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Lipidos

  1. 1. UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE INGENIERIA E.A.P AGROINDUSTRIAL RECONOCIMIENTO DELÍPIDOS, PROTEÍNAS.CURSO:* Biología generalDOCENTE:* Biólogo Mg.Juan Carhuapoma GarayCICLO:*IGRUPO:* “A”INTEGRANTES:* Vega Viera Jhonas Abner NUEVO CHIMBOTE – PERU 2012
  2. 2. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS I. RESUMENFUNCIONES DE LOS LIPIDOS: Reserva de energía Aislantes térmicos Protección EstructurarlosLípidos más abundantes son los que posen ácidos grasos, es decir, los lípidosSaponificables. De ellos los Triglicéridos (Grasas y aceites) son los más característicos. Enlos triglicéridos una molécula de glicerina se encuentra esterificada por tres moléculas deácidos grasos. La reacción de formación será la siguiente:GLICERINA + 3 CIDOS GRASOS ÉSTER + AGUA (Alcohol) (Triglicérido)La característica común a todos los lípidos es que son insolubles en agua y solubles endisolventes orgánicos como la gasolina, benceno, xilol, cloroformo...Cuando se mezcla agua yaceite y se agita la mezcla se forma unaEmulsión transitoria. Esto significa que si se deja la “mezcla” reposar unos instantes, las gotas de aceite, demenor densidad, suben y se unen entre sí, formándose dos capas, la superior de aceite y lainferior de agua comprobándose su insolubilidad enagua. En cuanto a su tinción, los lípidosse colorean selectivamente de rojo -anaranjado con el colorante Sudán III.Introducción  En el campo de la Ingeniería Agroindustrial, el saber cómo reconocer cualitativamente los lípidos es de importancia; ya que el reconocerlos es básico para desarrollar análisis en grasas y aceites. En este informe de laboratorio
  3. 3. está contenido todo lo referente a este tema; marco teórico, descripción de La práctica, conclusionesObjetivos  Reconocer las propiedades de los lípidos.  Conocer y desarrollar las principales reacciones de algunos lípidos dando a conocer sus propiedades mas importantes como la solubilidad de los ácidos grasos con diferentes sustancias por medio de la preparación de distintas soluciones en tubos de ensayos y una agitación fuerte, observando cada una de las mezclas entre aceite de maíz y agua destilada, HCl, Éter y etanol, respectivamente.  Poner en práctica lo aprendido II. MATERIALES Y MÉTODOS:*Proporcionados por el laboratorio: Baño maria 21 tubos de ensayo 3 mecheros 3 gradillas 3 vasos precipitado con agua 12ml Hidróxido de sodio al 40% 15ml de alcohol 10ml de cloroforma, éter o benceno 15 gotas de solución de sudan III en frasco cuentagotas 12ml solución de Hidróxido sódico al 20%*Proporcionados por el alumno: 10ml de aceite vegetal 3bilis de pollo fresco*METODOLOGÍA Se utilizará La experimentación directa, acompañada de La observación y La deducción. III. RESULTADOS “LÍPIDOS”.
  4. 4.  saponificación: Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en glicerina y ácidos grasos. Éstos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones. Bueno es una reacción química entre un ácido graso (o un lípido saponificable, portador de residuos de ácidos grasos) y una base o alcalino, en la que se obtiene como principal producto la sal de dicho ácido. Estos compuestos tienen la particularidad de ser anfipáticos, es decir tienen una parte polar y otra apolar (o no polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por ejemplo, los jabones son sales de ácidos grasos y metales alcalinos que se obtienen mediante este proceso.El método de saponificación en el aspecto industrial consiste en hervir la grasa en grandes calderas, añadiendo lentamente sosa cáustica (NaOH), agitándose continuamente la mezcla hasta que comienza esta a ponerse pastosa. La reacción que tiene lugar es la saponificación y los productos son el jabón y la glicerina:CH3-(CH2)n–COO–CH2+NaOH CH3-(CH2)n-COO Na CH2OHCH3-(CH2)n -COO – CH+ NaOH CH3-(CH2)n- COO Na + CHOHCH3-(CH2)n –COO–CH2+NaOH CH3-(CH2)n-COO Na CH2OHI molécula de 3 moléculas de 3 moléculas de 1mólecula deGRASA ALCALI JABON GLICERINA
  5. 5. Primero colocamos en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%* La mezcla quedaría asi: *como prepara NaOH al 20% Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos. La mezcla quedaría así: Ahora se pueden observar 3 fases: la inferior que contiene la solución de sosa sobrante con la glicerina formada la intermedia semisólida que es el jabón formado y una superir lipídica de aceite inalterado. ACEITE NO SOBRÓ JABÓN SOSA CON GLICERINAPor último se extrae el jabón del tubo de ensayo y se da la forma que se quiera al jabón, seremueve bien y se deja calentar hasta que se haga un buen trozo de jabón.  Insolubilidad: Los lípidos en agua se ubican poniendo contacto con el agua sus grupos hidrófilos y alejando de ella sus cadenas lipofilos. Los grupos lipofilos predominan sobre los grupos hidrófilos.
