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Citologia vaginal exfoliativa

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Citologia vaginal exfoliativa

  1. 1. Citología Vaginal Exfoliativa ¿Cuándo y Para qué sirve? 1 al 3 de Diciembre de 2011 San Salvador, El Salvador
  2. 2. CITOLOGÍA VAGINAL EXFOLIATIVA ¿CUÁNDO Y PARA QUÉ SIRVE? Verónica Garza Medina SERVICIO INTEGRAL VETERINARIO veropop7@ yahoo.com.mx 58 63 71 66 04455 10 04 10 55 FundamentoLa toma de una citología vaginal exfoliativa (CVE) es un procedimiento seguro,rápido, económico y confiable. Conforme se adquiere experiencia, toda latécnica, desde tomar la muestra, hasta su evaluación, puede tardar no más dediez minutos.Este procedimiento se basa en la obtención de las células descamadas delepitelio vaginal para su estudio microscópico.Para una adecuada interpretación es importante considerar que se debenobservar detalladamente los siguientes criterios celulares: Forma y tamaño de las células Forma y tamaño de los núcleos Fondo de la laminillaCuando es utilizada para determinar las etapas del ciclo estral, se debeobservar el tipo y la cantidad de células presentes durante sus diferentesetapas, ya que la mucosa vaginal durante este periodo sufre muchastransformaciones debidas a los cambios hormonales: al inicio del ciclo, lascélulas epiteliales están en contacto con la irrigación sanguínea; conformeaumentan los estrógenos, el epitelio vaginal se va engrosando, lo que ocasionaque las células epiteliales se vayan separando del aporte sanguíneo, lo que dacomo resultado una transformación de células parabasales a célulasanucleadas.No obstante, es importante resaltar que la CVE también puede ser una valiosay sencilla herramienta para diagnosticar: Vaginitis Piómetra Neoplasias (principalmente tumor venéreo transmisible TVT) Gestación, etc.Material necesario para la CVEAlgodónHisopos largos con punta de algodón y mango de plásticoPortaobjetosAlcohol de 96°Tinciones
  3. 3. Técnica para obtener una CVE de buena calidad1. Limpiar la vulva con un algodón humedecido con agua2. Abrir un poco los labios vulvares con los dedos para introducir el hisopo por la comisura dorsal de éstos.3. |Introducir de verticalmente el hisopo hasta llegar al cingulum, que es un estrechamiento que une al vestíbulo con la parte caudal de la vagina4. Levantar la vulva y desplazar el hisopo horizontalmente hacia el interior de la vagina, lo más profundo que se pueda. Consideraciones: El hisopo debe ser de mango de plástico largo, pues para alcanzar la vagina de la perra se tiene que recorrer una distancia larga y no se consigue hacerlo con los hisopos que se utilizan comúnmente para la limpieza auricular. También se debe corroborar que el algodón esté bien adherido a la punta del hisopo para que no se desprenda en el interior de la vagina.5. Hacer movimientos circulares de la muñeca, con el fin de obtener una muestra de las paredes vaginales6. Sacar el hisopo de la misma manera en que se introdujo.7. Rodar el hisopo sobre una laminilla, tratando de que queden 3 líneas.8. Fijar la laminilla en alcohol de 96° durante 10 minutos.9. Teñir con la tinción de elección.Células que se pueden observar en la CVELa vagina tiene un epitelio estratificado plano no queratinizado. Las células quelo forman desde la membrana basal hacia la superficie son: Células de reserva Células basales Células parabasales Células intermedias Células superficiales Células anucleadasCélulas basalesSon pequeñas redondas u ovales, de tamaño uniforme, con núcleo evidente,central, de cromatina granular, y ocasionalmente se observa en mitosis. Sucitoplasma es escaso. A partir de ellas se lleva a cabo la regeneración delepitelio.Se observan en casos de atrofia, vaginitis o en úlceras en la mucosa.Células parabasalesSon originadas en la capa profunda del epitelio escamoso estratificado, seencuentran cerca del aporte sanguíneo, por lo que son las más saludables ypequeñas del epitelio vaginal, tienen forma redonda u oval. La cantidad decitoplasma varía según el grado de maduración, pero en general es escaso, yen él se pueden observar ocasionalmente vacuolas o glucógeno. Su núcleo escentral, grande, redondo u oval y puede ocupar casi toda la superficie celular.La relación núcleo citoplasma es equitativa.
