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Tema%2030

  1. 1. Tema 30. Características generales de los virus 1. Concepto y características generales de los virus. 2. Tamaño y morfología 3. Estructura y composición química 3 E t t i ió í i • Cápside o Protómeros y tipos de capsides p p o Cápsides icosaédricas o Cápsides helicoidales • Acidos nucléicos: genomios virales • Envueltas o cubiertas externas o Características. Composición química o Funciones • Otros componentes (Enzimas) 4. Clasificación. Criterios. Nomenclatura 5. Técnicas de estudio y multiplicación de los virus 1
  2. 2. Tema 30. Características generales de los virus Objetivos del tema: •Conocer l C las propiedades bi ló i i d d biológicas dif diferenciales i l de los virus •Conocer l C las dif diferencias más i i á importantes entre t t t virus y organismos celulares •Conocer l estructura y composición química d C la t t i ió í i de cada uno de los componentes de los virus •Conocer l particularidad d l nomenclatura d C la ti l id d de la l t de los virus •Conocer l métodos d estudio peculiares d l C los ét d de t di li de la virología 2
  3. 3. Tema 30. Características generales de los virus CONCEPTO: Los virus son entidades cuyo genomio son ácidos nucleicos, que se replican en el interior de las células vivas usando su maquinaria celular y dando lugar a la síntesis de partículas o elementos especializados que pueden t d transferir su genomio a otras células f i i t él l (Luria 1978 basado en la de Lwoff de 1957) •Parasitismo intracelular Parasitismo •Fase extracelular infectiva: virión 3
  4. 4. Tema 30. Características generales de los virus1. Características generales de los virus (partícula viral oVIRIÓN): • Parásitos intracelulares estrictos • At i Atraviesan los filtros b t i ló i l filt bacteriológicos • Contienen un solo tipo de AN (DNA ó RNA) • No cultivables en ausencia de células hospedadoras • Poseen una cubierta proteica formada por unidades proteicas • Muchos poseen una membrana lipídica a través de la cual se insertan proteínas virales. • Presentan un ciclo con una fase extracelular y otra intracelular • Rango de hospedadores: hombre, animales, plantas, bacterias 4
  5. 5. Tema 30. Características generales de los virus2. Tamaño Entre 10 y 300 o 400 nm 5
  6. 6. Tema 30. Características generales de los virus2. Morfología general de los virus g g Hay 4 tipos morfológicos básicos 6
  7. 7. Tema 30. Características generales de los virus Morfologías virales Poxvirus Adenovirus Paramixovirus Herpesvirus Fago Picornavirus Rabdovirus Retrovirus 7
  8. 8. Tema 30. Características generales de los virus Virus complejos Vi l j • D estructura diferente a los helicoidales y l De t t dif t l h li id l los icosaédricos • P Poxvirus i – Con diversas capas lipoproteínas – Con hileras de fibrillas superficiales • Bacteriófagos – Con cabeza poliédrica – Cola helicoidal – Con fibrillas de adherencia 8
  9. 9. Tema 30. Características generales de los virus Estructuras de los virus complejos Virus de la viruela y bacteriofagos 9
  10. 10. Tema 30. Características generales de los virus 3. Estructura y composición química de los virus Hay dos principales estructuras virales virus desnudos y virus envueltos • Una partícula viral o virión es: ácido nucleico + capsida proteica • Pueden ser envueltos (con membrana : glucoproteinas) o desnudos sin envoltura • ! Los virus envueltos son generalmente mas frágiles ! 10