  6. 6. En dos tubos de ensayo tomar 1 ml de aceite y luego añadir 5 ml de agua destilada. Agregar a un tubo 2 ml de bilis. Agitar fuertemente y dejar reposar un minuto. Agregar al otro tubo 2 ml de NaOH al 20 %. Agitar fuertemente y dejar reposar un minuto. Observamos la formación de una solución estable (emulsión). TINCIÓN: Los lípidos se colorean de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III. Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2 ml de aceite. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III, agitar y dejar reposar. Añadir al otro tubo 4-5 gotas de tinta roja, agitar y dejar reposar.Observamos que en el tubo al que se le añadió sudan, que todo el aceite aparece teñido. En cambioal tubo que se le añadió la tinta roja, la tinta se fue al fondo y el aceite aparece sin teñir.
  7. 7. RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNASIV. Fundamento. Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.
  8. 8. V. Introducción. En este presente trabajo desarrollamos el tema de Reconocimiento de proteínas y para esto hemos realizado un trabajo de investigación mediante el cual estamos exponiendo las diferentes formas de reconocer la presencia de las proteínas en una sustancia (clara de huevo), las reacciones a utilizar, etc. Este informe en completo también contiene la experiencia en el laboratorio, imágenes de ella y algunos resultados que se pedía en la realización de informe y que se requería saber en cada experimentación.VI. objetivos: * Reconocer los aminoácidos y las proteínas utilizando los reactivos de ninhidrina y de Biuret, respectivamente. * Realizar con la solución de albumina los ensayos de: * Prueba de coagulación utilizando varios agentes. * Prueba de precipitación con cationes. * Determinar el punto isoeléctrico de la caseína. * Identificar la ´presencia de núcleos aromáticos en las proteínas (reacción xanoproteica). * Identificar la presencia de triptófano, tirosina y aminoácido azufrados en las proteínas. * Llevar a cabo algunas reacciones que permiten a través de una coloración especifica el reconocimiento de algunos aminoácidos. * Reconocer mediante reacciones de precipitación la desnaturalización de proteínas.VII. MATERIALES Y MÉTODOS
  9. 9. Reactivos. Ácido nítrico concentrado Hidróxido de sodio al 40 % Hidróxido de sodio al 20% Sulfato cúprico al 1% Acetato de plomo al 5% Materiales. Tubo de ensayo Gradilla Varillas de vidrio Mechero Vaso precipitado Vagueta Pipeta.  Resultados “proteínas”. i. Coagulación de Proteínas.Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua solucionescoloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas atemperaturas superiores a los 70:C o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol,etc.La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a sudesnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenanpor la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria ii. Reacción Xantoproteica:Es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo,cuando las proteínas son tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba daresultado positivo en aquellas proteinas con aminoácidos portadores de gruposbencénicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la pruebase neutraliza con un álcali vira a un color anaranjado oscuro.
  10. 10. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solución problema (clara de huevo ). Añadir 1 cc. de HNO3 concentrado Calentar al baño maría a 100: C Enfriar en agua fría, Añadir gota a gota una disolución de sosa al 40%.Observamos que se forma algo lechoso blanco, cuando lo sometemos a baño maría se transformaen algo amarillento y por ultimo al agregar amoniaco se transforma en un color anaranjado. iii. Reacción de Biuret. La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (- CO- NH -)que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada biuret, de fórmula.Que en contacto con una solución de sulfato cúprico diluída, da una coloración violeta característica. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albúmina de huevo. Añadir 2cc. de solución de hidróxido sódico al 20%. A continuación 4 ó 5 gotas de solución de sulfato cúprico diluida al 1%.aparece una coloración violeta-rosácea característica y se puede afirmar que la reacción es positiva.
