Análisis cualitativo de carbohidratos

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Principales reacciones para caracterizar cualitativamente un carbohidrato

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Análisis cualitativo de carbohidratos

  1. 1. Análisis cualitativo deCarbohidratosHarold Andrés Salamanca Ortíz 20101150054Andrea Catalina Rodríguez Murcia 20101150049
  2. 2. Carbohidratos• Moléculas con CHO (hidratos de carbono.• Son aldehídos o cetonas con múltiples grupos hidroxilo.• Almacenamiento de energía, síntesis de moléculas más complejas.
  3. 3. EnsayoGeneral
  4. 4. Fundamento• Los polisacáridos, disacáridos o trisacáridos se hidrolizan y formanmonosacáridos (calentamiento con ácido mineral concentrado):
  5. 5. Fundamento• Estos monosacáridos se convierten en furfural o 5-hidroxi metil furfural(calentamiento y ácido sulfúrico o fosfórico):
  6. 6. Fundamento• Los furfurales formados son volatilizados con vapor y reaccionan con p-toluidinao anilina para formar bases de Shiff coloreadas:
  7. 7. Procedimiento5-10 mg del compuestoO unas gotas de solucióndel compuesto a sequedadGotas de ácido fosfóricoCubrir con un papel filtro mojado con 2 gotas de reactivo (sln 10%de toluidina en HAc al 10%)
  8. 8. Ensayo deMolish
  9. 9. Fundamento• Identifica monosacáridos (pentosa o hexosa)• Convierte el monosacárido en furfural (o sus derivados), el cual reacciona conalfa naftol formando un compuesto de coloración púrpura – violeta:•
  10. 10. Procedimiento20 mg del compuesto1 mL de agua2 gotas reactivo deMolish Ácido sulfúricoPor lasparedes deltubo
  11. 11. Procedimiento
  12. 12. Consideraciones• Algunos carbohidratos complejos pueden dar ensayosnegativos, especialmente los insolubles en agua. Algunospolialcoholes como las hexitas pueden dar ensayo positivo.
  13. 13. Diferenciación entre azúcaresreductores-no reductores
  14. 14. Ensayo deFehling
  15. 15. Fundamento• Identifica azúcares reductores de no reductores.• Los carbohidratos reductores se oxidan a sales de ácidos aldónicos cuando elCu 2+ del reactivo de fehling se reduce a Cu 1+.
  16. 16. Procedimiento10 mg de compuesto1 mL de sln A1 mL de sln BDebido a la formación deóxido de cobre
  17. 17. Ensayo deBenedict
  18. 18. Fundamento• Tiene el mismo fundamento del ensayo de Fehling:
  19. 19. Procedimiento10 mg de compuesto2 mL de reactivobenedictDebido a la formación deóxido de cobreCalentamiento a baño Maríadurante 3 minutos
  20. 20. Diferenciación entre monosacárido-disacárido
  21. 21. Ensayo deBarfoed
  22. 22. Fundamento• Los monosacáridos se oxidan más fácilmente que los disacáridos.• El acetato de cobre cristalizado oxida al monosacárido reduciendo al Cu 2+ aCu 1+. El precipitado se forma en 2 minutos. En disacáridos se forma en mástiempo:
  23. 23. ProcedimientoEn 2 minutos10 mg del compuesto2 mL del reactivo
  24. 24. Diferenciación entre monosacáridos
  25. 25. Ensayo deSeliwanoff
  26. 26. Fundamento• Identificación de cetohexosas, diferenciándolas de las aldohexosas.
  27. 27. El calentamiento a más de 15minutos produce la isomerizaciónde la D-Glucosa (aldosa) en D-Fructosa (cetosa), por lo que laglucosa da prueba positivaLa sacarosa siendo disacárido daprueba positiva debido a suhidrólisis ácida, dando la D-glucosa y D-Fructosa
  28. 28. ProcedimientoEn 2 minutos1 mL de sln de azúcar al 5%1 mL del reactivoA baño María
  29. 29. Ensayos para pentosas
  30. 30. Ensayo deBial
  31. 31. Fundamento• El HCl del reactivo de Bial convierte a la pentosa en furfural, la cual reaccionacon orcinol para formar un complejo de color verde
  32. 32. ProcedimientoSolucióncarbohidrato al 5%1 mL reactivo bial
  33. 33. Ensayo deTollens
  34. 34. Fundamento• La pentosa se convierte en furfural con calentamiento en HCl, y se hacereaccionar con un fenol (floroglucinol) para formar un complejo rojo:
  35. 35. Procedimiento10 mg delcompuesto+ 5mL deHCl 6N10 mg defluoroglucinolCalentar abaño Maríax 1 minutoColoraciónroja
  36. 36. Prueba de laBencidina deTauber
  37. 37. Fundamento Característico para identificación de pentosas. Trabaja de forma similar que en la prueba de Tollens, peroen este caso, el ácido es acético y el compuesto con elque se condensa el furfural es una bencidina.
  38. 38. Procedimiento• 1 mL de sln de bencidina + 2 gotas de solución de carbohidrato• Calentar a ebullición• Enfriar rápidamenteColor violeta
  39. 39. Caracterizaciónde azúcares porformación deosazonas
  40. 40. Fundamento
  41. 41. Fundamento• Las osazonas de diferentes azúcares tienen punto de fusión y característicasdiferentes:• Hidrazona• Color blancoManosa• Al formarse se separa alprincipio como un aceiteArabinosa• Se separa de forma cristalina• No precipita en calienteLactosa
  42. 42. ProcedimientoEn un tubo deensayo0,2 g decarbohidrato0,4g declorhidrato defenilhidracinapuro0,6g de acetatode sodiocristalizado4 mL de aguaTapar con uncorcho sinajustarBaño maría a100°CAgitar el tuboocasionalmentesin retirar delbañoAnotar el tiempode formación dela osazona
  43. 43. Procedimiento alternativo0,5 g decarbohidrato +2mL de agua1 mL HAc glacial+ 3 mL agua + 1mL fenilhidracinapuraAgitar hastaobtener una slnclaraAgregar la 2sln asln de azúcarAgitarcuidadosamenteColocar el tuboen baño maríaAnotar el tiempode formación dela osazonaEn cada tubopor separado
  44. 44. ResultadosAzúcar Osazonat de formación (min) Pto de fusión (°C)Manosa 0,5 205Fructosa 2 205Glucosa 4 205Xilosa 7 164Ramnosa 9 185Arabinosa 9 166Galactosa 15-19 196Sacarosa 30 205Lactosa - 200Maltosa - 208

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