. Cubiti. Hasil dinyatakan secara
kualitatif maupun semi-kuantitatif ( titer )
TPHA.
Prinsip Dasar.
- Hemaglutinasi Pasif
- Sebagai Ag ; T. pallida strain Nichol
- Sebagai carrier ; SDM Kalkun.
Sensitivitas : Baik kecuali L I.
Spesifisitas : Cukup baik
Penting : Tak dapat dipakai untuk mengikuti hasil Rx.
Gambar 33. Uji TPHA
POSITIF SEMU BIOLOGIK ( BFP )
Serologis pos. tanpa syphilis, dapat terjadi :
1. akut disebabkan penyakit-2 akut / stres ( imunisasi )
Seperti mononucleosis infeksiosa & demam tifoid,
2. menahun ( kronis ) disebabkan penyakit-2 menahun
seperti frambusia, lepra, penyakit kolagen ( LE ),
malaria, kehamilan dan narkotika.
Titernya umumnya rendah kecuali pada mononukleosis
infeksiosa
VDRL MAKRO KUANTITATIF
mempunyai Arti klinis yang penting sebab :
Merupakan garis Dasar untuk Evaluasi hasil
uji laboratorium selanjutnya.
INTERPRETASI HASIL
Bila pada uji ulangan didapatkan :
1. Titer↑ , menunjukan adanya ;
a. infeksi dengan T. pallida
c. relapse pd penderita-2 yg Serofast
b. re-infeksi
2. Titer ↓ → Rx adekuat pd pend Lues dini
3. Titer tetap → reagin masih ada dalam
drh stlh Rx
BILA STS TREPONEMAL POSITIF.
1. Sedang menderita lues ( peny. Aktif ) atau
2. Pernah menderita lues ttp telah sembuh.
Tak dapat untuk mengikuti hasil Rx.
Keunggulan Ig. M-FTA-Abs & Ig. M-ELISA.
1. Sebagai parameter biolgis apakah Rx masih diperlukan
2. Untuk Dx Lues kongenital pada bayi yang baru lahir
Bila tes neg., tak menyingkirkan Dx Lues kongenita.
KESIMPULAN.
Paling Ideal ; Ig. M- ELISA ( Dx, keaktivan,
mengikuti hasil Rx )
Di Indonesia ; TPHA → Dx
VDRL → Aktivitas &
mengikuti hasil Rx
Neurosyphilis : VDRL → Dx
Jumlah sel
Protein Total
Keaktivan &
mengikuti hasil Rx
©2012 MFMER | slide-80
Traditional Algorithm
Non-treponemal test (e.g., RPR)
Treponemal test (e.g., FTA)
Advantages:
• Results show good correlation with disease status
• Rapid, inexpensive screening method
• Excellent option for laboratory with small throughput
• Recommended by the CDC
Negative for syphilis
Non-reactive
Non-reactive
Syphilis Negative for syphilis
Reactive
Reactive
24
©2012 MFMER | slide-81
• Incidence of disease impacts the positive predictive value of
the assay
http://www.cdc.gov/std/stats09/figures/33.htm
Rate per 100,000
population
≤0.2
0.21-2.2
>2.2
Cases(inthousands)
Year
Primary and secondary
Early latent
Total syphilis
The Traditional Syphilis Algorithm:
If it works, why change it?
26
©2012 MFMER | slide-82
Reverse Algorithm
Treponemal test (eg, EIA)
Non-Treponemal test (eg, RPR) Negative for syphilis
Non-reactive
Non-reactive
Syphilis Second Treponemal Test (e.g., TP-PA)
Reactive
Reactive
Non-reactiveReactive
Evaluation Required* Negative for syphilis
27
©2012 MFMER | slide-83
• Automated treponemal screening assays are available (i.e.,
EIA, MFI)2
• > 500 sera/9 hr shift by MFI vs. ~ 200 sera/9 hr shift by
manual methods
• Objective interpretation of results
• Results from EIA or MFI can be interfaced with LIS
• Specific screening test for anti-T. pallidum antibodies
• Potentially increased detection of patients with early
syphilis3
:
• Among 560 patients with lesions, 18 (3.2%) were EIA (+), DFA
(+) and RPR (-)
• Among 9,137 patients with EIA (+), RPR (-) results, 54 became
RPR (+) on follow-up testing
Reverse Algorithm:
Advantages
28
©2012 MFMER | slide-84
• Higher cost/sample
• Higher assay complexity
• Increased detection of patients with screen (+), RPR (-)
results4,5
:
• CDC - ~56% of EIA reactive samples are non-reactive by
RPR
• How do we interpret these results?
Reverse Algorithm:
Limitations
29
©2012 MFMER | slide-85
Case #1
• 37-year-old with HIV
• Presents to primary care physician with a 2-week
history of fatigue, intermittent fever and new rash on
palms and soles
• Previously resolved genital lesion
• Syphilis serology ordered
• Syphilis IgG by EIA: positive
• RPR: positive, titer of 1:64
Reverse Syphilis Screening Algorithm:
Result Interpretation
30
©2012 MFMER | slide-86
Case #1 Conclusion
• No further testing needed on this sample
• Interpretation: “Untreated or recently treated
syphilis.” Follow CDC treatment guidelines4
• For treatment follow-up:
• Samples can be tested directly by RPR.
• A 4-fold decrease in RPR titers (eg, 1:64 to
1:16) is interpreted as response to therapy
Reverse Syphilis Screening Algorithm:
Result Interpretation
31
©2012 MFMER | slide-87
Case #2
• 23-year-old female
• Evaluated during first-trimester, routine pregnancy
visit
• Previously healthy
• Syphilis serology ordered
• Syphilis IgG by EIA: positive
• RPR: negative
• Second treponemal test, TP-PA: negative
Reverse Syphilis Screening Algorithm:
Result Interpretation
32
©2012 MFMER | slide-88
Case #2 Conclusion
• Interpretation: “Probable false-positive screening test.
Negative for syphilis.”
• False-positive serologic tests are not uncommon
during pregnancy and confirmatory testing is often
required
• Syphilis IgM testing not recommended for routine
pregnancy screening
Reverse Syphilis Screening Algorithm:
Result Interpretation
33
©2012 MFMER | slide-89
Case #3
• 50-year-old immigrant from Somalia
• Pre-kidney transplant evaluation
• Syphilis serology ordered
• Syphilis IgG by EIA: positive
• RPR: negative
• TP-PA: positive
Reverse Syphilis Screening Algorithm:
Result Interpretation
34
©2012 MFMER | slide-90
Case #3 Conclusion
• Interpretation: “Historical and clinical evaluation
required.”
• During evaluation with provider, patient indicates no
known history of treatment for syphilis.
• Patient treated for possible latent syphilis
Reverse Syphilis Screening Algorithm:
Result Interpretation
35
Terima Kasih atas Perhatian Anda

