Transcripcion del gen biotech.2011

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Transcripcion del gen biotech.2011

  1. 1. EXPRESION DEL GEN: Transcripción Procesamiento Traducción 2011
  2. 2. INHIBIDORES DE LA REPLICACIÓN <ul><li>Actinomicina D: Inhiben la síntesis de ADN y ARN, tanto en eucariotes como en procariotes </li></ul><ul><li>Acido Nalidíxico, Acido Oxonílico, norfloxacina,enoxacina, ciprofloxacina, etc. inhiben a la DNA girasa bacteriana </li></ul><ul><li>Doxorubicina (Adriamicina), amsacrina inhiben a la Topoisomerasa II de eucariotes. SE están usando en el tratamiento del cáncer </li></ul><ul><li>Acicloguanosina ( Acyclovir) inhiben a las ADN polimerasas de algunos virus y se les usa para tratar infecciones virales. </li></ul>
  3. 3. DNA POLIMERASA BACTERIANAS Y DE EUCARIOTES FUNCION Enzimas Bacter Enzimas Eucar . Formación del primer Primasa Pol  y primasa Copiar la cadena completa Pol III Pol  Sintesis de fragmen- tos de Okazaki Pol III Pol  Llenar despues de retirar el primer Pol I Pol  Reparar la escisión de bases Pol I Pol 
  4. 4. DNA POLIMERASAS DE BACTERIA CARACTE-RISTICAS    Act. Poli- merizante 5’ -> 3’ 5’ -> 3’ 5 ->3’ Act. Exonu- cleásica 5’ -> 3’ 3’-> 5’ 3’ -> 5’ 5’ -> 3’ 3’ -> 5’ P.M. 109,000 Una cadena 120,000 400,000 Varias subunidades Act, molec. Molec/cel 600 400 30 1 9000 10
  5. 5. REPRESENTACION ESQUEMATICA DE LA SINTESIS PROTEICA (EXPRESION DEL GEN)
  6. 7. TRANSCRIPCION DE LA INFORMACION GENETICA
  7. 8. SINTESIS PROTEICA
  8. 9. EXPRESION GENICA
  9. 11. EXPRESION GENICA
  10. 12. EXPRESION GENICA EN EUCARIOTES Y PROCARIOTES
  11. 13. <ul><li>Exon-intron-exon </li></ul><ul><li>5’ cap </li></ul><ul><li>3’ poli AAAA </li></ul><ul><li>Nucleo-citoplasma </li></ul><ul><li>3 tipos de RNA polimerasa </li></ul>Procarionte Eucarionte
  12. 14. RNA POLIMERASAS <ul><li>RNA polimerasa I : Transcribe la mayoría de genes rRNA </li></ul><ul><li>RNA polimerasa II: Transcribe todos los genes que codifican proteínas </li></ul><ul><li>RNA polimerasa III: Transcribe todos los genes tRNA y el gen del rRNA 5S </li></ul>
  13. 15. Sigma Beta Alfa Alfa Beta’ RNA POLIMERASA DE BACTERIAS
  14. 16. RNA POLIMERASAS DE LOS EUCARIOTES Propiedades I II III Localización Nucleolo Cromatina y nucleoplasma Nucleoplasma % de la actividad celular 50-70 20-40 10 Productos rRNA 28 S, 18S, 5.8 S mRNAs tRNAs rRNA 5S Relación Mn /Mg para mayor actividad 1-1.5 2-5 2 Concentración de  -amanitina necesaria para la inhibición(ug) >400 0.025 20
  15. 17. SEÑALES DE ACTIVACION DE GENES <ul><ul><ul><ul><ul><li>Demetilación </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><ul><li>Presencia de zonas hipersensibles a la DNAasa </li></ul></ul></ul></ul></ul>
  16. 18. En procariontes (bacterias) un mRNA puede tener información para más de un gen
  17. 19. DÓNDE SE INICIA Y TERMINA LA TRANSCRIPCION ‘ Promotor: secuencia río arriba del inicio de la transcripción donde se une el complejo de transcripción incluyendo la RNA polimerasa. Factor de transcripción: proteínas que regulan la expresión génica, se unen a secuencias del DNA río arriba del sitio de inicio de la transcripción o al complejo de transcripción, estimulando o reprimiendo la actividad del complejo.
  18. 20. DONDE SE INICIA Y TERMINA LA TRANSCRIPCION
  19. 21. TRANSCRIPCION Y PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN GENICA
