Enterobacterias

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Enterobacterias

  1. 1. ENTEROBACTERIAS P.Q.C. MIGUEL ANGEL ORTIZ GIL.
  2. 2. <ul><li>Las Enterobacteriaceae habitan en: </li></ul><ul><ul><li>Distribuidas en suelo, </li></ul></ul><ul><ul><li>agua, </li></ul></ul><ul><ul><li>alimentos. </li></ul></ul><ul><ul><li>Flora normal del intestino de humanos y </li></ul></ul><ul><ul><li>animales. </li></ul></ul>Características Generales:
  3. 3. <ul><li>MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES </li></ul><ul><ul><li>Bacilos o cocobacilos cortos gram negativos, </li></ul></ul><ul><ul><li>no esporulados, </li></ul></ul><ul><ul><li>mótiles (flagelos perítricos) o no, </li></ul></ul><ul><ul><li>capsulados o no, </li></ul></ul><ul><ul><li>pilis. </li></ul></ul>
  4. 4. <ul><li>BIOQUÍMICAS </li></ul><ul><ul><li>Anaerobios facultativos, </li></ul></ul><ul><ul><li>catalasa positiva, (excepto Shigella dysenteriae Tipo 1) </li></ul></ul><ul><ul><li>oxidasa negativa, </li></ul></ul><ul><ul><li>fermentan la glucosa, </li></ul></ul><ul><ul><li>reducen nitratos a nitritos. </li></ul></ul>
  5. 5. Reacción de catalasa <ul><li>Esta prueba detecta la presencia de citocromooxidasas </li></ul><ul><li>La prueba se hace con peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La producción inmediata y abundante de burbujas indica la conversión del H202 en agua y oxígeno gaseoso. </li></ul><ul><li>L a prueba de la catalasa debe realizarse a partir de un medio que no contenga sangre porque los eritrocitos pueden producir una reacción de catalasa débil. </li></ul>
  6. 6. P rueba de la catalasa
  7. 7. R eacción de citocromo oxidasa <ul><li>Los citocromo son hemoproteinas que contienen hierro y actuan como último eslabón de la cadena de la respiración aerobia ; transfireren electrones de Hidrógeno al Oxígeno, con la formación de agua. </li></ul><ul><li>El sistema citocromo se encuentra presente en microorganismos aerobios, microaerofílicos y en algunos anaerobios facultativos , pero nunca en anaerobios estrictos. </li></ul>Dimetil-p-fenilendiamina al 1%
  8. 8. <ul><li>Los modos de transmisión a los seres humanos son: </li></ul><ul><ul><li>Infecciones Nosocomiales </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>( E. coli ) </li></ul></ul></ul><ul><ul><li>Ingesta de alimentos o agua. </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Salmonella, </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Shigella, </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Yersinia enterocolitica. </li></ul></ul></ul>
  9. 9. Enterobacteriaceae Patógenos oportunistas. Patógenos evidentes. Citrobacter. Enterobacter. Klebsiella. Proteus. Serratia <ul><li>Salmonella tiphy – (fiebre tifoidea.) </li></ul><ul><li>Shigella – (Disentería). </li></ul><ul><li>Y. Pestis (peste negro). </li></ul>
  10. 10. <ul><li>MEDIOS DE CULTIVO </li></ul><ul><li>1 . Medios no selectivos: agar sangre </li></ul><ul><li>2. Medios selectivos-diferenciales : agar McConkey, agar EMB, SS agar, agar XLD. </li></ul><ul><li>McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes </li></ul><ul><li>(no fermentan lactosa). </li></ul><ul><li>Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes </li></ul><ul><li>(no fermentan lactosa). </li></ul>
  11. 11. Mac Conkey <ul><li>Gram positivas ven inhibido - sales biliares y cristal violeta. </li></ul><ul><li>Fermenten la lactosa liberarán productos ácidos que producirán un cambio de pH que se detectará gracias al rojo neutro . </li></ul>
  12. 13. Aspectos de las colonias. <ul><li>En agar sangre y agar chocolate las colonias son: </li></ul><ul><ul><li>Grandes. </li></ul></ul><ul><ul><li>Gris. </li></ul></ul><ul><ul><li>Lisas. </li></ul></ul><ul><li>Klebsiella o Enterobacter. </li></ul><ul><ul><li>Mucoides – (polisacáridos). </li></ul></ul>
  13. 14. <ul><li>E. Coli – ( Beta hemolítica). </li></ul><ul><li>P. mirabilis. </li></ul><ul><li>Motilidad. P. penneri. </li></ul><ul><li>P. Vulgaris. </li></ul>