More Related Content

What's hot

Enzim pada Organ Hati
Enzim pada Organ HatiEnzim pada Organ Hati
Enzim pada Organ Hatidimar aji
 
Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)
Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)
Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)dr. Bobby Ahmad
 
Pelatihan Quality Control
Pelatihan Quality Control Pelatihan Quality Control
Pelatihan Quality Control ferinurgianto
 
Skenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosis
Skenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosisSkenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosis
Skenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosisSyscha Lumempouw
 
CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)
CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)
CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)PRAMITHA GALUH
 
Dermatitis kontak alergi
Dermatitis kontak alergiDermatitis kontak alergi
Dermatitis kontak alergiUsqi Krizdiana
 
Juknis HIV: Pedoman IMS 2011
Juknis HIV: Pedoman IMS 2011Juknis HIV: Pedoman IMS 2011
Juknis HIV: Pedoman IMS 2011Irene Susilo
 
Tuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu sri
Tuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu sriTuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu sri
Tuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu srimartaagustinasirait
 
Pemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlm
Pemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlmPemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlm
Pemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlmmateripptgc
 
Pemeriksaan faeses
Pemeriksaan faesesPemeriksaan faeses
Pemeriksaan faesesAmat Rajasa
 
Pembentukan batu kemih 2013
Pembentukan batu kemih 2013Pembentukan batu kemih 2013
Pembentukan batu kemih 2013Regi Septian
 
Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011
Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011
Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011Surya Amal
 

What's hot (20)

Metabolisme bilirubin
Metabolisme bilirubinMetabolisme bilirubin
Metabolisme bilirubin
 
Rheumatoid factor
Rheumatoid factorRheumatoid factor
Rheumatoid factor
 
Enzim pada Organ Hati
Enzim pada Organ HatiEnzim pada Organ Hati
Enzim pada Organ Hati
 
P 3b kolesistitis
P 3b kolesistitisP 3b kolesistitis
P 3b kolesistitis
 
Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)
Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)
Trauma Buli-Buli (Vesika Urinaria)
 
Px gol.darah (4)
Px gol.darah (4)Px gol.darah (4)
Px gol.darah (4)
 
Pengantar imunoasai
Pengantar imunoasaiPengantar imunoasai
Pengantar imunoasai
 
Pelatihan Quality Control
Pelatihan Quality Control Pelatihan Quality Control
Pelatihan Quality Control
 
Skenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosis
Skenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosisSkenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosis
Skenario 20.5 Dermatofitosis & Non-dermatofitosis
 
Tutor hema lulut
Tutor hema lulutTutor hema lulut
Tutor hema lulut
 
Kimia klinik tutor 2
Kimia klinik tutor 2Kimia klinik tutor 2
Kimia klinik tutor 2
 
CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)
CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)
CARIK CELUP URINE (REFLACTAN)
 
Dermatitis kontak alergi
Dermatitis kontak alergiDermatitis kontak alergi
Dermatitis kontak alergi
 
Juknis HIV: Pedoman IMS 2011
Juknis HIV: Pedoman IMS 2011Juknis HIV: Pedoman IMS 2011
Juknis HIV: Pedoman IMS 2011
 
Th6
Th6Th6
Th6
 
Tuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu sri
Tuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu sriTuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu sri
Tuberkulosis milier (milliary tb) dosen pkk ibu sri
 
Pemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlm
Pemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlmPemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlm
Pemeriksaan anti sterptolisyn (asto) xi tlm
 
Pemeriksaan faeses
Pemeriksaan faesesPemeriksaan faeses
Pemeriksaan faeses
 
Pembentukan batu kemih 2013
Pembentukan batu kemih 2013Pembentukan batu kemih 2013
Pembentukan batu kemih 2013
 
Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011
Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011
Buku Saku Lintas Diare, edisi-2011
 

Viewers also liked

Tpibaru7
Tpibaru7Tpibaru7
Tpibaru7andreei
 
Referatbaru
ReferatbaruReferatbaru
Referatbaruandreei
 
Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14
Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14
Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14Viiindri27
 
Demam tipoid
Demam tipoidDemam tipoid
Demam tipoidejjariza
 
Management of Abnormal TORCH Results :an update Through case studies
Management of Abnormal TORCH  Results :an update Through case studies   Management of Abnormal TORCH  Results :an update Through case studies
Management of Abnormal TORCH Results :an update Through case studies Lifecare Centre
 

Viewers also liked (10)

Tifoid Pada Anak
Tifoid Pada AnakTifoid Pada Anak
Tifoid Pada Anak
 
Tpibaru7
Tpibaru7Tpibaru7
Tpibaru7
 
Referatbaru
ReferatbaruReferatbaru
Referatbaru
 
Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14
Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14
Soal bakteriologi (dwi p) bab 8-14
 