  4. 4. Estas células se encuentran durante el proestro, diestro y anestro.Algunas veces, las células parabasales e intermedias contienen leucocitos ensu interior y reciben el nombre de células del diestro. Se observan en diestrostempranos o en vaginitis.Células intermediasLas células intermedias son una transición entre las parabasales y lassuperficiales. Tienen contornos bien definidos y forma poligonal con bordesirregulares, ovales a redondeados y doblados. Su núcleo es más pequeño yvesiculado con mayor cantidad de citoplasma. Se presentan en el proestro ydiestro.Las células intermedias, bajo la influencia hormonal de progesterona, puedensufrir cambios morfológicos y reciben el nombre de: Células naviculares: Son alargadas con forma de bote o barco. Tienen importancia en la citología de hembras preñadas donde además tienen gran cantidad de glucógeno. Células de metaestro o espumosas: Son células intermedias que pueden tener en su citoplasma vacuolas o leucocitos polimorfonucleares.Células superficialesProvienen de la capa madura más externa del epitelio escamoso estratificado.Son células muertas, sin irrigación, se observan solas, tienen forma poligonalcon bordes citoplasmáticos angulosos y doblados. Su citoplasma es delgado,traslúcido, sin vacuolas. La relación núcleo citoplasma es de aproximadamente20:80. Su núcleo se encuentra en posición central, es muy pequeño y picnótico,propio de actividad estrogénica, por lo que estas células son observadasdurante el estro.En su citoplasma se pueden encontrar pequeños gránulos lipídico,perinucleares o periféricos, estrógeno-dependientes.Células anucleadas o escamas:Estas células están muertas debido al proceso de engrosamiento del epiteliovaginal en respuesta al aumento de las concentraciones séricas de losestrógenos y por lo tanto, carecen de núcleo, son células grandes, de bordesirregulares y angulosos. Representan la etapa final de la maduración delepitelio vaginal y por ende, son producto de un proceso que empezó con lascélulas parabasales, redondas y saludables.Células endocervicalesSon células cilíndricas, ciliadas, con citoplasma finamente vacuolado; núcleobasal, y uno o dos nucleolos pequeños. Se pueden ver aisladas o en grupos.Suelen verse en los frotis de procesos inflamatorios, de metaplasia y displasia yen atrofias.
  5. 5. CiliocitoforiaTipo de muerte celular que se presenta en las células cilíndricas. La célulapierde citoplasma y el núcleo se desplaza hacia el borde apical, hasta quedar ala orilla, debajo de la placa ciliar.Células de reservaSe localizan sobre la membrana basal, debajo de las células basales delepitelio estratificado plano no queratinizado de la vagina o del epitelio cilíndricociliado endocervical.Su función es diferenciarse en células basales o cilíndricas, según el tipo deepitelio al que van a sustituir debido a la descamación normal o a algúnproceso patológico. Cuando se encuentran aisladas pueden confundirse conmacrófagos o células endometriales.Células endometrialesSe pueden obtener mediante lavado endometrial. En los frotis aparecenaisladas o en grupos que semejan un panal de abejas. Son cilíndricas, ciliadas,y más pequeñas que las endocervicales. Tienen núcleo redondo y citoplasmafino y transparente. Su presencia en los frotis sugiere alguna patologíaendometrial, excepto si fueron tomadas en el periodo de posparto.Existen algunas células no epiteliales que se pueden encontrar normalmenteen los frotis vaginales. Leucocitos Macrófagos Eosinófilos EspermatozoidesPolimorfonuclearesEs normal verlos, en pequeñas cantidades, en un frotis vaginal. Cuando sonabundantes Indican un proceso Inflamatorio.MacrófagosSon redondos de tamaño variable, núcleo central o periférico redondo oarriñonado, con uno o más nucléolos, dependiendo de su reactividad. Sucitoplasma es abundante, de apariencia esponjosa y puede tener materialfagocitado.¿Para qué sirve la CVE?1. Para detectar el ciclo estralMuchas perras son remitidas a la clínica veterinaria por problemas parareproducirse, pero hay que tener presente que la esterilidad en esta especie sedebe, con mucha frecuencia, a un manejo inadecuado de la monta, más que auna incapacidad para concebir. La principal dificultad a la que el médicoveterinario se enfrenta es a la considerable variación del ciclo reproductivo
