Cándida

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Estudio de los diferfentes suntipos de Cándida, diagnostico y manejo

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Cándida

  1. 1. CÁNDIDA Dra. ELIANA PATRICIA CORDERO DORIA R1 GINECO - OBSTETRICA Revisión del docente
  2. 2. Reino: Hongo División : Deuteromycota Clase: Blastomycetes Familia: Cryptococcaceae Género: Candida Especies: albicans (como la más frecuente y virulenta) y otras especies. CA SAS RINCON, G. (1989): Micología General. Caracas. Universidad Central de Venezuela. Ediciones de la Biblioteca, pp. 243-247. TAXONOMIA .
  3. 3. HISTORIA <ul><li>Robin 1853 : Oidum albicans ; 100 sinónimos y 18 géneros. </li></ul><ul><li>2 han prevalecido : Género Monilia , en el cual estaba incluída la especie Monilia candida (Plaut, 1885), luego Monilia albicans (Zopt, 1890) </li></ul><ul><li>C.M. Berkhout, 1923 Género Candida y la especie C. albicans , que fue aceptado por el 3er Congreso Internacional de Microbiología en Nueva York en 1939. </li></ul><ul><li>Desde entonces se pasaron al Género Candida todas aquellas levaduras que no encajaban en el Género Monilia , por lo cual todas las afecciones producidas por Candida se conocen con el nombre de Candidiasis. </li></ul><ul><li>SAMSON, J. (1990): Candidiosis buccales: Epidémiologie, diagnostic et traitement. Rev Mens Suisse Odontostomatol. 100: 548-559. </li></ul>
  4. 4. HÁBITAT <ul><li>ENDÓGENA </li></ul><ul><li>Flora microbiana habitual del hombre, animales, vegetales, suelo. </li></ul><ul><li>25-50% Hombre sano, parte de la flora de boca, TD, vagina, uretra, piel, ano, subungueal y manos. </li></ul><ul><li>Otros micro-organismos regulan su patogenicidad, por competencia. </li></ul>
  5. 5. EPIDEMIOLOGÍA <ul><li>PATÓGENOS OPORTUNISTAS: la micrfoflora comensal aprovecha la ‘oportunidad’ para provocar infección. </li></ul><ul><li>4a causa más frecuente de IS. </li></ul><ul><li>C. Álbicans aislada en mucosas (90-100%) y 50-70% cepas procedentes de IS. </li></ul>Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151 SCOPE; adaptado Pfaller MA et al: Diagn Microbiol Infect Dis 31:327-332, 1998 5 Pseudomona Aeruginosa 7 5.3 Klebsiella 6 6.4 E.Coli 5 8 Cándida 4 11.7 Enteococcus 3 16.7 Staphilococcus Aureus 2 32.3 Estafilococcus Coag(-) 1 %Cepa Patógeno N.
  6. 6. Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151 C. Rugosa C. Dubliniensis C. Lusitaniae C. Krusei 5% C. Tropicalis Lactantes y niños C. Parapsilosis Adultos mayores. Emergente x resistencia intrinseca y adquirida a los azoles C. Glabrata Todas las infecciones genitales, cutáneas, bucales. Lactantes y niños. 25-50% cavidad oral de: hospitalizados, infectados con VIH, dentadura postiza, DM, sometidos a terapia anti-neo y ABTerapia. C. Albicans 15-95%
  7. 7. FACTORES DE RIESGO EDAD ↑ INMUNO SUPRESIÓN PKOs Anti Fungicos Control Infecciones <ul><li>Riesgo de mortalidad ↑2 veces en IS x Cándida en </li></ul><ul><li>pacientes hospitalizados </li></ul><ul><li>Candidemia es considerada FACTOR PRONÓSTICO de </li></ul><ul><li>Muerte hospitalaria </li></ul>Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
  8. 8. Perspectiva de la candidemia nosocomial Neoplasia Hematológica Neutropenia Cirugía AD Edades extremas ABT 2 veces por cada uno, Catéter central 7 veces Hemodiálisis 18 veces, Colonización por Cándida 10 veces UCI >3 días 10 veces Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
  9. 9. Formas de Infección ENDÓGENA EXÓGENA <ul><li>Uso de soluciones </li></ul><ul><li>para irrigación </li></ul><ul><li>Líquidos de nutrición </li></ul><ul><li>parenteral </li></ul><ul><li>Transductores de </li></ul><ul><li>presión vascular </li></ul><ul><li>Válvulas cardíacas </li></ul><ul><li>Córneas contaminadas </li></ul><ul><li>Manos </li></ul>Stuar T. W. Microbiología Medica. 779-784
  10. 10. Biología - Morfología <ul><li>Células levaduriformes ovaladas 3-5 micm, blastoconidias, hifas, pseudohifas </li></ul>
  11. 11. <ul><li>Puede asumir morfología de pseudohifas, con células alargadas y unidas como salchichas </li></ul><ul><li>El desarrollo de pseudohifas representa una forma exagerada de gemación </li></ul>Macola, S. Candida. En: Llop, A., Valdés-Dapeno, M., Zuazo, J. L. (2001). Microbiología y parasitología médicas. Vol I. Habana: Editorial Ciencias Médicas; . p. 501-7.