Daftar harga new reguler1
Daftar harga new reguler1Daftar harga new reguler1
Daftar harga new reguler1
 
Sejarah Komputer.pdf
Sejarah Komputer.pdfSejarah Komputer.pdf
Sejarah Komputer.pdf
 
Demam tipoid
Demam tipoidDemam tipoid
Demam tipoid
 
Management of Abnormal TORCH Results :an update Through case studies
Management of Abnormal TORCH  Results :an update Through case studies   Management of Abnormal TORCH  Results :an update Through case studies
Management of Abnormal TORCH Results :an update Through case studies
 
Toxoplasma gondii
Toxoplasma gondiiToxoplasma gondii
Toxoplasma gondii
 
Baciloscopía directa
Baciloscopía directaBaciloscopía directa
Baciloscopía directa
 

Similar to Serologi fk 15

Alur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb ro
Alur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb roAlur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb ro
Alur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb royosef sugi
 
Informasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptx
Informasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptxInformasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptx
Informasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptxBankSoal8
 
Presentasi marini
Presentasi mariniPresentasi marini
Presentasi mariniivanho86
 
Tibaru11
Tibaru11Tibaru11
Tibaru11andreei
 
Tibaru11
Tibaru11Tibaru11
Tibaru11andreei
 
pOTENSI-dEPARTEMEN-1.ppt
pOTENSI-dEPARTEMEN-1.pptpOTENSI-dEPARTEMEN-1.ppt
pOTENSI-dEPARTEMEN-1.pptAnonymouswpUzJB
 
PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...
PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...
PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...linda399806
 
Diagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif Obat
Diagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif ObatDiagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif Obat
Diagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif ObatMettaFerdy FerdianFamily
 
dr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdf
dr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdfdr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdf
dr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdfAlifAdhani3
 
Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...
Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...
Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...MuhammadNurDelaphanE
 
dr Theo- TB Paru FK Uncen.pptx
dr Theo- TB Paru FK Uncen.pptxdr Theo- TB Paru FK Uncen.pptx
dr Theo- TB Paru FK Uncen.pptxTheopilus Lay
 
Farmakoterapi_TBC.pptx
Farmakoterapi_TBC.pptxFarmakoterapi_TBC.pptx
Farmakoterapi_TBC.pptxDALISAPARI2021
 
Tuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptx
Tuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptxTuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptx
Tuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptxThyaraaAudiaPutriNag
 
04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptx
04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptx04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptx
04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptxDanielHutabarat15
 
Bab v skrining penapisan dalam epidemiologi
Bab v  skrining penapisan dalam epidemiologiBab v  skrining penapisan dalam epidemiologi
Bab v skrining penapisan dalam epidemiologiNajMah Usman
 
update TB Paru.pptx
update TB Paru.pptxupdate TB Paru.pptx
update TB Paru.pptxssuser4b714e
 

Similar to Serologi fk 15 (20)

Alur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb ro
Alur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb roAlur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb ro
Alur diagnosis tb tb ro dan pemeriksaan lab tb ro
 
Informasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptx
Informasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptxInformasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptx
Informasi Dasar TB dan TB RO bagi kader Final.pptx
 
Presentasi marini
Presentasi mariniPresentasi marini
Presentasi marini
 
Tibaru11
Tibaru11Tibaru11
Tibaru11
 
Tibaru11
Tibaru11Tibaru11
Tibaru11
 
Jin3
Jin3Jin3
Jin3
 
Ti10
Ti10Ti10
Ti10
 
Ti18
Ti18Ti18
Ti18
 
pOTENSI-dEPARTEMEN-1.ppt
pOTENSI-dEPARTEMEN-1.pptpOTENSI-dEPARTEMEN-1.ppt
pOTENSI-dEPARTEMEN-1.ppt
 
PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...
PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...
PIK-TB-Solo-17-maret-2018-Ko-Infeksi-Tuberkulosis-Resisten-Obat-dan-Human-Imm...
 
Diagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif Obat
Diagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif ObatDiagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif Obat
Diagnosis dan Tatalaksana TB Sensitif Obat
 
517 1875-1-sp
517 1875-1-sp517 1875-1-sp
517 1875-1-sp
 
dr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdf
dr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdfdr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdf
dr Alvina Widhani - Profilaksis pasca paparan HIV.pdf
 
Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...
Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...
Add_TATALAKSANA KASUS PENYAKIT PARU DALAM PPK BAGI DOKTER KEMKES 12 Desember ...
 
dr Theo- TB Paru FK Uncen.pptx
dr Theo- TB Paru FK Uncen.pptxdr Theo- TB Paru FK Uncen.pptx
dr Theo- TB Paru FK Uncen.pptx
 
Farmakoterapi_TBC.pptx
Farmakoterapi_TBC.pptxFarmakoterapi_TBC.pptx
Farmakoterapi_TBC.pptx
 
Tuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptx
Tuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptxTuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptx
Tuberkulosis TB, RSUD JAYAPURA, FK Uncen.pptx
 
04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptx
04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptx04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptx
04. TUGAS PPT_IMLTD II_TRANSLATE JURNAL_KELOMPOK 4.pptx
 