  14. 15. <ul><li>PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN </li></ul><ul><li>1. Pruebas bioquímicas </li></ul><ul><li>2. Pruebas serológicas </li></ul><ul><li>3. Pruebas de biología molecular </li></ul>
  15. 16. Pruebas bioquimicas
  16. 17. <ul><li>Estudia el metabolismo de la bacteria </li></ul><ul><li>Estudio basado en la determinación de la presencia o ausencia de diferentes enzimas codificadas por el material genético del cromosoma bacteriano </li></ul><ul><li>Se detecta a través de medios de cultivo especiales </li></ul>Pruebas bioquímicas
  17. 18. <ul><li>Los medios de cultivo generalmente están formados por: </li></ul><ul><li>El sustrato sobre los cuales actúan las enzimas </li></ul><ul><li>Un indicador que puede detectar la disminución del sustrato o la presencia de un producto metabólico especifico </li></ul>
  18. 19. <ul><li>La medición de las diferentes características metabólicas de un microorganismo permiten identificar la especie </li></ul>
  19. 20. <ul><li>Metabolismo fermentativo </li></ul><ul><li>Mide la capacidad del microorganismo para utilizar los hidratos de carbono </li></ul><ul><li>Microorganismo actúa sobre los carbohidratos y acidifica el medio </li></ul><ul><li>El indicador presente vira </li></ul>Pruebas bioquímicas
  20. 21. <ul><li>PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS </li></ul><ul><li>Prueba TSI (triple azúcar hierro) </li></ul><ul><li>Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g. </li></ul><ul><li>Resultados: </li></ul><ul><li>Superficie inclinada/fondo: </li></ul><ul><li>- ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella, </li></ul><ul><li>Citrobacter, Enterobacter, etc </li></ul><ul><li>- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia. </li></ul>
  21. 22. TSI
  22. 23. TSI
  23. 24. CITRATO DE SIMMONS
  24. 25. <ul><li>Mide la capacidad de un organismo para utilizar el citrato como única fuente de carbono </li></ul><ul><li>Citrato compuesto orgánico constituye uno de los metabolitos del ciclo de Klebs </li></ul><ul><li>Las bacterias al utilizar citrato extraen nitrógeno de la sal de amonio con producción de amoniaco que hace vire el indicador </li></ul>CITRATO DE SIMMONS
  25. 26. <ul><li>Para esta prueba se utiliza el agar de citrato de Simmons que contiene citrato de sodio y azul de timol como indicador. </li></ul><ul><li>La única fuente de carbono en este medio es el citrato. </li></ul><ul><li>Si la reacción es positiva el indicador vira a azul. </li></ul><ul><li>En la reacción negativa los microorganismos no crecen y el medio conserva su color verde </li></ul>CITRATO DE SIMMONS
  26. 27. <ul><li>El medio también contiene sales de amonio que la bacteria usa como fuentes de nitrógeno </li></ul><ul><li>Fosfato de amonio amoniaco alcalinización del medio </li></ul>CITRATO DE SIMMONS
  27. 28. CITRATO DE SIMMONS
  28. 29. CITRATO DE SIMMONS
  29. 30. CITRATO DE SIMMONS
  30. 31. Descarboxilasas de aminoácidos (arginina, lisina, ornitina <ul><li>Los medios contienen: </li></ul><ul><li>Peptona </li></ul><ul><li>Extracto de carne </li></ul><ul><li>Glucosa </li></ul><ul><li>Aminoácido </li></ul><ul><li>Purpura de bromocresol </li></ul>MEDIO DE LIA
  31. 32. Descarboxilasas de aminoácidos lisina, ornitina <ul><li>Los aminóacidos al perder el grupo carboxilo se convierten en aminas lo que incrementa el pH del medio y el indicador ( púrpura del bromocresol ) vira a violeta </li></ul>R – CH - NH 2 - COOH R- CH 2 - NH 2 + CO 2 Aminoácido Amina Dióxido de carbono pH alcalino
  32. 33. Descarboxilaciòn lisina (LIA y MIO) Ejemplo: Aminoácido amina + dióxido de carbono Lisina lisina descarboxilasa cadaverina L- Ornitina Ornitina descarboxilasa Putrescina + CO2
  33. 34. Descarboxilaciòn lisina (LIA)
  34. 35. Descarboxilaciòn lisina (LIA)
  35. 37. Prueba que se utiliza para investigar: Motilidad (M) Producción de Indol (I) Descarboxilación Ornitina. INDOL MEDIO DE MIO
  36. 38. INDOL
