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Bordetella pertussis

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Published in: Health & Medicine, Technology
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Bordetella pertussis

  1. 1. Bordetella pertussis <ul><li>Algo de Historia : Tos ferina padecimiento descrito a finales del siglo XVI. </li></ul><ul><li>Aislamiento: 1906-Bordet-Gengou (B.pertussis ) (B parapertussis)( B bronchiseptica) Total 7 especie.Homolgia del ADN </li></ul><ul><li>Genero Bordetella </li></ul><ul><li>Familia Brucellaceae </li></ul><ul><li>Vocablo Latino: per=completamente; tussis=tos </li></ul><ul><li>El genoma ha sido secuenciado y posee 4.086.186 Pb-3816 genes y 358 pseudogenes con 3 secuencia de inserción con varias copias ISI 1481-238C-IS1002.1673 IC, esto demuestra gran plasticidad genética </li></ul>
  2. 2. CARACTERES FENOTIPICOS <ul><li>Cocobacilos gram.negativos </li></ul><ul><li>Tamaño 0,3 a 0,5 u x 05,a 1,5u </li></ul><ul><li>Inmoviles (sin flagelos)(si bronchiseptica) </li></ul><ul><li>Capsulados en fase I </li></ul><ul><li>Poseen fimbrias </li></ul><ul><li>No forman esporas </li></ul><ul><li>Intracelulares </li></ul><ul><li>Aerobios y Anaerobios facultativos </li></ul><ul><li>Catalasa positiva </li></ul><ul><li>Oxidasa positiva </li></ul><ul><li>BGNNF </li></ul><ul><li>Temperatura de crecimiento (35 a 37º) y pH:7,6,suceptibles a cambios ambientales (vive poco fuera de las mucosas) </li></ul>
  3. 4. FACTORES DE VIRULENCIA <ul><li>ADHESINAS </li></ul><ul><li>Hemoaglutinina filamentosa (FHA): permite la adherencia </li></ul><ul><li>Pertactina (Pe): adhesina especifica </li></ul><ul><li>Hemoaglutinina de toxina pertussis (TOX-HA) </li></ul><ul><li>TOXINAS </li></ul><ul><li>Toxina pertussis :inhibe la síntesis de ADN ,altera el AMPc que junto con al adenilciclasa conduce a la excreción masiva de líquidos,estimula liberacion de linfocito T y B de MO y bazo y se expresa con LINFOCITOSIS y lisis de Macrófagos </li></ul><ul><li>Citotoxina traqueal (TCT):parálisis de los cilios </li></ul><ul><li>Toxina adenilciclasa : sensibiliza a la histamina </li></ul><ul><li>T oxina dermonecrosante :produce la paralisis de los cilios </li></ul><ul><li>Citotoxina traqueal : Muerte celular y se asocia a síntomas sistémicos </li></ul>
  4. 6. PATOGENIA <ul><li>Ninguna de estas especie tienen vida libre, solo la vamos a encontrar PARASITANDO ,las mucosas de las vìa respiratorias </li></ul><ul><li>Vía aérea superior </li></ul><ul><li>Bacilos Nasofaringe (Cuadro catarral) </li></ul><ul><li>Traquea y bronquios Colonizan mucosa y producen necrosis de </li></ul><ul><li>células ciliadas del epitelio Intensidad de la Tos </li></ul><ul><li>Parénquima Pulmonar = Pneumonitis Interticial </li></ul><ul><li>En resumen: Patogeno humano estricto con tropismo por EBC, con adherencia </li></ul><ul><li>a los cilios, mediada por sus factores de virulencia (Fha,pertactina,toxina pertusi </li></ul><ul><li>(PT),adhesinas,inmovilizan los cilios destruyendo las células ciliadas por la citotoxina traqueal, provocando la TOS PERSISTENTE, ósea es la expresión clínica. </li></ul>
