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REVISION BIBLIOGRAFICA SOBRE DIAGNOSTICOS MOLECULARES
                                APLICADOS A LA ENTOMOLOGIA




Callejas M Israel 1

_________________________________________________________________

El diagnóstico molecular pretende la caracterización, con la mayor precisión
posible, del genotipo de un individuo. Dicha caracterización la podemos realizar
mediante dos aproximaciones básicas. En la entomología se han hecho varios
trabajos para aplicar esta técnica e identificar algunas especies de insectos.

El empleo de las técnicas moleculares en la identificación de insectos, estas son:
el análisis de isoenzimas, polimorfismo de longitud de los fragmentos de
restricción (RFLP), reacción en cadena de la polimerasa (PCR), Southern Blotting,
entre otras. Ellas constituyen una herramienta muy útil, con un gran potencial de
uso, que ayudan a esclarecer problemas relacionados con la filogenia e
identificación de determinados grupos de insectos que presentan cierta
complejidad, debido a la existencia de razas, biotipos o complejos de especies.
(Hernandez 1997)

Con una diferenciación molecular, empleando la técnica PCR-RFLP sobre la
región 18S del ADN ribosomal, de 11 especies de tres géneros de la familia
Chrysopidae (Ceraeochrysa, Chrysoperla y Leucochrysa), encontrando que Con
una de las combinaciones y el amplificado digerido con enzimas de restricción
(NS5-NS6+DraI), se logró discriminar todas las especies utilizando sólo los
fragmentos específicos, por lo cual, este ensayo es útil para arrojar un diagnóstico
molecular en la zona de muestreo. Dado lo anterior, se construyó una clave
molecular para la determinación de las especies del estudio. (Cadena et al.)




_______
1 Estudiante del Diplomado en Sanidad vegetal de la Universidad del Magdalena 2011. Revisión hecha para el modulo:
Herramientas para un buen diagnostico entomológico de la Doc. Paula Sepúlveda C
También se está trabajando en la obtención rápida y económica del «barcode» de
los especímenes «viejos» depositados en museos, instituciones que deberán
prever los recursos necesarios (espacios, fondos y personal) para alojar los
«vouchers» de la iniciativa «barcode». La integración de «barcode», trabajo de
campo, colecciones de museos e investigación científica resulta imprescindible
para que el «Código de barras del ADN» contribuya al progreso de la Sistemática
Entomológica de un modo significativo. La propuesta del «Barcode» no pretende,
ni podría sustituir la taxonomía alfa y la filogenia. Su enfoque actual está
principalmente orientado a facilitar la identificación de especies, de manera que los
taxónomos puedan dedicarse a resolver cuestiones científicas que les son propias
como la delimitación y descripción de especies y taxones superiores y el análisis
de las relaciones filogenéticas entre ellos. (Lanteri 2007)

Callejas et al. Usaron             la técnica de amplificación al azar del ADN genómico
mediante la reacción en cadena de la polimerasa (RAPD-PCR) buscando
marcadores específicos en la especie Dacus Bactrocera oleae

Spodoptera frugiperda es un insecto considerado plaga primaria del cultivo de
maíz y secundaria en arroz, algodón, sorgo y pastizales. Presenta dos biotipos
(maíz y arroz) casi idénticos morfológicamente, pero difieren en su composición
genética, resistencia hacia insecticidas y Bacillus thuringiensis. Estos biotipos en
Colombia han sido estudiados por Vélez et al.

También en Colombia Se estandarizó la técnica de ELISA con alta reactividad en
la detección de cada proteína sanguínea de los controles positivos utilizados. En el
70 % de los contenidos intestinales de los triatomidos colectados en el domicilio se
detectaron proteínas sanguíneas de uno o más hospederos domésticos y
silvestres. (Farfan et al. 2007)




_______
1 Estudiante del Diplomado en Sanidad vegetal de la Universidad del Magdalena 2011. Revisión hecha para el modulo:
Herramientas para un buen diagnostico entomológico de la Doc. Paula Sepúlveda C
BIBLIOGRAFÍA

CADENA, PATRICIA, ANGEL, FERNANDO GOMEZ, LUIS A et al. Diferenciación
morfológica y molecular de especies de crisópidos (Neuroptera: Chrysopidae).
Rev. Colomb. Entomol. [En línea]. Junio y diciembre 2007, vol.33, n º 2 [citado el
17     de     abril    2011],       p.171-177.         Disponible        en       la   World    Wide      Web:
<http://www.scielo.unal.edu.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-
04882007000200014&lng=en&nrm=iso>. ISSN 0120-0488.

