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Fassio siaic firenze 2013 -def

  1. 1. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Diagnostica molecolare nell’allergia alimentare Filippo FassioSOD Immunologia e Terapie Cellulari Direttore Prof. E. Maggi
  2. 2. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Diagnostica allergologica: evoluzione…
  3. 3. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 La diagnosi di allergia alimentare… The history of an immediate reaction consisting of typical allergic symptoms within 2 h of ingestion,supported by positive tests for specific IgE antibodies, is usually sufficient to establish a presumptive diagnosis for suspected IgE-mediated reactions.
  4. 4. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013La diagnosi di allergia alimentare…
  5. 5. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Limiti dei test diagnostici… The fact that many foods are usually consumed at the same time, may obscure identification of the triggering allergen.Higher concentrations of food-specific IgE and larger skin test wheals correlate with an increased likelihood of a reaction upon ingestion. Unfortunately, these tests are not sufficiently sensitive or specific to establish a diagnosis without supporting evidence. Therefore, in the diagnosis of food allergy a convincing history of reaction is the key but only a well-performed OFC can give a definitive diagnosis. ORAL FOOD CHALLENGE
  6. 6. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Limiti dei test diagnostici…«Tali risultati sono però influenzati da molteplici variabili e sonostati validati su popolazioni non europee. La loro riproducibilità nella popolazione italiana è quantomeno da confermare».
  7. 7. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Limiti dei test diagnostici…
  8. 8. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia o sensibilizzazione?1. Unfortunately, the serum or skin test results are not accurately predictive of the nature or severity of reaction to the particular allergen.2. It is well established that the presence of food-specific IgE (i.e. sensitization) is not intrinsically diagnostic of food allergy.3. Several studies have demonstrated that less than 40% of patients with positive PSTs or food specific IgE have OFC- proven food allergy4. Additionally, reactions may occur in patients with negative test results presumably because the test may be missing some essential proteins or epitopes
  9. 9. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia o sensibilizzazione? Component resolved diagnostics may provide a diagnostic and prognostic platform for differentiating subjects with food allergy from those withsensitization based on crossreactivity, for prediction ofseverity of reactions based on sensitization to proteins with greater risk of severe reactions, and prediction of natural history
  10. 10. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia o sensibilizzazione? Component resolved diagnostics may provide a diagnostic and prognostic platform for differentiating subjects with food allergy from those withsensitization based on crossreactivity, for prediction ofseverity of reactions based on sensitization to proteins with greater risk of severe reactions, and prediction of natural history
  11. 11. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 “Allergen component-resolved testing might help toidentify patients sensitized to food, latex, or venom who are at increased risk of anaphylaxis after exposure to these allergens versus those who are sensitized but clinically tolerant to these allergens”
  12. 12. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013
  13. 13. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia all’Arachide… BMJ 2008:337;a2880
  14. 14. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia all’Arachide… Dei 91 bambini sensibilizzati all’arachide, allergia confermata in 19 casi (21%) JACI 2010; 125: 191
  15. 15. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia all’Arachide… JACI 2010; 125: 191 Una valutazione allergologica con approccio CRD, può aiutare ad identificare i “veri” allergici?