  12. 12. <ul><li>Estructura de Blastosporas : gemación de célula madre. </li></ul><ul><li>Clamidiospora : Aumento de tamaño de la hifa y paredes gruesas. </li></ul><ul><li>Seudohifas : Alineacion de conductos germinales ( Levaduras ) y su apariencia es de hifa. </li></ul><ul><li>Hifa: filamentos ramificados del hongo. </li></ul>Blastoconidias Clamidiosporas Hifas Seudohifas
  13. 13. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Núcleo Citosol Plasmalema Rodeado por membrana (Eucariótico); multicromosómico; haploide o diploide según conjugación; contiene área rica en ARN (nucleolo) Complejo; varias organelas: núcleo, mitocondrias, AdeG, endosomas, RE bien definido... Glucoproteínas, lípidos y ergosterol; = membranas células mamiferos, contienen colesterol
  14. 14. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Pared Celular Forma y tamaño Fisiología Múltiples capas; composición: quitina, PS glicanos, mananos, glicomananos; péptidos; algunos producen cápsula PS extracelular Levaduras: ovales o redondas; 2-10 ﺳ m diametro y varios cientos de micras de longitud Respiración oxidativa; capacidad limitada anaerobiosis (fermentación); metabolismo heterotrófico; producen metabolitos primarios (citrato y etanol) y 2os (amanitina, aflatoxina); tiempo duplicaión largo
  15. 15. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Propiedades de tinción Gram positivos; Cortes histopatológicos: pared célula micótica puede teñirse con procedimientos especiales (metenamina-plata o ácido periódico Schiff)
  16. 16. PATOGENICIDAD <ul><li>Micro-organismos Coexistentes </li></ul><ul><li>↓ -desaparición sustancias inhibidoras </li></ul><ul><li>Uso de anovulatorios </li></ul><ul><li>Sustancias que alteran flora habitual </li></ul><ul><li>Dieta ↑frutas (↑levaduras en TGI) </li></ul><ul><li>CONDICIONES FAVORABLES: </li></ul><ul><li>Quemaduras </li></ul><ul><li>Heridas </li></ul><ul><li>Maceración </li></ul><ul><li>Humedad </li></ul><ul><li>Ruptura de las barreras innatas </li></ul>> RIESGO > PROBABILIDAD > MULTIPLICACIÓN
  17. 17. <ul><li>Adhesinas de glucoproteína y manano que favorecen la colonización y permanencia en la superficie corporal: Receptor análogo al CR3 que se enlaza al C3b </li></ul><ul><li>Enzimas: proteasas, fosfolipasas y lisofosfolipasas </li></ul><ul><li>Perisiten en tejidos: ↑producción de proteínas receptoras para esteroides y receptores de hierro (sideróforos) </li></ul>Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 44, 779-785
  18. 18. FACTORES DE VIRULENCIA <ul><li>Existen diversos factores potenciales de virulencia como </li></ul><ul><li>L a morfología celular </li></ul><ul><li>L a actividad enzimática extracelular </li></ul><ul><li>E l cambio fenotípico y </li></ul><ul><li>L os factores de adhesión, que favorecen la formación de biopelículas. </li></ul>Castrillón Laura, Palma Alejandro. Factores de virulencia en Cándida sp. Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27
  19. 19. morfología celular <ul><li>P olimórfica, forma de levadura (blastosporas) o como filamentos (pseudohifa o hifa). Morfogénesis: puede convertirse de forma reversible a células de levadura, con crecimiento de hifa o pseudohifa. </li></ul>Castrillón Laura, Palma Alejandro. Factores de virulencia en Cándida sp. Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27 <ul><li>La transición de levadura a hifa es uno de los atributos de virulencia </li></ul><ul><li>inva ción t isular, abrir la brecha entre las barreras tisulares, gracias a que su punta es el sitio de secreción de enzimas capaces de degradar proteínas, lípidos y otros componentes celulares , ésta facilita su infiltración en sustratos sólidos y tejidos. </li></ul>