CALLEJAS C., P. RODA, A. REYES y M. D. OCHANDO. Identificación genética de
Dacus       Bactrocera         oleae Gmelin (Díptera: Tephritidae) mediante marcadores
RAPD-PCR. Bol. San. Veg. Plagas, [En línea]. 24: 873-882. 1998 2 [citado el 17
de                     abril                     2011]                        Disponible                     en:
http://www.mapa.es/ministerio/pags/biblioteca/plagas/BSVP-24-04-Adenda-0873-
0882.pdf

FARFAN, Ana E., GUTIERREZ, Reinaldo and ANGULO, Víctor M. Using ELISA
for identifying Triatominae feeding behaviour in Colombia. Rev. salud pública.
[online]. Oct./Dec. 2007, vol.9, no.4 [cited 17 April 2011], p.602-608. Available from
World                                                  Wide                                               Web:
<http://www.scielo.unal.edu.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0124-
00642007000400013&lng=en&nrm=iso>. ISSN 0124-0064.

HERNANDEZ Y. Aplicación de las técnicas moleculares en la identificación de
insectos. Revista de Protección Vegetal [En línea]. (May-Ago 1997), v. 12(2) p.
79-84.                     Disponible                      en:                     http://agris.fao.org/agris-
search/search/display.do?f=2007/CU/CU0704.xml;CU2003101090

LANTERI, Analía A.. Código de barras del ADN y sus posibles aplicaciones en el
campo de la Entomología. Rev. Soc. Entomol. Argent. [Online]. 2007, vol.66, n.3-4
[citado                     2011-04-17],               pp.           15-25.            Disponible            en:




_______
1 Estudiante del Diplomado en Sanidad vegetal de la Universidad del Magdalena 2011. Revisión hecha para el modulo:
Herramientas para un buen diagnostico entomológico de la Doc. Paula Sepúlveda C
<http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0373-
56802007000200004&lng=es&nrm=iso>. ISSN 1851-7471.

VELEZ-ARANGO, ANA MARÍA, ARANGO I., RAFAEL EDUARDO, VILLANUEVA
M., DIEGO et al Identificación de biotipos de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera:
Noctuidae) mediante marcadores mitocondriales y nucleares. Rev. Colomb.
Entomol. [Online]. Julio / Diciembre. 2008, vol.34, no.2 [citado 2011-04-17]. P.145-
150.Disponible              en:
http://www.scielo.unal.edu.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-
04882008000200002&lng=en&nrm=iso>. ISSN 0120-0488.




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Diagnósticos moleculares insectos

