C. Interno C Calidad

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Condicones para el control de calidad Interno en el laboratorio

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C. Interno C Calidad

  1. 1. Control De Calidad Interno <ul><li>Seguimiento de las condiciones de trabajo de cada laboratorio, que permite ver a diario la confiabilidad de los resultados. </li></ul>
  2. 2. Fases Para La Calidad De Un Proceso En El Laboratorio: <ul><li>Fase pre-analítica </li></ul><ul><li>Fase analítica </li></ul><ul><li>Fase post-analítica </li></ul>
  3. 3. <ul><li>Fase Pre-analítica </li></ul><ul><li>Control de equipos que intervengan en la conservación y análisis de la muestra, reactivos, personal, etc. </li></ul><ul><li>Errores que podemos encontrar: </li></ul><ul><li>Errores administrativos. </li></ul><ul><li>Errores de la muestra. </li></ul><ul><li>Errores en la estandarización. </li></ul>
  4. 4. <ul><li>Fase Analítica : </li></ul>Se refiere a los controles y observaciones de los análisis realizados en el laboratorio, con la respectiva verificación del método.
  5. 5. Errores Analíticos : <ul><li>Errores determinados ó sistemáticos. </li></ul><ul><li>Relacionados con el método, personal e instrumentos. </li></ul><ul><li>Resultados constantemente bajos o altos son causados por este tipo de error. </li></ul><ul><li>Influye en la exactitud de los resultados. </li></ul>
  6. 6. Errores Indeterminados o Aleatorios <ul><li>Entrenamiento inadecuado, fatiga, dificultad de observación, vencimiento de reactivos. </li></ul><ul><li>Influyen en la reproductibilidad de la medición. </li></ul><ul><li>Afecta la precisión de los resultados. </li></ul>
  7. 7. <ul><li>Fase Post-analítica : </li></ul><ul><li>Confirmación de los resultados (trascripción) </li></ul><ul><li>Puntualidad reporte </li></ul><ul><li>Registro (unidades SI) </li></ul><ul><li>Inspeccionar nueva curva de calibración </li></ul><ul><li>Verificar los valores de control de calidad en relación a los límites aceptables </li></ul><ul><li>Manuales (manual de calidad) </li></ul>
  8. 8. Control Interno en Microbiología <ul><li>Control a la muestra </li></ul><ul><li>Control a los medios de cultivo </li></ul><ul><li>Control a los procesos de tinción </li></ul><ul><li>Control de pruebas de sensibilidad </li></ul>
  9. 9. Control al Proceso de Tinción: <ul><li>Se preparan láminas con una gota de suspensión que contenga organismos gram(+) y gram (-) en proporciones iguales. </li></ul><ul><li>Una vez seco, se almacenan sin fijar con calor como controles. </li></ul><ul><li>Bacillus spp . y Neisseria spp. </li></ul><ul><li>Controles se aplican a reactivos nuevos, entrenamiento, una vez por semana. </li></ul>
  10. 10. Control de Calidad en las Pruebas de Sensibilidad <ul><li>Según las necesidades respiratorias de los microorganismos, se distinguen 2 grupos de Antibiogramas: </li></ul><ul><li>Antibiogramas para gérmenes aerobios </li></ul><ul><li>Antibiogramas para gérmenes anaerobios </li></ul>
  11. 11. <ul><li>A. Antibiograma por dilución: </li></ul><ul><li>1. En medio líquido </li></ul><ul><li>Permite investigar la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB) </li></ul><ul><li>2. En medio sólido </li></ul><ul><li>Permite investigar la CMI, que en este caso coincide con la CMB </li></ul>
  12. 12. B. Antibiogramas por difusión en medio sólido <ul><li>Permite investigar la CMI de forma indirecta y aproximada, al relacionarla mediante reglas de regresión con los halos de inhibición </li></ul>
  13. 13. Antibiograma Aeróbio <ul><li>1. Método de dilución en medio líquido </li></ul><ul><li>2. Método de dilución en medio sólido </li></ul><ul><li>3. Método de difusión en medio sólido </li></ul>
  14. 14. En cualquiera de los 3 tipos de antibiogramas aerobios se consideran los siguientes puntos: <ul><li>Medio de cultivo </li></ul><ul><li>Inóculo </li></ul><ul><li>Antimicrobianos </li></ul><ul><li>Incubación </li></ul><ul><li>Lectura e interpretación de resultados </li></ul><ul><li>Control de calidad al producto final </li></ul>
  15. 15. Medio de Cultivo : <ul><li>Será de amplio espectro nutritivo y permitirá el crecimiento de la mayoría de microorganismos a los que va destinado. </li></ul><ul><li>Para los más lábiles podrá incorporar sangre o suero sanguíneo. </li></ul><ul><li>La adición de lo anterior no es muy recomendable, pues limita la acción de algunos antimicrobianos que se ligan a las proteínas. </li></ul>
  16. 16. <ul><li>Tendrá un pH estable (7.2-7.4) y no sufrirá oscilaciones por acción de los microorganismos sobre los componentes del medio </li></ul><ul><li>No incluirá inhibidores de los antimicrobianos como: </li></ul><ul><li>Peptonas, que inactivan los derivados sulfamídicos </li></ul>