  20. 20. Actividad enzimática extracelular <ul><li>Son determinantes de virulencia en Candida, ya que: </li></ul><ul><li>tienen la capacidad de romper polímeros que proporcionan nutrientes accesibles para el crecimiento de los hongos, </li></ul><ul><li>inactivar las moléculas útiles en la defensa del organismo. </li></ul>Castrillón Laura, Palma Alejandro. Factores de virulencia en Cándida sp. Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27 proteasas , fosfolipasas y lipasas .
  21. 21. proteasas <ul><li>F amilia de enzimas de secreción aspártico proteinasas (SAP), que proporcionan al hongo un sistema proteolítico </li></ul><ul><li>La presencia de los genes de la familia SAP es única en las especies patógenas de Candida </li></ul>Digestión de moléculas proteínicas para adquirir nutrientes Digestión de moléculas del sistema inmunitario del huésped para evitar o resistir el ataque antimicrobiano de éste. D igerir o distorsionar las membranas del huésped y facilitar la adhesión, la invasión a tejidos
  22. 22. fosfolipasas <ul><li>Se han identificado cuatro fosfolipasas (PLA, PLB, PLC y PLD) </li></ul><ul><li>Sólo la PLB1 ha demostrado ser necesaria para la virulencia en modelo animal de candidiasis. </li></ul><ul><li>La PLB1A es una glucoproteína de 84 kDa, se secreta y detecta en la punta de las hifas durante la invasión a los tejidos. </li></ul>
  23. 23. Factores de adhesión <ul><li>Una adhesina se define como una biomolécula que promueve la adherencia de C. albicans a las células del huésped. </li></ul><ul><li>Se han descrito proteínas de C. albicans que se unen a varias proteínas de la matriz extracelular de las células de mamífero, como fibronectina, laminina, fibrinógeno y colágeno tipo I y IV . Existen diferentes tipos de adhesinas en Candida, como Als, Hwp1p, Int1p y Mnt1p . </li></ul>Castrillón Laura, Palma Alejandro. Factores de virulencia en Cándida sp. Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27
  24. 24. Als, Hwp1p, Int1p y Mnt1p. <ul><li>glucoproteínas grandes de la superficie celular que están relacionadas con el proceso de adhesión a las células del huésped. </li></ul><ul><li>Als1 comparte una secuencia con la glucoproteína de adhesión a superficies celulares llamada a-aglutinina, indispensable para el reconocimiento célula-célula. </li></ul><ul><li>Int1 juega un papel importante en la adherencia y filamentación de C.albicans. </li></ul>
  25. 25. Biopelícula <ul><li>C atéteres IV o SV y TOT , se asocian con infecciones y se detecta la formación de biopelículas en su superficie ; válvulas cardiacas, marcapasos y reemplazos de articulaciones . </li></ul><ul><li>Una biopelícula es una comunidad de microorganismos unidos irreversiblemente a una superficie que contiene matriz exopolimérica y que muestra propiedades fenotípicas distintivas. </li></ul><ul><li>las células desarrollan características fenotípicas que son diferentes de sus contrapartes planctónicas: incremento en la resistencia a los agentes antimicrobianos y la protección de las defensas del huésped. </li></ul>