  • 1. REVISION BIBLIOGRAFICA SOBRE DIAGNOSTICOS MOLECULARES APLICADOS A LA ENTOMOLOGIA Callejas M Israel 1 _________________________________________________________________ El diagnóstico molecular pretende la caracterización, con la mayor precisión posible, del genotipo de un individuo. Dicha caracterización la podemos realizar mediante dos aproximaciones básicas. En la entomología se han hecho varios trabajos para aplicar esta técnica e identificar algunas especies de insectos. El empleo de las técnicas moleculares en la identificación de insectos, estas son: el análisis de isoenzimas, polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción (RFLP), reacción en cadena de la polimerasa (PCR), Southern Blotting, entre otras. Ellas constituyen una herramienta muy útil, con un gran potencial de uso, que ayudan a esclarecer problemas relacionados con la filogenia e identificación de determinados grupos de insectos que presentan cierta complejidad, debido a la existencia de razas, biotipos o complejos de especies. (Hernandez 1997) Con una diferenciación molecular, empleando la técnica PCR-RFLP sobre la región 18S del ADN ribosomal, de 11 especies de tres géneros de la familia Chrysopidae (Ceraeochrysa, Chrysoperla y Leucochrysa), encontrando que Con una de las combinaciones y el amplificado digerido con enzimas de restricción (NS5-NS6+DraI), se logró discriminar todas las especies utilizando sólo los fragmentos específicos, por lo cual, este ensayo es útil para arrojar un diagnóstico molecular en la zona de muestreo. Dado lo anterior, se construyó una clave molecular para la determinación de las especies del estudio. (Cadena et al.) _______ 1 Estudiante del Diplomado en Sanidad vegetal de la Universidad del Magdalena 2011. Revisión hecha para el modulo: Herramientas para un buen diagnostico entomológico de la Doc. Paula Sepúlveda C
  • 2. También se está trabajando en la obtención rápida y económica del «barcode» de los especímenes «viejos» depositados en museos, instituciones que deberán prever los recursos necesarios (espacios, fondos y personal) para alojar los «vouchers» de la iniciativa «barcode». La integración de «barcode», trabajo de campo, colecciones de museos e investigación científica resulta imprescindible para que el «Código de barras del ADN» contribuya al progreso de la Sistemática Entomológica de un modo significativo. La propuesta del «Barcode» no pretende, ni podría sustituir la taxonomía alfa y la filogenia. Su enfoque actual está principalmente orientado a facilitar la identificación de especies, de manera que los taxónomos puedan dedicarse a resolver cuestiones científicas que les son propias como la delimitación y descripción de especies y taxones superiores y el análisis de las relaciones filogenéticas entre ellos. (Lanteri 2007) Callejas et al. Usaron la técnica de amplificación al azar del ADN genómico mediante la reacción en cadena de la polimerasa (RAPD-PCR) buscando marcadores específicos en la especie Dacus Bactrocera oleae Spodoptera frugiperda es un insecto considerado plaga primaria del cultivo de maíz y secundaria en arroz, algodón, sorgo y pastizales. Presenta dos biotipos (maíz y arroz) casi idénticos morfológicamente, pero difieren en su composición genética, resistencia hacia insecticidas y Bacillus thuringiensis. Estos biotipos en Colombia han sido estudiados por Vélez et al. También en Colombia Se estandarizó la técnica de ELISA con alta reactividad en la detección de cada proteína sanguínea de los controles positivos utilizados. En el 70 % de los contenidos intestinales de los triatomidos colectados en el domicilio se detectaron proteínas sanguíneas de uno o más hospederos domésticos y silvestres. (Farfan et al. 2007) _______ 1 Estudiante del Diplomado en Sanidad vegetal de la Universidad del Magdalena 2011. Revisión hecha para el modulo: Herramientas para un buen diagnostico entomológico de la Doc. Paula Sepúlveda C
  • 3. BIBLIOGRAFÍA CADENA, PATRICIA, ANGEL, FERNANDO GOMEZ, LUIS A et al. Diferenciación morfológica y molecular de especies de crisópidos (Neuroptera: Chrysopidae). Rev. Colomb. Entomol. [En línea]. Junio y diciembre 2007, vol.33, n º 2 [citado el 17 de abril 2011], p.171-177. Disponible en la World Wide Web: <http://www.scielo.unal.edu.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120- 04882007000200014&lng=en&nrm=iso>. ISSN 0120-0488. CALLEJAS C., P. RODA, A. REYES y M. D. OCHANDO. Identificación genética de Dacus Bactrocera oleae Gmelin (Díptera: Tephritidae) mediante marcadores RAPD-PCR. Bol. San. Veg. Plagas, [En línea]. 24: 873-882. 1998 2 [citado el 17 de abril 2011] Disponible en: http://www.mapa.es/ministerio/pags/biblioteca/plagas/BSVP-24-04-Adenda-0873- 0882.pdf FARFAN, Ana E., GUTIERREZ, Reinaldo and ANGULO, Víctor M. Using ELISA for identifying Triatominae feeding behaviour in Colombia. Rev. salud pública. [online]. Oct./Dec. 2007, vol.9, no.4 [cited 17 April 2011], p.602-608. Available from World Wide Web: <http://www.scielo.unal.edu.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0124- 00642007000400013&lng=en&nrm=iso>. ISSN 0124-0064. HERNANDEZ Y. Aplicación de las técnicas moleculares en la identificación de insectos. Revista de Protección Vegetal [En línea]. (May-Ago 1997), v. 12(2) p. 79-84. Disponible en: http://agris.fao.org/agris- search/search/display.do?f=2007/CU/CU0704.xml;CU2003101090 LANTERI, Analía A.. Código de barras del ADN y sus posibles aplicaciones en el campo de la Entomología. Rev. Soc. Entomol. Argent. [Online]. 2007, vol.66, n.3-4 [citado 2011-04-17], pp. 15-25. Disponible en: _______ 1 Estudiante del Diplomado en Sanidad vegetal de la Universidad del Magdalena 2011. Revisión hecha para el modulo: Herramientas para un buen diagnostico entomológico de la Doc. Paula Sepúlveda C
  • 4. <http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0373- 56802007000200004&lng=es&nrm=iso>. ISSN 1851-7471. VELEZ-ARANGO, ANA MARÍA, ARANGO I., RAFAEL EDUARDO, VILLANUEVA M., DIEGO et al Identificación de biotipos de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) mediante marcadores mitocondriales y nucleares. Rev. Colomb. Entomol. [Online]. Julio / Diciembre. 2008, vol.34, no.2 [citado 2011-04-17]. P.145- 150.Disponible en: http://www.scielo.unal.edu.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120- 04882008000200002&lng=en&nrm=iso>. ISSN 0120-0488. . _______ 1 Estudiante del Diplomado en Sanidad vegetal de la Universidad del Magdalena 2011. Revisión hecha para el modulo: Herramientas para un buen diagnostico entomológico de la Doc. Paula Sepúlveda C