  37. 39. Indol <ul><li>El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano. </li></ul><ul><li>Las bacterias que poseen la triptofanasa . </li></ul><ul><li>La prueba de indol está basada cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído . </li></ul>
  38. 40. Medio de MIO (p-dimetilaminobenzaldehído )
  39. 41. INDOL Prueba positiva
  40. 42. INDOL Prueba negativa
  41. 43. E. coli
  42. 44. Escherichia coli . <ul><li>Mac Conkey. </li></ul><ul><ul><li>Colonias Planas. </li></ul></ul><ul><ul><li>Colonias secas. </li></ul></ul><ul><ul><li>Colonias Rosadas. (LF) </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>INDOL (+) </li></ul></ul></ul>k/A Ó A/A K/A LIA TSI
  43. 45. <ul><li>Escherichia coli </li></ul><ul><li>Clasificación de las cepas productoras de diarrea </li></ul><ul><li>E. coli enterotoxigénica </li></ul><ul><li>E. coli enteropatógena </li></ul><ul><li>E. coli enterohemorrágica </li></ul><ul><li>E. coli enteroinvasiva </li></ul><ul><li>E. coli enteroagregante </li></ul>
  44. 46. E. coli
  45. 47. Klebsiella pneumoniae
  46. 48. Klebsiella. <ul><li>Mac Conkey </li></ul><ul><ul><li>LF. </li></ul></ul><ul><ul><li>Mucoides. (polisacáridos). </li></ul></ul><ul><li>Indicaciones de laboratorio: </li></ul><ul><ul><li>Lysine + </li></ul></ul><ul><ul><li>Citrato + </li></ul></ul><ul><ul><li>Indol – </li></ul></ul><ul><ul><li>+/+ TSI (con gas) </li></ul></ul><ul><ul><li>No-motile </li></ul></ul><ul><ul><li>Ornithine – </li></ul></ul>
  47. 49. Klebsiella pneumoniae Cápsula
  48. 50. Klebsiella pneumoniae
  49. 51. Proteus
  50. 52. Proteus. <ul><li>Género que contiene varias especies, de las cuales dos tienen importancia médica: </li></ul><ul><ul><li>P. mirabais . INDOL (-) </li></ul></ul><ul><ul><li>P. vulgaris. INDOL (+) </li></ul></ul><ul><li>Mac Conkey. </li></ul><ul><ul><li>NFL. </li></ul></ul><ul><ul><li>Swarning. </li></ul></ul><ul><ul><li>Olor a podrido. </li></ul></ul>
  51. 53. Enterobacter
  52. 54. Enterobacter. <ul><li>Mac Conkey. </li></ul><ul><ul><li>LF. </li></ul></ul><ul><ul><li>Pueden ser Mucoides. </li></ul></ul><ul><ul><li>MIO: </li></ul></ul><ul><ul><li>*MOVILIDAD (+) </li></ul></ul><ul><ul><li>*INDOL: (+) E. agglomeras. </li></ul></ul><ul><ul><li>*INDOL: (-) </li></ul></ul><ul><ul><li>E. aerogenas (LIA +), </li></ul></ul><ul><ul><li>E. cloacae (LIA-). </li></ul></ul>
  53. 55. Enterobacter
  54. 56. Shigella
  55. 57. <ul><li>Shigella </li></ul><ul><li>S. dysenteriae </li></ul><ul><li>S. flexneri </li></ul><ul><li>S. sonnei </li></ul><ul><li>S. boydii </li></ul>
  56. 58. <ul><li>Shigella </li></ul><ul><li>Mac Conkey: </li></ul><ul><ul><li>NLF. </li></ul></ul><ul><li>TSI: alcalina/ácida, H2S negativo. </li></ul><ul><li>LIA: K/A o A/A. </li></ul>
  57. 59. Crecimiento de Shigella en medio MacConkey
  58. 60. Salmonella
  59. 61. <ul><li>Salmonella </li></ul><ul><li>Clasificación </li></ul><ul><li>S. enteritidis </li></ul><ul><li>S. typhimurium </li></ul><ul><li>S. typhi </li></ul><ul><li>S. paratyphi A </li></ul><ul><li>S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri) </li></ul><ul><li>S. typhi C (Salmonella hirschfeldii) </li></ul>
  60. 62. <ul><li>Salmonella enteritidis </li></ul><ul><li>Mac Conkey: NFL. </li></ul><ul><li>TSI: alcalina/ácida y H 2 S + </li></ul><ul><li>S. typhimurium. </li></ul><ul><li>INDOL (-) </li></ul>
  61. 63. SALMONELLA SSA
  62. 64. Salmonella XLD
  63. 65. Bibliografía: <ul><li>MANUAL DE TÉCNICAS EN MICROBIOLOGÍA CLÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA. 1990. </li></ul><ul><li>DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO CLÍNICOS POR EL LABORATORIO. John Bernard Henry, Todd-Sanford-Davidsohn. Tomo I y II. 8ª Edición. Salvat Editores. 1988. </li></ul><ul><li>DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. TEXTO Y ATLAS COLOR. Koneman, Allen, Dowell, Sommers. Editorial Médica Panamericana. 2ª Reimpresión. 1990. </li></ul>

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