  11. 11. iv. reacción de los aminoácidos azufrado (cistina). Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albúmina de huevo (clara de huevo). Añadir 2 cc. de solución de hidróxido sódico al 20% Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%. Calentar el tubo hasta ebullición.Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo,utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo que nos sirve para identificar proteínas que tienen ensu composición aminoácidos con azufre. I. II. Discusión:  Tincion: Gianni (1952) comprobó que los microorganismos grampositivos Bacillus subtilis y B. anthracis tomaban negativamente el Gram cuando los cultivos databan de dos a tres horas. Luego se desarrollaba la sustancia grampositiva debajo de la pared celular, para invertir la reacción. Otra explicación de la reacción de Gram puede ser la posible existencia de una capa exterior alrededor de un núcleo gramnegativo. Libenson y Mcllroy, han comunicado que si la reacción grampositiva depende de que se forme una combinación compleja entre los componentes de la coloración de Gram y las proteínas de la pared celular, sería de esperar que las bacterias desintegradas por medios físicos retuviesen este tinte, ya que ese tratamiento no podría cambiar el carácter químico de los materiales de dicha pared. Por el contrario, los gérmenes grampositivos desintegrados pierden su capacidad de retener el colorante primario y toman negativamente el Gram.
  12. 12. III. CUESTIONARIO: 1. ¿Qué son los jabones?El jabón es la sal (generalmente de sodio) de varios ácidos grasos provenientes delsebo ygrasas animales incluyendo aceite de coco, palma, semilla de algodón y otrosen laformulación para darle alguna propiedad extra en función del tipo de aceite. El jabón essoluble en agua y la solución tiene excelentes propiedades limpiadoras. 2. ¿Cómo se pueden obtener jabones?En la actualidad hay dos métodos de obtención del jabón, ambos basados en lasaponificación.-Primer método: En el primer método se produce la saponificacióndirectamente sobre la grasa, se hace reaccionar el álcali con la grasa, y se obtiene el jabóny glicerina. Este método tiene como desventaja que es más difícil la separación de laglicerina y el jabón.-Segundo método: En este método primero se produce la rupturaquímica de la grasa, y se obtiene la glicerina y los ácidos grasos; éstos se separanfácilmente. Luego se produce la salde ácido graso y el álcali. 3. ¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?Porque la glicerina no es liposoluble. Tiene que ver con su solubilidad Recuerda que es unproducto secundario, lo importante es el jabón. 4. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de agua?Es la lipasa, es una enzima ubicua que se usa en el organismo para disgregar las grasas delos alimentos de manera que se puedan absorber. Su función principal es catalizar lahidrólisis de triacilglicerol a glicerol. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seresvivos. 5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite – Sudan III y aceite – Tinta y explica a que se debe la diferencia entre ambos resultados. El sudan III - aceite presenta una coloración rojo vinoEste resultado se debe a que el aceite y las grasas son un grupo de compuestos orgánicosexistentes en la naturaleza que consiste en esteres formados por tres moléculas de ácidosgrasos y una molécula del alcohol glicerina. De tal manera que el Sudan III, lo reconoce y lotiñe. Tinta china – aceite presenta una coloración rojo sangre:
  13. 13. Las diferencias entre ambos es que en el sudan III con el aceite todo el aceite apareceteñido y en la tinta china aceite este se fue poco a poco destiñendo suavemente pero no deltodo6. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurrido unos minutos de reposo? ¿Ycon la de los otros compuestos empleados y aceite? ¿A que sedeen las diferenciasobservadas entre ambas emulsiones?Luego de unos minutos de reposo notamos que el aceite sube y agua se encuentran abajo. Elagua es más densa que el aceite.En el caso del aceite y la acetona, no se disolvió del todo porque la acetona es impura,entonces utilizamos glicerina en la cual se disolvió. A que deben a la diferencia dedensidades entre los componentes. IV. CONCLUSIÓN:  En el experimento de solubilidad de los lípidos, se podrá observar que el aceite se ha disuelto en el éter y no en el agua ya que este subirá debido a su menor densidad al separarse el almidón.  Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua.  Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetona, benceno, etc. V. BIBLIOGRAFÍA: a) http://es.wikipedia.org/wiki/Lipasa b) http://html.rincondelvago.com/lipidos_10.html c) http://bienvenidovasquez.blogspot.com/2008/04/reconocimiento-delÍpidos d) http://www.uniquindio.edu.com. e) http://web.mac.com/pedropablomoreno/BioGeo/BIO2- racticas_files/VI%20Reconocimiento%20proteinas.pdf

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