Bab v skrining penapisan dalam epidemiologi
Bab v  skrining penapisan dalam epidemiologiBab v  skrining penapisan dalam epidemiologi
Bab v skrining penapisan dalam epidemiologi
 
update TB Paru.pptx
update TB Paru.pptxupdate TB Paru.pptx
update TB Paru.pptx
 

Serologi fk 15

  • 1. PEMERIKSAAN SEROLOGIPEMERIKSAAN SEROLOGI TUBERKULOSIS, DEMAM TIFOIDTUBERKULOSIS, DEMAM TIFOID DAN SIFILISDAN SIFILIS Prof. Dr. JUSAK NUGRAHA, dr., Sp.PKProf. Dr. JUSAK NUGRAHA, dr., Sp.PK (K-GH, K-PTI, K-AI) MS.(K-GH, K-PTI, K-AI) MS. KULIAH FK ‘15KULIAH FK ‘15
  • 2. PenyakitTuberkulosis Menyerang 1 /3 penduduk dunia Indonesia menduduki peringkat ke 5 Survey terbaru: prevalensi lebih tinggi daripada perkiraan sebelumnya Dampak sosio ekonomi besar Meningkatnya kekebalan thd OAT MDR-TB XDR-TB TB + HIV
  • 3.
  • 4. TB DI INDONESIATB DI INDONESIA • PENYEBAB KEMATIAN KE DUA ( SKRT 92) • KASUS 445.000/TAHUN • PREVALENSI TB : 0,29 % ( SKRT 79-82 ) • MENINGGAL 175.000/TAHUN • HIV + TB • MULTIPLE DRUG RESISTANCE ( RIF + INH ) • USIA PRODUKTIF ( ¾ ) • SEPARUH TIDAK TERDIAGNOSIS !
  • 5. TB : salah satu pembunuh terbesar bersamaTB : salah satu pembunuh terbesar bersama AIDS dan malariaAIDS dan malaria • Setiap tahun membunuh sekitar 2 juta orang danSetiap tahun membunuh sekitar 2 juta orang dan bertambahnya 9 juta kasus barubertambahnya 9 juta kasus baru • TB sebagai pembunuh utama bersama HIV/AIDSTB sebagai pembunuh utama bersama HIV/AIDS • Hampir setengah juta kasus baru multi-drugHampir setengah juta kasus baru multi-drug resistance (MDR) TB terjadi setiap tahunresistance (MDR) TB terjadi setiap tahun • KasusKasus extensively drug-resistantextensively drug-resistant (XDR) TB(XDR) TB diketahui semakin meningkat (ancaman global)diketahui semakin meningkat (ancaman global)
  • 6.
  • 7.
  • 8.
  • 9.
  • 10. BTA DAHAK MIKROSKOPIS LANGSUNG • Keunggulan: – Murah, praktis, cepat, spesifik • Kelemahan: – Kurang sensitiv • Usaha meningkatkan sensitifitas: – Pelaksanaan SPS (Sewaktu-Pagi-Sewaktu) – Pengecatan Auramine, Rhodamine
  • 11.
  • 12.
  • 13.
  • 14. RAPID DIAGNOSIS OF DRUG-RAPID DIAGNOSIS OF DRUG- RESISTANT TUBERCULOSISRESISTANT TUBERCULOSIS 1.1. Xpert MTB/RIFXpert MTB/RIF 2.2. line probe assay (LPA)line probe assay (LPA) Xpert MTB/RIF testing we might be underestimating the burden of drug- resistant tuberculosis and indicate that country-specific probes need to be designed to increase the sensitivity of the Xpert MTB/RIF.
  • 15.
  • 16. SEROLOGI & REVERSESEROLOGI & REVERSE SEROLOGY FOR TB DETECTIONSEROLOGY FOR TB DETECTION Serologi (antibodi detection) tidak dipakaiSerologi (antibodi detection) tidak dipakai menggantikan BTA untuk diagnosis TBmenggantikan BTA untuk diagnosis TB Hanya dipakai untuk membantu diagnosisHanya dipakai untuk membantu diagnosis bersama pemeriksaan lain , terutamabersama pemeriksaan lain , terutama bila antigen sulit didapat.bila antigen sulit didapat. Reverse serology (antigen detection)Reverse serology (antigen detection) dengan Rapid Test (lateral flow/ICT) :dengan Rapid Test (lateral flow/ICT) : metode mudah / cepat dan dapatmetode mudah / cepat dan dapat membedakan MTB dan NTMmembedakan MTB dan NTM
  • 17. INDIKASI SEROLOGI TBINDIKASI SEROLOGI TB 1.1. BTA DAHAK NEGATIFBTA DAHAK NEGATIF 2.2. TB EKSTRAPULMONUMTB EKSTRAPULMONUM 3.3. TB ANAKTB ANAK 4.4. SPESIFISITAS: TGT JENISSPESIFISITAS: TGT JENIS ANTIGEN (REAKSI SILANG)ANTIGEN (REAKSI SILANG)
  • 18. Fishman AP, Elias JA.Pulmonary disease and disorder.4ed, New york, Mcgrawhill,2008.p792
  • 19. Patogenesis (Paradigma Th1 / Th2) Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 protein lain Faktor Virulensi Infeksi Respons imun Proteksi Selluler Th1 → IFN-γ, IL12 Marka diagnostik Humoral Th2 → Sel B → Ab Sehat Th1 >> Th2 Sakit (TB aktif) Th2 >> Th1 Th2 dominan Th1 dominan
  • 20.
  • 21. DETEKSI TUBERKULOSISDETEKSI TUBERKULOSIS LATENLATEN Pengganti Uji tuberculin (PPD) : deteksi adanya serokonversi Pengukuran IFN-γ dari limfosit T, setelah stimulasi dengan PPD/ESAT-6 • ELISPOT • QuantiFERON-TB (IGRA = Interferon γ Release Assay)  diakui ISTC Adanya reaksi: pernah kontak dgn M. tb Aktif atau Latent  ditentukan oleh cutoff point.
  • 22. TES SKRINING 1. Tuberculins Skin Test / Mantoux / PPD 2. IGRA (Interferon gamma release assay) : mendeteksi adanya Sel T memory terhadap Antigen TB, contoh: a) QuantiFERON TB-Gold b) T-Spot TB
  • 23.
