Bioq-determinacion de biomoleculas

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Bioq-determinacion de biomoleculas

  1. 1. UNIVERSIDA TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD ECUELA DE ENFERMERIA ASIGANTURA: BIOQUIMICA TEMA: COMO DETERMINAR BIOMOLECULAS CATEDRATICO: BIOQ. CARLOS GARCIA MSC ALUMNA: GABRIELA VEGA MACHALA-EL ORO-ECUADOR
  2. 2. ¿¿¿QUE SON BIOMOLECULAS??? Son la unión de distintos grupos funcionales a la cadena de carbono determinan un conjunto muy variado de moléculas que son esenciales para la vida. GLUCIDOS LIPIDOS PROTEINAS ACIDOS NUCLEICOS
  3. 3. ¿¿QUÉ SON GLUCIDOS?? ¿GLUCOSA…?? • Denominados también hidratos de carbono están formados generalmente por: C,H,O,s,p • Son depósitos de energía química que es liberada en cuanto el cuerpo la necesita. • La cadena de glucosa tiene 6carbonos ,1 aldehído, varios grupo de alcohol, y completando las 4 uniones de carbono tenemos átomos de hidrogeno, así:
  4. 4. !!PARA RECORDAR!! En todas las biomoleculas : MONOMERO:son las partículas individuales OLIGOMERO: formados por la union de 2 a 10 monómeros. POLIMERO:formados por la unión de mas de 10 monomeros Características que diferencian a los glúcidos: En forma general los glúcidos se clasifican así:
  5. 5. ¿¿¿QUÉ SON LOS LÍPIDOS??? • Son la fuente de reserva energética que se caracteriza por ser insolubles en agua, además ,por ser buenos aislantes térmicos además de actuar como lubricantes , protección , impermeabilizantes y de ser componentes importantes de la membrana plasmática de las células tanto en vegetales como en animales. Clasificación de los lípidos :
  6. 6. ¿¿¿QUÉ SON LAS PROTEÍNAS??? • Son moléculas complejas formada por la unión de aminoácidos ,es uno de os componentes mas importante de los seres vivos ,tiene importancia a nivel estructural que al degradarse se convierten en aminoácidos ,algunos aminoácidos son producidos por el mismo organismo deben ser incorporados necesariamente a la dieta. Observarás también que esta proteína tiene una forma muy compacta que se la clasifica como proteína globular. Aquellas proteínas en donde la cadena está mucho más “estirada” se clasifican como fibrosas.
  7. 7. ¿¿¿QUÉ SON LAS ENZIMAS??? • Las enzimas cumplen la función vital de acelerar la velocidad de las reacciones químicas ,es decir que las enzimas hacen que las transformaciones químicas de las sustancias ocurran en tiempos que sean compatibles para la vida .
  8. 8. CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS Todas las enzimas son proteínas Son especificas ,es decir que cada enzima solo puede acelerar un tipo de reacción No son alteradas por la reacción en la que intervienen , es decir, luego de la reacción pueden actuar nuevamente. Son eficientes en cantidades muy pequeñas • Cada enzima, por la forma del sitio activo, puede unirse sólo a aquel sustrato que tenga una forma complementaria. Por eso decimos que la acción de las enzimas es específica. • Se establece una cadena enzimática donde el sustrato inicial sufre sucesivas transformaciones para obtener un producto final muy diferente. En los seres vivos generalmente existe gran cantidad de este tipo de cadenas.
  9. 9. ¿¿CÓMO DETERMINAR BIOMOLECULAS?? • Podemos determinar las biomoleculas por métodos : • Tratamiento con aldehídos • De modificación selectiva • Aplicación de radiación electromagnética. • Métodos químicos • Fotooxidación • Métodos clásicos • Espectrofotometría • Métodos electroquímicos: Reacción de Biuret Nitración ,cloración ,bromacion y iodacion en residuos de ácidos. • Reacciones de saponificación • Ingeniería de proteínas. • Modificación química de los residuos de metionina y tirosina • Hidrolisis de oxidación electroquímica (directa o indirecta) • Microscopía de fuerza atómica. • Técnicas ópticas
  10. 10. ASPECTOS INNOVADORES La aplicación de estas técnicas tienen consecuencias estructurales y funcionales .de este modo se puede obtener novedosas aplicaciones tales como la obtención de factores