  11. 11. Tema 30. Características generales de los virus • La capsida viral Un virión: Cápsida proteica y ácido nucleico Las cápsidas formadas por   subunidades proteicas o protómeros Las cápsidas formadas por subunidades proteicas o protómeros ‐se asocian de forma espontánea para formar la cápside (autoensamblaje) ‐algunos virus más complejos codifican proteínas que ayudan en su algunos virus más complejos codifican proteínas  que ayudan en su  ensamblaje Nucleocapsida (Una nucleocapsida sin genoma es una cápsida) (Una nucleocapsida sin genoma es una cápsida) 11
  12. 12. Tema 30. Características generales de los virus Tipos de cápsida viral: Simetría • Icosaédrica • Helicoidal 12
  13. 13. Tema 30. Características generales de los virus Capsidas helicoidales Forma muy similar a un tubo Ácido nucleico asociado a protómeros Tamaño condicionado por protómeros y ácido nucleico 13
  14. 14. Tema 30. Características generales de los virus Variaciones de nucleocápsides helicoidales Virus helicoidales de plantas desnudos y de animales envueltos 14
  15. 15. Tema 30. Características generales de los virus Virus con simetría helicoidal envuelto Virus con simetría helicoidal envuelto 15
  16. 16. Tema 30. Características generales de los virus Capsidas icosaédricas El icosaedro es una de las formas preferidas de la naturaleza 16
  17. 17. Tema 30. Características generales de los virus Pentámeros (5 protómeros): vértices Capsómeros Hexámeros (6 protómeros):aristas y caras 17
  18. 18. Tema 30. Características generales de los virus Dos tipos de virus icosaédricos D ti d i i éd i Icosaedricos desnudos y envueltos 18
  19. 19. Tema 30. Características generales de los virus •Ácidos nucleicos: genomios virales Ácidos Tipo de ácido Estructura del ácido nucleico Ejemplos nucleico ADN Cadena sencilla •Cadena lineal Parvovirus •Cadena circular Fagos: M13, fd Cadena doble •Cadena doble lineal Cadena Herpesvirus •Cadena doble lineal con roturas de cadena sencilla Colifago T5 •Cadena doble con extremos unidos Virus de la viruela •Cadena doble circular Cadena Poliomavirus, Poliomavirus Papilomavirus ARN Cadena sencilla •Cadena lineal polaridad + Cadena Picornavirus •Cadena lineal polaridad – Rhabdovirus •Cadena lineal segmentada polaridad + Bromovirus: virus del mosaico bromus •Cadena lineal segmentada diploide Cadena polaridad + Retrovirus •Cadena lineal segmentada polaridad – Paramixovirus Cadena doble •Cadena doble lineal segmentada g Reovirus 19
  20. 20. Tema 30. Características generales de los virus •Envueltas o cubiertas externas nucleocapsida• Lípidos y proteínas envuelta• Se adquiere durante la salida de las células parte de la membrana del hospedador• Proporciona formas pleomórficas a los virus – Esféricas – Filamentosas• Proteínas matriz: proteína M• Glicoproteínas: Espículas: ej. Neuraminidasa y hemaglutinina en influenzavirus 20
  21. 21. Tema 30. Características generales de los virus Función de la cápsida y envuelta F ió d l á id lt • Protege al ácido nucleico de las enzimas y ácidos del hospedador p • Ayuda a la unión y penetración del virus en la célula hospedadora • Estimula el sistema inmune del hospedador 21
  22. 22. Tema 30. Características generales de los virus Otros componentes: enzimas Enzimas: -en el interior de la nucleocapside p -RNA polimerasas -Transcriptasas inversas Transcriptasas -Proteasas 22
  23. 23. Tema 30. Características generales de los virus4. Clasificación, Criterios y nomenclatura , • Hospedador • Tipo de ácido nucleico p • Simetría de la cápsida Tipo de ácido nucleico Estructura del virión Simetría: helicoidal, icosaédrica o • ADN o ARN compleja • Cadena sencilla o doble Envuelto o desnudo • Cadena segmentada o no número de capsómeros segmentada • Cadena lineal o circular • Polaridad del ARN • Genoma diploide 23