  • 24. Diagnosis of tuberculosis Latent Infection Active tuberculosis Smear examination Solid and liquid culture Identification Susceptibility testing methods TST IFN-γ techniques Molecular Epidemiology RFLP Spoligotyping MIRU Molecular methods -Detection -Identification -Detection of resistance
  • 25. • RFLP (RFLP (IS6110)IS6110) • SpoligotypingSpoligotyping • MIRUsMIRUs Molecular epidemiologyMolecular epidemiology
  • 26. • Insertion sequence present exclusively in the M.tuberculosis complex: IS6110 • High polymorphism between no related strains regarding the number of copies and their localization in the chromosome. • Advantages: High discriminative power. • Disadvantages: Slow, laborious and with certain complexity. Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP)
  • 27. • The DR sequences (direct repeat) are repeated sequences of 36 bp in only one locus of the M.tuberculosis chromosome, separated by sequences of 34 to 41 bp. • The technique is based on a PCR of the locus where the DR sequences are located. The amplification product is hybridized with oligos synthesized from the inter-DR spaces. • The presence or absence of different DR allows a specific pattern for each strain. • Advantages: Few DNA is required, easy interpretation • Disadvantages: Lesser discriminative power than the RFLP. Spacer oligonucleotype typing (Spoligotyping)
  • 28. • Determine the number of repetitive units in 12 (15 or 20) different locus of one genetic sequence called “mycobacterial interspersed repetitive units (MIRUs)”. The number of repetitions is detected by PCR. • The number of repetitive units in each locus is calculated by the size of the fragment amplified with the specifics primers. • MIRU-VNTR is more discriminative than the spoligotyping and similar to the RFLP-IS6110. • Advantages: rapid, simple and automatic. • Disadvantages: In study Mycobacterial Interspersed Repetitive Units (MIRU)Mycobacterial Interspersed Repetitive Units (MIRU)
  • 29. O'Garra A, et al. The immune response in tuberculosis. Annu Rev Immunol. 2013;31:475-527. doi: 10.1146/annurev-immunol- 032712-095939. Heterogeneity Resulting From M. tuberculosis Infection
  • 30. KESIMPULANKESIMPULAN DIAGNOSIS LABORATORIUM UNTUK TB MASIH TERUS DIKEMBANGKAN • Baku emas: tetap Biakan / KulturBaku emas: tetap Biakan / Kultur • BTA dahak: ditingkatkan sensitivitasnyaBTA dahak: ditingkatkan sensitivitasnya • Metode lain: terutama pada BTA negatifMetode lain: terutama pada BTA negatif • Metode canggih: lebih cepat , lebih mahalMetode canggih: lebih cepat , lebih mahal • Perlu dipelajari untung ruginya setiapPerlu dipelajari untung ruginya setiap diagnostik barudiagnostik baru • Lab perlu berhati-hati memilih tes diagnostik,Lab perlu berhati-hati memilih tes diagnostik, sesuaikan dengan kebutuhan.sesuaikan dengan kebutuhan.
  • 32. UJI SEROLOGI DEMAMUJI SEROLOGI DEMAM TIFOIDTIFOID Dr. Jusak Nugraha, dr, MS,SpPK (KGH,KIm,KT-I)Dr. Jusak Nugraha, dr, MS,SpPK (KGH,KIm,KT-I) Bagian Patologi KlinikBagian Patologi Klinik FK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, SurabayaFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya
  • 33. PEMERIKSAANPEMERIKSAAN LABORATORIUM DEMAMLABORATORIUM DEMAM TIFOIDTIFOID 1.1. TES WIDALTES WIDAL 2.2. TES IgM SalmonellaTES IgM Salmonella 3.3. ELISAELISA 4.4. Deteksi cepat Antigen (reversed serology)Deteksi cepat Antigen (reversed serology) 5.5. BIAKAN / KULTUR DARAHBIAKAN / KULTUR DARAH 6.6. PCRPCR 7.7. BIAKAN URINE / TINJABIAKAN URINE / TINJA
  • 34. INDIKASI Membantu menegakkan Dx & menentukan Px dari penyakit DEMAM TIFOID SUPAYA MENDAPAT PENGERTIAN YANG JELAS MENGENAI LANDASAN DASAR& INTERPRETASI TES, PERLU DIKETAHUI : - Sifat-sifat antigenik dari S. typhi/paratyphi - PATOGENESIS demam tifoid
  • 35. Gambar 34. Struktur antigen Salmonella
  • 36. Jenis AntigenJenis Antigen • Antigen O" :: polysaccharides associated with the lipopolysaccharide (LPS) of the bacterial outer membrane. • "H" antigens are proteins associated with the bacterial flagella (singular; flagellum). • Pathogenic strains of Salmonella typhi carry an additional antigen, "Vi", so-called because of the enhanced virulence of strains that produce this antigen, which is associated with a bacterial capsule.