  6. 6. canino. Muchas veces dicha variación es interpretada, por el clínico o elcriador, como anormalidad, por lo que el médico debe ser capaz de distinguirentre las perras que tienen un ciclo estral normal con patrones inesperados ylas que tienen alteraciones.Como se mencionó con anterioridad, la CVE es una de las herramientas quepuede ayudar a predecir las variaciones en el ciclo estral y de esta maneraminimizarlas. La nomenclatura de las células del epitelio vaginal se basa en lasalteraciones que experimentan como resultado de la mayor concentraciónsérica de estrógenos durante el proestro y el estro, lo que da como resultado elengrosamiento de la cubierta vaginal. De esta forma, las células de la luzvaginal (parabasales), se alejan más de su aporte sanguíneo hasta convertirseen células anucleadas o escamas.Antes de proceder a realizar una CVE es necesario contar con una correctaanamnesis, como: examen físico, tipo de alimentación, fecha del último estro,datos de monta, si tiene o no ha tenido alguna terapia hormonal, etc.Con el fin de observar los cambios en el patrón celular del ciclo estral, o bien,qué efecto hormonal predomina en las citologías, es necesario realizarmuestras seriadas con un intervalo de 2-3 días. La valoración del ciclo conuna sola muestra tiene un valor muy relativo.En la perra las etapas del ciclo estral son: Proestro: Dura de 3 a 21 días Estro: Dura de 3 a 21 días Diestro: 50-60 días Anestro: Dura de 100-150 díasProestroEn esta etapa las concentraciones de los estrógenos ejercen efecto sobre lavasculatura endometrial y ocasionan la salida de eritrocitos por diapédesis dedichos vasos, lo que provoca la presencia de eritrocitos.Al principio del proestro las principales células presentes son las parabasales yalgunas intermedias. Conforme pasan los días, las células intermedias gananterreno. Los neutrófilos son frecuentes, en número variable, y puede haberbacterias. Ambos van disminuyendo conforme avanza el proestro y se acercael estro. El fondo de la muestra se observa sucio debido a la presencia democo cervical y vaginal.EstroLas células que predominan, hasta en 90%, son las superficiales y anucleadas;el 10% restante puede ser una combinación de superficiales e intermedias. Loseritrocitos pueden disminuir, pero en algunas perras estarán presentes durantetodo el estro.DiestroEn esta fase se alcanzan los niveles máximos de progesterona, por lo tanto enlas muestras tomadas al principio del diestro existe un predominio de célulasintermedias. Conforme avanza esta etapa se pueden observar mayor númerode células parabasales. Algunos autores sugieren que también se observancélulas de metaestro (intermedia o parabasal con neutrófilos en su interior) ycélulas espumosas (con citoplasma espumoso).
  7. 7. AnestroSe considera que en esta etapa, la influencia hormonal es mínima, por lo tanto,las células que suelen observarse son las basales, pero también existenparabasales e intermedias en pequeñas cantidades.2. Para detectar una gestación normalEs importante mencionar que el uso de la CVE en estos casos, aún seencuentra en procesos de investigación. Su fundamento es el siguiente: loscambios hormonales de la preñez también ejercen efecto sobre el epiteliovaginal, las células que predominan son las intermedias, la mayoría agrupadasy con depósitos de glicógeno en su citoplasma. También se observan célulasnaviculares, (intermedias con forma como de bote o de barco). Estas célulaspueden verse también en la etapa de diestro, por el efecto de la progesterona,sin embargo, en preñez sus bordes son más reforzados, el núcleo se encuentraen la periferia de la célula y forman grupos compactos. Otro hallazgoobservado es la presencia de moco en el fondo de la laminilla.3. Para diagnosticar un abortoEn los casos de aborto, se observan células trofoblasticas. Son grandes convarios núcleos de cromatina. Es importante conocerlas ya que son muysimilares a las que se encuentran en el coriocarcinoma. Pueden confundirsecon las células multinucleadas que se presentan en el herpes simple.4. Para establecer un diagnóstico de quistes folicularesEl quiste folicular ovárico no ovulatorio tiene mayor tamaño que un folículopreovulatorio normal, es decir mide de 1 a 5 cm de diámetro, sintetiza y secretaestrógenos y se presentan con mayor frecuencia en perras menores de tresaños.Los signos clínicos que se observan son: sangrado vaginal persistente, mayora 28 días y atracción del macho. La CVE muestra 80 a 90% de célulassuperficiales, lo que indica un proestro o estro prolongado.La causa de su presencia puede ser la aplicación prolongada de estrógenosexógenos como terapia anticonceptiva.El tratamiento puede ser médico o quirúrgico. El primero consiste en laaplicación de GnRH (50-100μg/perra), cada 24 horas, durante tres días. Elsegundo es la ovariohisterectomía (OVH).5. Para determinar la presencia de quistes luteinizadosEste tipo de quistes se caracteriza por producir altas cantidades deprogesterona (>2-5 ng/ml), lo que causa un diestro prolongado y lasubsiguiente ausencia de estro. En la citología se observan célulasparabasales principalmente e intermedias en menor cantidad. El diagnóstico seconfirma por la hiperprogesteronemia. El tratamiento de elección es la OVH yaque esta alteración puede ser un preámbulo para la presentación de hiperplasiaendometrial quística-piómetra.6. Cuando se sospecha de hiperplasia endometrial quística-piómetraEsta enfermedad es típica de perras mayores de 6 años, cuando se presentaen jóvenes puede ser posterior al tratamiento con progetágenos o estrógenos.