  26. 26. MECANISMOS DE DEFENSA DEL HUÉSPED Pte sano alto grado de resistencia innata a la colonización. Poca virulencia intrínseca Huésped deprimido : SIDA, VIH(+) MNT Irradiados Tto cititóxico (Neo y tranplantes) DEBILIDAD: los comensales se vuelvan patógenos Pérdida de las barreras naturales Fuga hacia la circulación de levaduras y seudohifas Fagocitósis Estimulación de Eosinófilos, Neutrófilos y Monocitos C3 ↑ IgG -Ag glucoprotéicos de la pared -Inhibir aglutinación levaduras
  27. 27. CLASIFICACIÓN CLÍNICA <ul><li>Micósis superficiales: piel y pelo, capas externas </li></ul><ul><li>Micósis cutáneas: epidermis, pelo y uñas </li></ul><ul><li>Micósis sub-cutáneas: dermis, tejidos SC, músculo y fascia </li></ul><ul><li>Micósis sistémicas: origen en pulmón y de ahí... </li></ul>
  28. 28. Cutáneas: intertrigo, paroniquia, onicomicósis. Muco-cutáneas: boqueras, muguet, perianal. Crónicas: candidiásis muco-cutánea, Enfermedad granulomatosa. Sistémicas: Fungemia, endocarditis, Inf Pulmonar, GU, meningitis, endoftalmitis MICÓSIS OPORTUNISTAS: CÁNDIDA C. Albicans C. Stellatoidea C. Tropicalis C. Parapsilosis C. Kefyr (Pseudotropicalis) C. Guillermondii C. Krusei C. Glabrata (Torulopsis Glabrata) C. Viswanathii C. Lusitaniae Causas variables: mecánicas (trauma, oclusión); ABT de amplio espectro, ACO. SIDA, avitaminosis; embarazo. Defectos de LT y macrófagos. Inmunodepresión: endocrinopatías, DM, quemaduras; catéteres IV, abuso drogas IV. Condiciones subyacentes Categorías Clínicas Agente Etiológico
  29. 30. DIAGNÓSTICO Demostración directa a partir de muestras Cx Demostración en medios de cultivo Costras Exudados Cortes de tejidos Lavado con OH de Potasio 10-20% + Blanco de calco-flúor (quitina) Tinciones Biológicas Cultivos Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 44, 486-489. Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
  30. 31. Stuar T. W. Microbiología Medica. 739 Dx CARACTERISTICAS EN MUESTRAS CLÍNICAS Y CULTIVO Tubo germinal CA, CD, CS). Asimilacion de CHO. Morfo en agar de harina de maíz. Grupos de blastoconidias, seudohifas, clamidiosporas terminales Morfología variable. Colonias pálidas, blancas, marrones y opacas. Lisas o rugosas. Levaduras de gemación ovaladas, 2-6micm. Hifas y seudohifas Otras pruebas de identificación Micro Macro Morfo microscópica y en muestra Cx Características morfo en cultivo (Sabouraud)
  31. 32. <ul><ul><li>Se determina la especie de cándida mediante la prueba del tubo germinativo: </li></ul></ul><ul><ul><li>tubo germinativo positivo es C. albicans </li></ul></ul><ul><ul><li>Ausencia se consideró Candida spp. </li></ul></ul>
  32. 33. Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 784 - - + + + C. Stellatoidea - - - + + C. Parapsilósis - + - + + C. Tropicalis - + + + + C. Álbicans Cápsula Filamentación Clamidiosporas Seudomicelio Crec 37C ID CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE CÁNDIDA spp
  33. 34. S (+) - + - - + + + + - - - + - - + + + + CT R - - (+) - - - + + + - - - - - - - + - + CS R - - + - - + + + + - - - - - - + + (+) + CA S - - + - - + + + + - - - - - - (+) (+) (+) + CP Act Cel Mal Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu Ino O Mel Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu UTILIZACIÓN FERMENTACIÓN ID CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS DE CÁNDIDA spp
  34. 35. Blastosporas y tubos germinales de Candida albicans teñidos con blanco de calcoflúor, x1.000