  • 37. Salmonella Antigen O Antigen H Fase I Antigen H Fase II Grup A: S. paratyphi A Grup B: S. paratyphi B S. Derby S. Typhimurium S. Heildelberg Grup C: S. cholerae-suis S. pratyphi C S. oranienburg S. garoli S. thompson S. bareilly Grup D: S. typhi S. enteritidis S. pullorum-gallinarum Grup E: S. weltevreden S. anatum Grup F: S. durham S. worthington S. cubana 1, 2, 12 1, 4, 5, 12 1, 4, 5, 12 1, 4, 5, 12 (1), 4, 5, (12) 6, 7 6, 7, (Vi) 6, 7 6, 7 6, 7 6, 7 9, 12, (Vi) 1, 9, 12 1, 9, 12 3, 10 3, 10 13, 23 1, 13, 23 1, 13, 23 a b f, g i r c C m, t i k y d g, m - r e, h b z z29 - 1, 2 (1, 2) 1, 2 1, 2 1, 5 1, 5 - 1, 6 1, 5 1, 5 - - - z6 1, 6 enz 15 1, w - 38
  • 38. Tabel 1. Antigen Salmonella yang menyebabkan demam tifoid dan paratifoid Tabel 2. Antigen O yang spesifik pada demam tifoid (WHO, 2003. Background document : The diagnosis, treatment and prevention of typhoid fever) 39
  • 39. d. thorac Sirkulasi Bakteriemi 1 Pl. Player PATOGENESIS DEMAM TIFOID Organ2 7-10 hari Bakteriemi 2 Hepar Lien Ren Sutul S. typhi ≥ 105 Gambar 36. Patogenesis demam tifoid
  • 40. BAKTERIEMI 2 KAPSEL Vi Fagositosis sukar Jalur alternatif komplemen Lisis ENDOTOKSIN ( AG – O ) GEJALA KLINIS 7 – 10 HARI ( PERUBAHAN KAPSEL ) Fagositosis Pembengkakan organ-organ Sel-sel imunokompeten Tak ada bakteriemi (akhir mgg. Ke 2) AGLUTININ O H Vi Gambar 37. Imunopatogenesis demam tifoid
  • 41. Gambar 38. Roseola di dada anak dengan demam tifoid
  • 42. Sensitivity of TUBEX TF vs Antibody respond & Days after infection
  • 43. Ag. pada permukaan sel Ab. Aglutinasi Tak larut PRINSIP DASAR UJI WIDAL yi. UJI AGLUTINASI Gambar 39. Prinsip dasar reaksi aglutinasi
  • 44. ANTIGEN UNTUK TES WIDAL : 2. Ag. H ( flagella ); S. typhi yang motil → + dg formalin 0,3% 1. Ag. O ( somatik ); S. typhi tak motil → + dg alkohol abs. Pengawet larutan phenol 0,5% 3. Ag. PA; S.paratyphi A → + dg formalin 0,3% 4. Ag. PB; S.paratyphi B → + dg formalin 0,3% Ad 1, sebelum dipakai → encerkan → kons. Alk, 12%
  • 45. PROSEDUR PEMERIKSAAN - DI ATAS GELAS OBYEK - 2 TETES ( ± 40 µl ) SERUM YG DIENCERKAN - 2 TETES ( ± 40 µl ) SUSPENSI ANTIGEN (O, H, PA, PB) DIGOYANG AGLUTINASI t° RUANGAN 5 MENIT
  • 46. POSITIF LANJUTKAN dg. PENGENCERAN SELANJUTNYA NEGATIF STOP DILAPORKAN : NEGATIF Pengenceran serum: O H PB Dimulai titer : 1: 40 PA Untuk : Dimulai titer : 1: 80 Dimulai titer : 1:20
  • 47. AMBANG ATAS NILAI NORMAL - DILAKUKAN PADA 120 ORANG SEHAT - AGLUTININ O 1: 80 H 1: 80 PA 1: 40 PB 1: 160
  • 48. KRITERIA DIAGNOSTIK DEMAM TIFOID I. TITER AGLUTININ O atau AGLUTININ O&H ≥ 2X ambang atas nilai normal II. DALAM JANGKA WAKTU 5 - 7 HARI : TITER MENINGKAT 4x
  • 49. 2.1. CARA KLASIK : : Pengenceran serial dalam 4 baris Baris 1 diberi Ag O, Baris 2 diberi Ag H, Baris 3 diberi PA, Baris 4 diberi PB, Inkubasi ; 37°C, 24 jam 2.2 CARA STOKES : Prinsip hampir sama dengan cara klasik 2. Uji tabung.
  • 50. PERBEDAANNYA a. Serumnya ; waterbath 56°C, ½ jam b. Diluent-nya ; PBS, pH 7,4. c. Inkubasinya ; tbg O → waterbath 37°C, 4 jam H, PA, & PB → waterbath 50°C, 2 jam Pembacaannya : - Segera - Lebih baik setelah semalam pada 4°C
  • 51. ` Gambar 41. Aglutinat di dasar tabung uji Widal yang positif
  • 52. Gambar 42. Endapan antigen pada dasar tabung uji Widal yang positif
  • 53. FAKTOR-FAKTOR YANG PERLU DIPERHATIKAN. 4.1. Dr hasil 1X tes belum dapat ditarik kesimpulan yang berarti. Perlu ulangan setelah 5-7 hari 4.2. Harga normal tes Widal tabung. Aglutinin O : 1/160 Aglutinin H : 1/160 Aglutinin PA : 1/80 Aglutinin PB : 1/320 4.3. Vaksinasi; aglutinin H dapat dipertahankan beberapa tahun, 4.4. Antibiotika ; dapat memperlambat kenaikan titer
  • 54. 4.5. Febris ; dapat memberikan kenaikan titer 4.6. Narkotik ; Ketagihan → hasil pos. semu 4.7. Stadium penyakit ; mgg ke 1 → neg./dlm batas normal mgg ke 2 titer mulai naik → puncaknya mgg ke 5 - 6; 4.8. Obatnya-2 imunosupresif; hambat pembentukan aglutinasi 4.9. Peny.-2 tertentu ; agamaglobulinemia & keganasan. 4.10. Infeksi campuran ; mis TB milliair → sering neg. semu.
  • 55. IgM SalmonellaIgM Salmonella - pemeriksaan antibodi terhadap antigen O9,pemeriksaan antibodi terhadap antigen O9, lebih spesifik dari Widallebih spesifik dari Widal - semi kuantitatif,semi kuantitatif, Ada beberapa metode:Ada beberapa metode: 1.Inhibitions Magnetic Binding Immunoassay (IMBI) 2.2.Rapid test (Immunochromatography / lateralRapid test (Immunochromatography / lateral flow)flow)
  • 56. Hasil: dalam skala warna tc 1. Penetesan Brown Reagen 45 µl ke dalam V-shape wells. 2. Penambahan spesimen & kontrol 45 µl ke dalam V-shape dan dilarutkan. 3. Penetesan Blue Reagen 90 µl. 4. Inkubasi dan homogenasi 2 menit pada suhu kamar. 5. Pemisahan magnetik 5 menit dan pembacaan hasil. 58