  11. 11. IDENTIFICACION DE HIDRATOS DE CARBONO:GLUCOSA ENSAYO REACTIVO DE BENEDICT: • En u tubo de ensayo mezclar 3ml de solución al 1% de glucosa con 2 o 3 gotas de reactivo de BENEDICT.la mezcla tiene una coloración verde azul • Con el mechero a baño maria (37°)calentar el tubo de ensayo con la mezcla durante 1 o 3 minutos ,hasa que la mezcla cambie a color amarilloverdoso,que luego cambia a color naranja y luego a color rojo ladrillo . • El calor favorece a la reacción La aparición de la coloración amarillo verdoso ,anaranjado, y finalmente rojo ladrillo,es precisamente la reaccione que indicaque en la solución hay prescencia de glucosa, sin embargo el color determina la concentración ya sea en mayor o menor proporción.
  12. 12. IDENTIFICACION DE ALDOSAS Y CETOSAS ENSAYO REACTIVO DE SELINWANOF: • El reactivo consiste en resorcinol y acido clorhídrico concentrado • Al calentarlas ,las cetosas son deshidratadas mas rápido que las aldosas • La cetosa deshidratada reacciona con el resorcinol para producir un color rojo,en algunas casos suelen reaccionar produciendo un color rosa
  13. 13. IDENTIFICACION DE LIPIDOS • A un tubo de ensayo agregar 1ml de éter,a otro 1 ml de alcohol,a otro 1ml de agua destilada y finalmente el ultimo con 1ml de gasolina . Se podrá observar que: • En el tubo 1, el aceite es soluble en éter • En el tubo 2,existe poca solubilidad en el alcohol • En el tubo 3 se aprecia uuna emulsion que luego desaparecerá.(no hay solubilidad) • En el tubo 4 también se ve solubilidad en la gasolina.
  14. 14. IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS ENSAYO REACTIVO DE BIURET: • En un tubo de ensayo mezclamos 2ml de clara de huevo con 2ml de agua destilada .Agitamos • Luego procedemos a unir con 30% de (NaOH) y 2 o 4 gotas de biuret • Podemos obsevar que aparece una zona superficial de color morada o violeta (reacción en zona). Al transcurrir el tiempo el contenido del tubo toma el color violáceo,debido a que de esta manera es como se indica la pescencia de un aminoácidos y por ende una proteína • La clara de huevo puede ser también reemplazada
  15. 15. IDENTIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS • La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula. • Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separado de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta práctica que no suele haber en una cocina. • El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.
  16. 16. GLUCOSA EN PLASMA SANGUÍNEO • Determinado atravez del metodo de espectrofotometría • Como ya sabemos la glucosa es la fuente principal de energía en todo ser vivo. • Mediante esta técnica podemos determinar cuantitativamente la prescencia de este compuesto,para valorar la glucosa en el suero sanguíneo enzimático calorimétrico en el cual en que la glucosa presente en el suero sanguíneo es transformada por la GOD en acido gluconico y peroxido de hidrogeno,el cual en presencia de POD se convierte en un compuesto de color rojo que absove entre 492 y 550 nm,con un pico máximo de absrvancis a 500nm. • Mediante este métodos obtienen valore cuantitativos por medio de la absorbancia que el compuesto presente ,es decir a mayor absorbancia mayor concentración de glucosa ,cabe recalcar que para esto tenemos diversas muestras que varían en concentración, que a su vez son las que nos sirven de base para realizar la escala definitoria de la concentración y absorbancia ,este procedimiento se lo realiza en un laboratorio que nos brinde las condiciones optimas en cuales es indispensable el espectrofotómetro.
  17. 17. BIBLIOGRAFÍA • -Antonio Jimeno, M. Ballesteros, A. Pardo; L, Ugedo; Biología COU, Editorial Santillana, 1992 • -Carlos A, Miguel González, Araceli del Cañizo, Ángel Costa Pérez; Biología 2º Bachillerato; Editorial Everest 1999 • -Juan Ángel España, José G. Conde Domínguez, Antonio Fernández Diez...Actividades Prácticas de Ciencias Naturales /1 Editorial Dossat, s.a. , 1980
  18. 18. GRACIAS

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