  16. 16. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia all’Arachide… La differenza più marcata trasensibilizzati ed allergici è evidenziata dalla risposta ad Ara h2
  17. 17. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia all’Arachide…
  18. 18. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia all’Arachide… JACI 2009;124(4):771-8.e5
  19. 19. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia all’Arachide…differenze geografiche Ara h 2 Ara h 9
  20. 20. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia a frutta e verdura fresca
  21. 21. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia al kiwi…• It is nowadays among top ten food allergy sources in Europe• Kiwifruit allergy can be due to monosensitization or associated with pollen (grass, birch) or latex allergy
  22. 22. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia al kiwi…• The papain-like cysteine protease, actinidin (Act d 1), represents a major allergen and is also abundantly expressed (up to 50% of soluble protein fraction)• This highly active protease may also account for the rapid degradation of other proteins including allergens, which in turn affects the varying quality of test solutions for Skin Prick Tests (SPTs) The diagnostic sensitivity of the extract ImmunoCAP was 17% compared with 77% when taking all the individual allergen tests together
  23. 23. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia al kiwi… • sensitization to Act d 1 and Act d 3 was significantly linked with anaphylactic reactions in the patients • Sensitization to Act d 2, Act d 8 and Act d 11 increased the specificity of the test • Act d 7 and Act d 9 reactivity decreased specificity
  24. 24. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia al kiwi…• sensitization to Hev b 11, the latex chitinase, was predominantly found in the kiwifruit–latex allergic patients, thus representing a marker for the latex–kiwifruit syndrome• in all these recent studies sera were identified that did not display IgE directed to any of the allergens tested so far and it may well be that the panel of kiwifruit allergens awaits completion Kiwi gold: Act d 1 ↓↓↓ (circa 50 volte meno)
  25. 25. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia al pomodoro…• In Germany 9% among birch pollen allergic patients reported tomato-induced allergic symptoms• As a result of the potential of tomatoes to induce unspecific histamine liberation the allergenic properties of that vegetable have been mainly neglected in the past• In a Spanish investigation only 16% of tomato-sensitized patients reported symptoms upon tomato ingestion
  26. 26. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia al pomodoro…• 45% of tomato allergic patients reacted to LTP• 65% to a protein suspected to be profilin• 15% of patients recognized only the LTP and experienced more severe symptoms to tomato
  27. 27. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia al pomodoro…• Tomato seeds are rich in proteins and constitute 70% storage protein such as globulins• Recently, a legumin and a vicilin were identified as putative tomato seed allergens
  28. 28. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia al pomodoro…• In summary, tomato is a complex allergenic vegetable and the reliability of the single allergens for molecular diagnosis has to be confirmed in future studies
  29. 29. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Allergia alla nocciola… Dosaggio IgE totali (RIST): 37 kU/l Dosaggio IgE specifiche per inalanti: tutte < 0.10 kUI/lDosaggio IgE specifiche per Il prick test è risultato alimenti: positivo per: • Nocciola 3,07 kUI/l • Nocciola ( +++) • Noce 0,12 kUI/l • Noce (+/-) • Pinolo (+/-)
  30. 30. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia alla nocciola… Negativo!
  31. 31. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergia alla nocciola…
  32. 32. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Microarray… 112 allergeni (Thermo Fisher) 103 allergeni (Phadia) 89 allergeni (VBC genomics)…ma in natura ce ne sono DI PIU’…
  33. 33. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Non conta solo la quantità!Pazienti  Allergeni (103) 
  34. 34. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Conclusioni Niente panico, ma individuare i soggetti che possono più facilmente avere reazioni gravi!Gli allergeni molecolari possono aiutare a stratificare il rischio, ma… …attenzione alle differenze geografiche! (anche nello studio della letteratura)
  35. 35. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Conclusioni Ci sono alimenti per i quali (come CRD) siamo più avanti… …ma non così tanto! Per altri alimenti (anche importanti) siamo più indietro…Ci possiamo accontentare di 4 molecole per 2 alimenti? (il pomodoro ed i suoi semi)
  36. 36. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Microarray… 112 allergeni (Thermo Fisher)Pazienti  103 allergeni (Phadia) 89 allergeni (VBC genomics) Allergeni (103) 
  37. 37. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Conclusioni
  38. 38. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Conclusioni
  39. 39. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013Allergome…in caso di bisogno www.allergome.org
  40. 40. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013
  41. 41. AOU Careggi SOD Immunologia e Terapie Cellulari SIAIC Toscana-Emilia Romagna 12 Aprile 2013 Possiamo fermarci qui? Grazie! fassio.filippo@gmail.com

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