  • 57. Interpretasi hasil 1 2 3 Kontrol Neg Kontrol Pos Serum Sampel Pos 5 min Pemisahan Magnetik 0 48 Interpretasi hasil 0 2 4 6 8 10 Skor 0-2: negatif, 3-10: positif 59
  • 58. - percobaan: antigen (simulasi bahan terlarut pada bufer, serum, & urine; bakteri utuh pada media kultur) antigen mengikat partikel indikator dan menghambat ikatan partikel indikator dengan partikel magnet Gambar 1a. Ilustrasi ikatan inhibisi antigen–antibodi pada pemeriksaan antibodi dan antigen 60
  • 59. UJI SEROLOGIKUJI SEROLOGIK UNTUK SYPHILIS ( STS )UNTUK SYPHILIS ( STS ) Bagian Patologi KlinikBagian Patologi Klinik FK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, SurabayaFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya
  • 60. STS MEMEGANG PERANAN PENTING DALAM Dx LAB. DR LUES SEBAB : - Perjalanan penyakit lama - Belum berhasil membenihkan T. pallida pada media pembenihan. - Pemeriksaan mikroskop memberi bbp. kesukaran a.l. ; * bahan harus diambil dari lesi yang manifes dalam waktu singkat, * sering memberi hasil negatif semu.
  • 61. INFEKSI DG T.pallida AKAN MENIMBULKAN 2 JENIS Ab. 1. Ab Non-treponemal/reagin ; baru terbentuk setelah infeksi → kel. Limfe regional ( kerusakan jaringan ). 2. Ab Treponemal ; bereaksi dg T.pallida /closely related strains. Dapat dibedakan 2 jenis Ab. a. Group Treponemal Ab ; thd Ag somatik dr semua treponema b. Specific Treponemal Ab ; thd Ag spesifik dr T.pallidum.
  • 62. IgG Treponemal Ab Reagin IgM Treponemal Ab Gambar 29. Kadar beberapa Ab selama perjalanan Syphilis
  • 63. 2560 640 160 40 10 Rx Ig. G-FTA-AbsTPHA Ig. M -FTA-Abs. RPR /VDRL Waktu Kontak Titer Gambar 30. Pengaruh Rx pada titer Ab thd Syphilis
  • 64. Gambar 31. Ulcus durum Lues I
  • 65. Gambar 32. Syphilis Stadium II ( Condylomata Lata )
  • 66. BEBERAPA STS YANG DAPAT DIKERJAKAN DI INDONESIA 1. Tes VDRL 2. Tes Treponema pallidum Immobilization ( TPI ) 3. Tes Treponema pallidum Hemagglutination ( TPHA ). 4. Tes Fluorescence Treponemal Antibody Absorption ( FTA-ABS ) 5. Enzyme – linked Immunosorbant Assay ( ELISA )
  • 67. UJI V.D.R.L. Prinsip dasar : Uji presiptasi Ag. : Lipoid Ag (Cardiolipin-lecithin-cholesterol) Serum : Waterbath 56°C, 30 men. → Inaktivasi C Dikenal 2 macam teknik. 1. Uji Tabung ; dibaca secara Makroskopis. 2. Uji Slide ; dibaca secara Mikroskopis.
  • 68. PEMBACAAN HASIL UJI V.D.R.L A. Kualitatif : di bawah mikroskop ( pemb. 100 X ) a. Gumpalan besar/sedang → Positif b. Gumpalan kecil → Positif lemah c. Tiada gumpalan/sedikit kasar → Negatif B. Semi-kuantitatif : Pd serum yg pos./pos. lemah pengenceran secara serial → Titer Titer 1:4 ;Di Indonesia dianggap syphilis
  • 69. Pembagian Uji VDRL atas Dasar Cara Pengambilan Sampel. 1. Uji VDRL Mikro - 5 tetes drh ujung jari tengah +0,15 ml PZ - Hasil dinyatakan secara kualitatif (+/-) - Bila pos.,sesuai dengan titer ≥ 1 : 2 - Dipakai untuk survei lapangan/uji saring 2. Uji VDRL Makro - 5 cc drh dr V. Cubiti. Hasil dinyatakan secara kualitatif maupun semi-kuantitatif ( titer )
  • 70. TPHA. Prinsip Dasar. - Hemaglutinasi Pasif - Sebagai Ag ; T. pallida strain Nichol - Sebagai carrier ; SDM Kalkun. Sensitivitas : Baik kecuali L I. Spesifisitas : Cukup baik Penting : Tak dapat dipakai untuk mengikuti hasil Rx.
  • 72. POSITIF SEMU BIOLOGIK ( BFP ) Serologis pos. tanpa syphilis, dapat terjadi : 1. akut disebabkan penyakit-2 akut / stres ( imunisasi ) Seperti mononucleosis infeksiosa & demam tifoid, 2. menahun ( kronis ) disebabkan penyakit-2 menahun seperti frambusia, lepra, penyakit kolagen ( LE ), malaria, kehamilan dan narkotika. Titernya umumnya rendah kecuali pada mononukleosis infeksiosa
  • 73. VDRL MAKRO KUANTITATIF mempunyai Arti klinis yang penting sebab : Merupakan garis Dasar untuk Evaluasi hasil uji laboratorium selanjutnya. INTERPRETASI HASIL
  • 74. Bila pada uji ulangan didapatkan : 1. Titer↑ , menunjukan adanya ; a. infeksi dengan T. pallida c. relapse pd penderita-2 yg Serofast b. re-infeksi 2. Titer ↓ → Rx adekuat pd pend Lues dini 3. Titer tetap → reagin masih ada dalam drh stlh Rx
  • 75. BILA STS TREPONEMAL POSITIF. 1. Sedang menderita lues ( peny. Aktif ) atau 2. Pernah menderita lues ttp telah sembuh. Tak dapat untuk mengikuti hasil Rx. Keunggulan Ig. M-FTA-Abs & Ig. M-ELISA. 1. Sebagai parameter biolgis apakah Rx masih diperlukan 2. Untuk Dx Lues kongenital pada bayi yang baru lahir Bila tes neg., tak menyingkirkan Dx Lues kongenita.