  35. 36. Hifas y blastosporas de Candida albicans en frotis oral (Tinción de PAS, x 400)
  36. 37. <ul><li>Medios sin antibacterianos </li></ul><ul><li>• Agar glucosado de Sabouraud: diferencial; cultivo y crecimiento; depende de la reacción ácida (pH5.6). </li></ul><ul><li>5g Digestivo pancéático de caseína </li></ul><ul><li>5g Peptona de tejido digestivo </li></ul><ul><li>40g Dextrosa </li></ul><ul><li>15g Agar </li></ul><ul><li>pH 5.6 a 25C </li></ul><ul><li>• Agar infusión cerebro-corazón (BHIA). </li></ul>Colonias de Candida albicans en agar glucosado de Sabouraud. Medios de cultivo apropiados para el aislamiento de Cándida
  37. 38. b) Medios con antibacterianos y/o cicloheximida SDA o BHIA con uno o varios de los compuestos siguientes: cloranfenicol (> 16 µg/ml), Gentamicina (5-100 µg/ml), penicilina (20 U/ml), Estreptomicina (40 µg/ml), ciprofloxacino (5 µg/ml) y Cicloheximida (500 µg/ml).
  38. 39. c) Medios selectivos y diferenciales • CHROMagar Candida (CHROMagar Co.): se trata de medios diseñados para aislar e identificar simultáneamente spp Candida, tras 24-48 h de incubación a 35-37ºC. El fundamento es la capacidad de hidrolizar sustratos cromogénicos en presencia de un indicador • Candiselect (BioRad): medio selectivo que permite la identificación de C. Albicans (colonias lisas azules). Candida tropicalis puede desarrollar un color similar, pero con una morfología muy diferente. Colonias verdes de Candida albicans en el medio cromógeno CHROMagar Candida. a: Junto a colonias de otras especies de levaduras de interés médico
  39. 40. <ul><li>Medios fluorogénicos: facilitan la identificación de C. albicans en los cultivos primarios: </li></ul><ul><li>Fluroplate Candida® (Merck): </li></ul><ul><li>I dentifica a C. albicans por la capacidad de hidrolizar un sustrato mediante la enzima N-acetil-galactosaminidasa (NAGasa), g enerando un metabolito fluorescente. </li></ul><ul><li>El tiempo de incubación es de 18-24 h a 30-37ºC. </li></ul>
  40. 41. • Candida ID (bioMérieux). •Albicans ID (bioMérieux) Medio cromógeno Candida ID (bioMérieux). a: Candida albicans (colonias azules); b: Candida tropicalis (colonias rosas). <ul><li>P ermite identificar C. álbicans y orienta en el caso de otras especies. </li></ul><ul><li>El tiempo y la temperatura 30-37ºC durante 48 h de incubación </li></ul><ul><li>C olonia de C. álbicans aparece redonda, convexa y de color azul. </li></ul>
  41. 42. • Chromalbicans agar (Biolife). Aspecto desarrollado por colonias crecidas en Chromalbicans Agar (37 °C, 24h). Las colonias de C. albicans desarrollan una pigmentación azul uniforme; las de C. tropicalis son blancas y de tamaño menor mientras que las de otras especies de Candida son blancas y pequeñas.
  42. 43. Stuar T. W. Microbiología Medica. 742 Gen de Actina Gen de quitina sintetasa Gen p450 Genes de ARNr D-arabinitol CLG/FID enzimático Espectroscopía de masas Enolasa Ac AntiEnolasa EIA, IF Mananos LA, RIA, EIA Β -(1-3) glucanos Quitina Espectrofotometría Sec de ADN genómico Metabolitos Ag citoplasmáticos Componentes de la pared o cápsula MARCADORES ANTIGÉNICOS, BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES
  43. 44. El (1-3) ß-D-glucano es un componente de la pared celular de la mayoría de los hongos, exceptuando C. neoformans y zigomicetos, que es capaz de activar la vía de la c oagulación de los amebocitos de Limulus

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