  24. 24. Tema 30. Características generales de los virus FAMILIAS Y GÉNEROS DE VIRUS DE VERTEBRADOS De animales:  De animales: De animales peste porcina  africana De animales Relacionados con los virus productores de hepatitis no en familia De animales De animales De animales 24
  25. 25. Tema 30. Características generales de los virus Nomenclatura N l t • Orden ( - virales): Mononegavirales • Familia ( - viridae): Paramyxoviridae • Sub-familia ( -virinae): Paramyxovirinae • Genero ( - virus): Morbillivirus • Especie: Virus del sarampión International Committee on Taxonomy of Viruses 25
  26. 26. Tema 30. Características generales de los virus Virus humanos ADNGenoma Cápsida Envuelta Familia Subfamilia Genero Especie Parvoviridae Parvovirinae Erytrovirus ParvovirusADNmc Icosaédrica Desnudo humano B19 Adenoviridae Mastadenovirus AdenovirusADN bc Icosaédrica Desnudo humano 1-51ADN bc Icosaédrica Polyomaviridae y Poliomavirus Poliomavirus Desnudo Desn do BK y JC Papillomaviridae Alfapapillomavirus P.humano 32 Betapapillomavirus P.Humano 5ADN bc Icosaédrica Desnudo Gammapapillomavirus P.humano 4 Mupapillomavirus P.humano 1 Nupapillomavirus P.humano 41 Poxviridae Chrodopoxvirinae Orthopoxvirus ViruelaADN bc Parapoxvirus Virus Orf Compleja Envuelto Molluscipoxvirus M ll i i Moluscum M l contagiosum Herpesviridae Alfaherpesvirinae Simplexvirus Herpes H. 1,2 Varicellovirus Herpes H. 3ADN bc Icosaédrica Envuelto Betaherpesvirinae Cytomegalovirus Herpes H 5 H. Roseolovirus Herpes H. 6, 7 Gammaherpesvirinae Lynphocryptovirus Herpes H. 4 Envuelto Hepadnaviridae Orthohepadnavirus V.Hepatitis BADN bc Icosaedrica con RT 26
  27. 27. Tema 30. Características generales de los virus Virus humanos ARN Virus humanos ARN Genomio Capsida Envuelta Familia Genero Especie Reoviridae Orthoreovirus Reovirus 3 Rotavirus Diarreas niños ARNbc Icosaédrica Desnudos Birnaviridae Aquabirnavirus V. Necrosis pancreatica Picornaviridae Enterovirus V. Polio Rhinovirus V. Resfriado A Hepatovirus V. Hepatitis A Cardiovirus V. Encefalomiocarditis Aphthovirus V. V Fiebre aftosa Icosaédrica Parechovirus HPeV-1, -2, y -3 ARN mc (+) Desnudos Caliciviridae Norovirus V. Norwalk Hepevirus Astroviridae Mamastrovirus Astrovirus humano Helicoidal Coronaviridae Coronavirus V. Bronquitis infecciosa (SARS) Flaviviridae Flavivirus V. Fiebre anarilla Envueltos ARN mc (+) Hepacivirus V. Hetatitis C Icosaédrica Togaviridae Rubivirus V. rubeola 27
  28. 28. Virus humanos ARNTema 30. Características generales de los virusGenomio Orden Familia Subfamilia Genero Especie Rhabdoviridae Vesiculovirus Lyssavirus V. de la rabia Filoviridae Marburghvirus V.Lago Victoria Ebolavirus Ebolavirus del Zaire Respirovirus Parainfluenza 1,3 Morbillivirus V.Sarampión Mononegavirales Rubulavirus V. Paperas Paramyxovirinae Paramyxoviridae Henipavirus Hendra , Nipah virus Avubavirus Pneumovirinae Pneumovirus V.Respiratorio sincitialARN mc (-) () Bornaviridae Bornavirus V.Borna (neurológico) Bunyaviridae Orthobunyavirus Hantavirus Arenaviridae Arenavirus Orthomyxoviridae Influenzavirus A V. Gripe A Influenzavirus B V. Gripe B Influenzavirus C V. Gripe C Thogotovirus Detavirus V. Hepatitis DARNmc (+) ( ) Retroviridae Orthoretrovirinae Lentivirus BIV, FIV, HIV-1, HIV-2envueltoCon RT 28