  5. 7. DIAGNOSTICO <ul><li>Cultivo : Medio de Bordet-Gengou.(20% sangre)+agregado de C+Cefalosporinas de 1º. </li></ul><ul><li>otro medio es :Regan Lowe </li></ul><ul><li>Muestra : Aspirado nasofaringeo o Hisopado </li></ul><ul><li>Incubación: 48 Hs a 7 días </li></ul><ul><li>Temp : 35º+At hùmeda </li></ul><ul><li>Aspecto de las colonias : 1 a 2 mm redondas, semi-transparentes,brillantes, gotas de aceite, o gotas de mercurio </li></ul><ul><li>Identificación: Oxidasa-Urea-Catalasa+PB para BGNNF. </li></ul><ul><li>Confirmación : Antisueros especìficos. </li></ul><ul><li>El momento mas adecuado es en la etapa catarral y fase temprana paroxística por el FACTOR INOCULO. </li></ul>
  6. 9. CULTIVO MEDIOS SELECTIVOS DE BORDET-GENGOU Colonias pequeñas brillantes, que generalmente aparecen entre las 72 Hs a los 7 días
  7. 10. IDENTIFICACION BIOQUIMICA
  8. 11. <ul><li>Anticuerpos Fluorescente : Detecta Ag bacterianos, O (pared ); K(capsula) y proteico de las fimbrias. </li></ul><ul><li>Se realiza un frotis del exudado o secreción que contienen los Ag y se cubren con Ac poli o monoclonales fluorescente y se observan por microscopia. </li></ul><ul><li>Es una técnica “Operador dependiente ”con baja sensibilidad y mayor especificidad </li></ul><ul><li>Serologia: Detección de Ac IgG. Contra PT, pertactina y pili LA MUESTRA ES SUERO , hacer pareados </li></ul><ul><li>Detección Molecular (PCR): Muy rápida de alta sensibilidad y especificidad . Se basa en la amplificación del ADN,en zonas blancos de secuencias altamente repetidas ISI-481 -una secuencia promotora de la toxina pertussis, el gen de la adelinato ciclasa y parte del gen de una porina </li></ul>
  9. 12. PCR-FUNDAMENTO <ul><li>El proceso de detección de un agente infeccioso por amplificación genetica se desarrolla de manera habitual en </li></ul><ul><li>tres etapas. </li></ul><ul><li>PRIMERO : Consiste en la extracción y purificación </li></ul><ul><li>de los ácidos nucleicos del microorganismo de la </li></ul><ul><li>muestra biológica. </li></ul><ul><li>SEGUNDO :Amplificación de un segmento seleccionado del genoma del microorganismo mediante reacción en cadena de la polimerasa, es decir, la PCR propiamente dicha. </li></ul><ul><li>TERCERO :Se lleva a cabo la detección de los fragmentos amplificados (amplicones) por electroforesis en gel de </li></ul><ul><li>agarosa y tinción con bromuro de etidio, o mediante hibridación </li></ul><ul><li>con sondas específicas. </li></ul><ul><li>En general todo este proceso suele durar aproximadamente 24 horas . </li></ul>
  10. 13. PCR Renispora sp. 2 PARES DE PRIMERS (Ag M) M Dna Hc. M Hc Hc ? ? ? H 2 O EXTRACCIÓN DE ADN
  11. 14. PCR en muestras de sangre 2A 1A 2B 1B Casero Kit EXTRACCIÓN DE ADN 391 bp 210 bp PCR ANIDADA
  12. 15. ALGORITMO <ul><li>Muestra del Contacto </li></ul><ul><li>Paciente </li></ul><ul><li>Serologia PCR y Cultivo </li></ul><ul><li>ELISA-Aglutinación 7 A 14 días ideal y < a 20 </li></ul><ul><li>15/20 días del inicio de los síntomas Aspirado Nasofaringeo con sonda K10- </li></ul><ul><li>Muestras pareadas Hisopado nasal ambas narinas,con dacron </li></ul><ul><li>Diferencia de 21 dia de la 1ª/2ª NO ALGODÓN . Mas de 2 Hs,colocar SF </li></ul><ul><li>Conservar a 4º / 8º No congelar </li></ul>
  13. 16. GRACIAS !!

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