  17. 17. <ul><li>Fosfatos, NaCl y extracto de cerebro (lecitina), que inactivan aminoglicósidos y polimixinas </li></ul><ul><li>Sales de Ca y Mg, que forman compuestos quelantes con betalactamicos y tetraciclinas </li></ul>
  18. 18. <ul><li>Ácido para-amino-benzóico (PABA) o cualquier otro antagonista por competencia. </li></ul><ul><li>Glúcidos, que en medios mal tamponados dan lugar a disminuciones del pH. </li></ul><ul><li>El medio que mejor cumple estas condiciones es el Mueller-Hinton. </li></ul>
  19. 19. Inóculo <ul><li>Presentará una turbidez análoga al tubo No. 0.5 de Mcfarland, que se prepara añadiendo 0.5 ml de BaCl 2 0.048 M a 99.5 ml de H 2 SO 4 0.36 N. </li></ul><ul><li>Este patrón se conserva estable durante 1 año en tubos de vidrio tapados, pero si se cierran a la llama, su duración es de varios años. </li></ul>
  20. 20. Antimicrobianos: <ul><li>Deben proceder directamente de firmas comerciales que se dediquen a su fabricación, y tendrán una actividad en producto activo conocida ( mg ó UI/ml) </li></ul><ul><li>Los discos o comprimidos procederán de firmas acreditadas, que solo se dediquen a su producción, y que además no fabriquen antibióticos </li></ul><ul><li>Cada vez que entre un nuevo lote se debe controlar la calidad de los discos </li></ul>
  21. 21. Incubación : <ul><li>En todos los medios aerobios, se incuba a 35 o C durante 18-24 horas </li></ul>Lectura e Interpretación de los resultados : Es propio de cada método y se realiza comparando el resultado obtenido (halo) con las tablas correspondientes
  22. 22. Control de Calidad: <ul><li>Cada laboratorio tendrá seleccionadas algunas cepas de sensibilidad conocida, para que sirvan periódicamente de control interno de la calidad </li></ul><ul><li>Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomona aeruginosa </li></ul>
  23. 23. Antibiograma Anaerobio <ul><li>Método de difusión en medio sólido </li></ul><ul><li>Método de Elución en medio líquido </li></ul><ul><li>Método de dilución en caldo </li></ul><ul><li>Método de dilución en Agar </li></ul>
  24. 24. <ul><li>Medio de cultivo </li></ul><ul><li>La necesidad de utilizar productos suplementarios para garantizar el crecimiento de anaerobios, afecta los resultados del antibiograma. </li></ul><ul><li>La adición de sangre al medio base rebaja las CMI y el diámetro del halo de inhibición. </li></ul><ul><li>Otras sustancias inhiben o alteran los resultados:extracto de carne, peptonas,etc. </li></ul>
  25. 25. Los cambios de pH: <ul><li>La atmósfera ideal esta compuesta de 85% de Nitrógeno, 10% de Hidrogeno y 5% de Anhídrido Carbónico. La presencia de este último compuesto provoca en la superficie del medio una tendencia hacia la acidez, que altera la acción de betalactamicos y aminoglicósidos </li></ul>
  26. 26. <ul><li>El distinto periodo de duplicación de los microorganismos dificulta estandarizar las normas para la preparación del inoculo </li></ul>Concentración del inóculo
  27. 27. <ul><li>Se encuentran entre 35 o C y tiempo de incubación entre 24-48h, según la velocidad de crecimiento del microorganismo. </li></ul><ul><li>En cualquier caso las siembras se incuban dentro de jarras especiales exentas de oxígeno </li></ul>Características de la incubación:
  28. 28. Fuentes Comunes de Error: <ul><li>Utilización de un agar diferente al recomendado por la técnica. </li></ul><ul><li>Preparación del medio de cultivo con un pH inadecuado. </li></ul><ul><li>Utilización de medios de cultivo con fecha de expiración vencida, mal almacenados o hidratados. </li></ul>
  29. 29. <ul><li>Excesivo retraso entre la preparación del medio y su inoculación </li></ul><ul><li>Excesivo retraso entre la inoculación y la aplicación de los discos </li></ul><ul><li>Conservación incorrecta de los discos de sensibilidad: refrigerados y en recipientes libres de humedad. </li></ul>
  30. 30. <ul><li>Preparación y/o conservación incorrecta del patrón de turbidez </li></ul><ul><li>Cualquier omisión o falla en el procedimiento ó técnica escogida(temperatura,tiempo,lectura) </li></ul><ul><li>Omitir el uso de las cepas de microorganismos control </li></ul>
  31. 31. <ul><li>No realizar las modificaciones y justificaciones para: </li></ul><ul><li>H. Influenzae: Agar MH + 1% de Hb (5% sangre de caballo). </li></ul><ul><li>N. Gonorrhoeae : Agar GC base sin Hb y suplementado con 1% de isovitalex. CO 2 al 5-10%. </li></ul>
  32. 32. <ul><li>S. Pneumoniae: Agar MH + sangre de cordero al 5% y atmósfera aerobica sin CO 2 </li></ul><ul><li>Estafilococos: para detectar las cepas heteroresistentes a las penicilinas isoxazólicas, deben incubarse a 30 o C, agar MH hipertónico (4% NaCL) </li></ul>

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