  29. 29. Tema 30. Características generales de los virus 5. TÉCNICAS GENERALES DE OBTENCION Y ESTUDIO DE LOS VIRUS Obtención y purificación de los virus mayor tamaño que las proteínas más estables que los componentes celulares á t bl l t l l CENTRIFUGACIÓN • C. diferencial • C. en gradiente -Solución de sacarosa -Suspensión de virus en la parte superior -Centrifugación centrifugación a distintas velocidades se separan las partículas de tamaño Las partículas sedimentan hasta que diferente llegan a una zona en que la densidad es igual a la suya. 29
  30. 30. Tema 30. Características generales de los virus 5. TÉCNICAS GENERALES DE OBTENCION Y ESTUDIO DE LOS VIRUS Examen directo por microscopia electrónica: forma y tamaño Adenovirus Rotavirus 30
  31. 31. Tema 30. Características generales de los virus 5. TÉCNICAS GENERALES DE OBTENCION Y ESTUDIO DE LOS VIRUS Cultivo y aislamiento de los virus • Cultivos en animales de experimentación • Cultivo C lti o en h e os embrionarios huevos • Cultivos celulares Cultivos en huevos embrionarios El embrión de pollo proporciona un ambiente ideal para la propagación viral. •Pústulas sobre la membrana corioalantoidea EFECTOS •Hemaglutinación •Cuerpos de inclusión 31
  32. 32. Tema 30. Características generales de los virus Tipos de cultivos celulares Ti d lti l l Hay tres tipos de cultivos celulares: 1. Cultivos primarios: ej. Hígado de monos 2. Cultivos celulares semi-continuos: ej. fibroblastos j 3. Líneas celulares continuas: HeLa, Vero, Hep2, CEM Los mejores los cultivos primarios pues proporcionan el cultivo de muchos virus pero son difíciles de obtener y muy caros Las líneas caros. celulares continuas son las más fáciles de obtener y manejar pero no proporcionan el cultivo de muchos virus. 32
  33. 33. Tema 30. Características generales de los virus •Cultivo de tejidos animales Cultivo Efectos observables en los cultivos celulares • Efecto citopático (CPE) • Hemadsorción • Inmunofluorescencia 33
  34. 34. Tema 30. Características generales de los virus Efecto citopático Cytopathic effect of del Enterovirus 71HSV in cell culture: note the ballooning células. Efecto citopático enterovirus 71 and y HSV (virus del herpes simple) en of cells y g (Virology Laboratory, Yale-New Haven Hospital, Linda Stannard, University of Cape Town) de riñón de mono. Observar el incremento del tamaño celular 34
  35. 35. Tema 30. Características generales de los virus Efecto citopático Formación de sincitios del virus respiratorio sincitial y del virus del sarampión. 35
  36. 36. Tema 30. Características generales de los virus Hemadsorcion Hemadsorción del virus del sarampión sobre la superficie de eritrocitos fi i d it it 36
  37. 37. Tema 30. Características generales de los virus 5. TÉCNICAS GENERALES DE OBTENCION Y ESTUDIO DE LOS VIRUS Métodos inmunológicos 37
  38. 38. Tema 30. Características generales de los virus 5. 5 TÉCNICAS GENERALES DE OBTENCION Y ESTUDIO DE LOS VIRUS Métodos inmunológicos Test de fijación del complemento en placa microtiter ELISA para anticuerpos del HIV: Los pocillos coloreados indican reactividad 38
  39. 39. Tema 30. Características generales de los virus 5. TÉCNICAS GENERALES DE OBTENCION Y ESTUDIO DE LOS VIRUS Métodos inmunológicos Western Blot Western Blot para HIV-1 HIV 1 • Linea1: Positive Control • Linea 2: Negative Control • Muestra A: Negativo g • Muestra B: Indeterminada • Muestra C: Positiva 39
  40. 40. Tema 30. Características generales de los virus 5. TÉCNICAS GENERALES DE OBTENCION Y ESTUDIO DE LOS VIRUS Métodos moleculares Técnicas de Hibridación de ácidos nucleicos Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) 40

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