  8. 8. La hiperplasia endometrial quística (HEQ) en la perra es una afecciónprogestágeno-dependiente debido a la alta sensibilidad del útero, de ciertasperras, a esta hormona. La progesterona induce la proliferación y secreciónglandular del endometrio, suprime la actividad miometrial y por lo tanto facilitala acumulación de las secreciones producidas e inhibe la respuestaleucocitaria. Los cambios glandulares pueden ser locales o difusos y, enconsecuencia, interferir en la implantación y placentación. Una HEQ puedeconllevar a piómetra.La piómetra es una enfermedad caracterizada por la acumulación de pus en elútero. Ésta es producida por la colonización bacteriana de E. coli, Proteus,Klebsiella, Mycolasma, Staphylococcus, Streptococcus, etc. proveniente de lavagina y que por vía ascendente se aloja en el endometrio, el cual previamenteha sufrido cambios patológicos debidos a la sobre estimulación de laprogesterona. Estos eventos crean un ambiente que favorece la rápidamultiplicación de los microorganismos.Un punto clave, importante para ser tomado en cuenta es que esta alteraciónse presenta generalmente a los 60-70 días después de finalizado el estro, porlo que su presentación está íntimamente ligada al ciclo estral.La CVE puede ser una de las herramientas para el diagnóstico, sobre todo enpiómetras a cuello abierto, en las que se observan células parabasalesendocervicales y gran cantidad de neutrófilos; mientras que, en las de cuellocerrado sólo se observan células parabasales y endocervicales. El diagnósticodefinitivo, tanto de la HEQ, como de la piómetra, es por medio de un estudioecográfico con el fin de evaluar las estructuras de la pared uterina y sucontenido, a lo largo del tiempo.El tratamiento de elección es la esterilización, pero también se puede intentar eltratamiento médico, consistente en la aplicación de prostaglandinas F 2α (0.1mg/kg, SC, cada 12 horas, dos días; luego 0.2 mg/kg, SC, cada 12 horas hastasu efecto.7. Para determinar la presencia de una vaginitisAlgunas bacterias que producen alteraciones reproductivas pueden formarparte de la flora normal de la vagina. Durante el proestro y el estro estosmicroorganismos pueden llegar al útero a través del cérvix que se encuentrarelajado en estas etapas del ciclo estral.Existen dos tipos de vaginitis: Prepuberal: Afecta más a cachorras de razas grandes. Se manifiesta como una secreción vulvar de aspecto mucopurulento. Regularmente se presenta varias semanas antes del primer ciclo estral. A pesar de su aspecto, está compuesta en su mayoría por descamación epitelial y se corrige sin tratamiento una vez que la perra entra en celo. Adulta: Es de tipo bacteriano. Los signos clínicos incluyen inflamación de la mucosa vaginal; el animal se lame con frecuencia, hay descarga purulenta y atracción del macho.La CVE de una perra con vaginitis muestra un gran número de neutrófilos ybacterias. El inicio del diestro puede vincularse de manera transitoria, congrandes cantidades de bacterias y neutrófilos, pero su persistencia supone unavaginitis.
  9. 9. El tratamiento médico puede ser local, mediante lavados con solucionesantisépticas y de óvulos antibióticos, durante 15-20 días. También se puede dartratamiento parenteral con trimetoprima, eritromicina, gentamicina, etc.8. Para establecer un diagnóstico de tumor venéreo transmisibleEl tumor más frecuente de la vagina de la perra es el tumor venéreotransmisible (TVT). Desde el momento del contagio, hasta la presentación delos primeros síntomas detectables transcurren entre 45 y 60 días. La hembrapresenta secreción sanguinolenta, prurito y lamido vulvar. El tumor comienzacon la presencia de pequeños nódulos blanco-rosados de 1-3 mm, muyfriables. Conforme se desarrolla se exterioriza a través de la abertura vulvar.El diagnóstico debe incluir una cuidadosa anamnesis y la CVE en la que seobservan células redondeadas, con leve pleomorfismo celular, citiplasmaespumoso y núcleo grande que abarca la mayor parte del citoplasma, concromatina densa. Todas las anteriores son características de una célulaneoplásica.El tratamiento puede ser quirúrgico, cuando lo tumores son pequeños ylocalizados, pero lo más recomendable es la quimioterapia con 0.025 mg/kg devincristina, sin exceder nunca de 1 mg como dosis máxima, por vía IV cadasiete días. 2-7 aplicaciones. También se recomienda la combinación devincristina, ciclofosfamida y metotrexato.
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