  20. 22. <ul><li>La RNA polimerasa (12 subunidades) requiere de estos factores que permiten: </li></ul><ul><li>Posicionar correctamente la enzima </li></ul><ul><li>Regular su actividad </li></ul><ul><li>FACTORES GENERALES DE TRANCRIPCION: </li></ul><ul><li>TFIID: 2 subunidades (TBP y 1complejo de 10 TAFs) </li></ul><ul><li>TFIIB: (1 proteína) media la interacción entre TFIID y la Polimerasa </li></ul><ul><li>TFIIF: (4 proteínas) estabiliza el complejo DNA-TBP-TFIIB. </li></ul><ul><li>TFIIE: (4 proteinas) regula TFIIH y en conjunto promueven la formación la adición del primer nucleotido del RNA. </li></ul><ul><li>TFIIH: es el complejo de mayor tamaño (9 subunidades) actividad helicasa y de reparación de DNA. </li></ul>Dominio CTD
  21. 23. ACCION DE LA PROTEINA ACTIVADORA
  22. 24. El complejo: RNA polimerasa y los factores generales de la transcipción, son suficientes para realizar transcripción especificamenten en regiones que contienen un promotor. Sin embargo se requiere de otros factores (proteinas) que activen o desactiven este proceso.
  23. 26. Existen complejos de proteínas que integran señales de regulación tanto de otros factores de transcripción como de señales provenientes de la célula
  24. 27. Activación de la transcripción via “mediator”
  25. 28. A diferencia de los factores de transcripción, estas proteinas no se unen al DNA <ul><li>Se unen a laRNA polimerasa </li></ul><ul><li>Pueden regular la actividad de TFIIH CTD kinasa </li></ul>
  26. 29. PROCESAMIENTO DEL hnRNA DE OVOALBUMINA
  27. 30. Dominio CTD
  28. 31. ACCION DE LA PROTEINA CTD (REGULADORA) DURANTE EL PROCESO DE LA TRANSCRIPCION EN EUCARIOTES
  29. 33. TRANSCRIPCION
  30. 35. Recent findings suggest that each step regulating gene expression (from transcription to translation) is a subdivision of a continuous process. In this contemporary view of gene expression, each stage is physically and functionally connected to the next, ensuring that there is efficient transfer between manipulations and that no individual step is omitted 1 2 3 4 5
  31. 43. RIBOSOMA: Estructura y función en la síntesis proteica
  32. 44. El Factor Sigma en la Transcripción
  33. 45. SEÑALES DE INICIO Y DE TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION
  34. 46. TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION <ul><li>FASES: </li></ul><ul><ul><li>Terminación del crecimiento de la cadena de ARN </li></ul></ul><ul><ul><li>Liberación de la cadena recien sintetizada de ARN </li></ul></ul><ul><ul><li>Liberación de la ARN polimerasa </li></ul></ul>
  35. 47. TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION <ul><li>Algunos RNA requieren de un factor adicional para la terminación de su síntesis, es el factor rho </li></ul><ul><li>Este factor tiene un PM de 276000 y es un hexámero constituido de subunidades idénticas de 46000 de PM. El factor rho utiliza ATP para su actividad, se une a la cadena naciente de ARN y la separa del molde </li></ul>
  36. 48. EL CODIGO GENETICO
  37. 49. EL CODIGO GENETICO
  38. 52. t RNA t RNA
  39. 53. ESTRUCTURA DEL RNA DE TRANSPORTE ( tRNA)
  40. 54. PARTICIPACION DEL RIBOSOMA EN LA SINTESIS PROTEICA
  41. 55. RIBOSOMA: Estructura
  42. 56. SITIOS E, P y A EN EL RIBOSOMA
  43. 57. EL POLIRRIBOSOMA Subunidad mayor Subunidad menor Proteína en síntesis Ribosoma
  44. 58. FORMACION DEL COMPLEJO DE INICIACION DE LA SINTESIS PROTEICA
  45. 59. CRECIMIENTO DE LA CADENA PEPTIDICA
  46. 60. PROCESAMIENTO DEL RNA
  47. 61. TRANSCRIPCION Y PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN GENICA
  48. 62. EL FLUJO DE LA INFORMACION GENETICA EN UNA CELULA SUPERIOR (EUCARIOTICA)
  49. 63. THORU PEDERSON
  50. 64. SINTESIS DE LAS PROTEINAS DE EXPORTACION
  51. 65. GLICOSILACION DE LAS PROTEINAS
  52. 66. REGULACION TRADUCCIONAL DE LA EXPRESION GENICA <ul><li>HEMO  </li></ul><ul><li>ICH ( Inhibidor controlado por el hemo)  </li></ul><ul><li>Fosforilación del eIF-2* </li></ul><ul><li>eIF-2*-eIF-2B (Secuestramiento del eIF-2) </li></ul>

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