  • 76. KESIMPULAN. Paling Ideal ; Ig. M- ELISA ( Dx, keaktivan, mengikuti hasil Rx ) Di Indonesia ; TPHA → Dx VDRL → Aktivitas & mengikuti hasil Rx Neurosyphilis : VDRL → Dx Jumlah sel Protein Total Keaktivan & mengikuti hasil Rx
  • 77. ©2012 MFMER | slide-80 Traditional Algorithm Non-treponemal test (e.g., RPR) Treponemal test (e.g., FTA) Advantages: • Results show good correlation with disease status • Rapid, inexpensive screening method • Excellent option for laboratory with small throughput • Recommended by the CDC Negative for syphilis Non-reactive Non-reactive Syphilis Negative for syphilis Reactive Reactive 24
  • 78. ©2012 MFMER | slide-81 • Incidence of disease impacts the positive predictive value of the assay http://www.cdc.gov/std/stats09/figures/33.htm Rate per 100,000 population ≤0.2 0.21-2.2 >2.2 Cases(inthousands) Year Primary and secondary Early latent Total syphilis The Traditional Syphilis Algorithm: If it works, why change it? 26
  • 79. ©2012 MFMER | slide-82 Reverse Algorithm Treponemal test (eg, EIA) Non-Treponemal test (eg, RPR) Negative for syphilis Non-reactive Non-reactive Syphilis Second Treponemal Test (e.g., TP-PA) Reactive Reactive Non-reactiveReactive Evaluation Required* Negative for syphilis 27
  • 80. ©2012 MFMER | slide-83 • Automated treponemal screening assays are available (i.e., EIA, MFI)2 • > 500 sera/9 hr shift by MFI vs. ~ 200 sera/9 hr shift by manual methods • Objective interpretation of results • Results from EIA or MFI can be interfaced with LIS • Specific screening test for anti-T. pallidum antibodies • Potentially increased detection of patients with early syphilis3 : • Among 560 patients with lesions, 18 (3.2%) were EIA (+), DFA (+) and RPR (-) • Among 9,137 patients with EIA (+), RPR (-) results, 54 became RPR (+) on follow-up testing Reverse Algorithm: Advantages 28
  • 81. ©2012 MFMER | slide-84 • Higher cost/sample • Higher assay complexity • Increased detection of patients with screen (+), RPR (-) results4,5 : • CDC - ~56% of EIA reactive samples are non-reactive by RPR • How do we interpret these results? Reverse Algorithm: Limitations 29
  • 82. ©2012 MFMER | slide-85 Case #1 • 37-year-old with HIV • Presents to primary care physician with a 2-week history of fatigue, intermittent fever and new rash on palms and soles • Previously resolved genital lesion • Syphilis serology ordered • Syphilis IgG by EIA: positive • RPR: positive, titer of 1:64 Reverse Syphilis Screening Algorithm: Result Interpretation 30
  • 83. ©2012 MFMER | slide-86 Case #1 Conclusion • No further testing needed on this sample • Interpretation: “Untreated or recently treated syphilis.” Follow CDC treatment guidelines4 • For treatment follow-up: • Samples can be tested directly by RPR. • A 4-fold decrease in RPR titers (eg, 1:64 to 1:16) is interpreted as response to therapy Reverse Syphilis Screening Algorithm: Result Interpretation 31
  • 84. ©2012 MFMER | slide-87 Case #2 • 23-year-old female • Evaluated during first-trimester, routine pregnancy visit • Previously healthy • Syphilis serology ordered • Syphilis IgG by EIA: positive • RPR: negative • Second treponemal test, TP-PA: negative Reverse Syphilis Screening Algorithm: Result Interpretation 32
  • 85. ©2012 MFMER | slide-88 Case #2 Conclusion • Interpretation: “Probable false-positive screening test. Negative for syphilis.” • False-positive serologic tests are not uncommon during pregnancy and confirmatory testing is often required • Syphilis IgM testing not recommended for routine pregnancy screening Reverse Syphilis Screening Algorithm: Result Interpretation 33
  • 86. ©2012 MFMER | slide-89 Case #3 • 50-year-old immigrant from Somalia • Pre-kidney transplant evaluation • Syphilis serology ordered • Syphilis IgG by EIA: positive • RPR: negative • TP-PA: positive Reverse Syphilis Screening Algorithm: Result Interpretation 34
  • 87. ©2012 MFMER | slide-90 Case #3 Conclusion • Interpretation: “Historical and clinical evaluation required.” • During evaluation with provider, patient indicates no known history of treatment for syphilis. • Patient treated for possible latent syphilis Reverse Syphilis Screening Algorithm: Result Interpretation 35
  • 88. Terima Kasih atas Perhatian Anda