Fijación

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Fijacion Histotecnologia tiempos, tipos de fijacion, fijadores ideales,

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Fijación

  1. 1. Fijación<br />Histotecnología II<br />
  2. 2. FIJACIÓN<br />CONCEPTO:Se entiende por fijación toda manipulación sobre un ser vivo, o bien sobre parte de él, que tiene por objeto mantener toda su arquitectura tanto estructural como química lo más inalterada posible, de tal forma que sus componentes celulares mantengan las mismas características que cuando dicho ser o tejido estaban vivos.<br /> La fijación termina cualquier reacción bioquímica en curso, y puede también aumentar la fuerza o la estabilidad mecánica de los tejidos finos tratados.<br />
  3. 3. FIJACIÓN<br /><ul><li>Interrumpir los procesos de degradación que aparecen tras la muerte celular
  4. 4. Tratando de conservar la arquitectura y composición tisular
  5. 5. Lo más próxima posible a como se encontraba en el organismo vivo.</li></li></ul><li>FIJACIÓN<br />Muerte: es el nivel metabólico a partir del cual las células que componen esos organismos, no son capaces de recuperar las funciones vitales que le son propias <br />Autólisis: autodigestión enzimática celular, debido a la salida del contenido lisosómico al citoplasma<br />Putrefacción: efecto ejercido por toxinas y enzimas bacterianas sobre los tejidos (microorganismos de tipo saprófitos)<br />AUTÓLISIS<br />BACTERIAS<br />
  6. 6. FACTORES DE LA AUTÓLISIS <br />Y PUTREFACCIÓN<br /><ul><li>Localización y naturaleza del tejido
  7. 7. Temperatura del ambiente </li></ul>PANCREAS<br />TERMÓMETRO<br />INTESTINO GRUESO<br />
  8. 8. FIJACIÓN<br />Objetivo de la técnica histológica es conseguir la mayor similitud posible entre la imagen real y la imagen equivalente<br />IMAGEN HISTOLÓGICA REAL: es la que tiene el tejido cuando aun se encuentra vivo<br />IMAGEN HISTOLÓGICA EQUIVALENTE: es la obtenida después de la manipulación histológica que comprende la fijación, inclusión, corte y coloración.<br />Trompa de Falopio<br />
  9. 9. CONDICIONES DE LA IMAGEN EQUIVALENTE<br />CONSTANCIA: ha de observarse en todos los tejidos idénticos obtenidos de distintos individuos de una misma especie animal <br />REPRODUCTIBILIDAD: en todas las preparaciones histológicas obtenidas a partir de dichos tejidos, independientemente del proceso de fijación empleado<br /><ul><li> Las imágenes que no cumplen con los requisitos de constancia y reproductibilidad deben considerarse artefactos inducidos a lo largo de procesamiento histológico y cambian de una preparación a otra. </li></li></ul><li>ARTEFACTOS DE LA FIJACIÓN<br /><ul><li>DESGARROS
  10. 10. RETRACCIONES
  11. 11. Diferencia entre la presión osmótica del fijador y la de los tejidos</li></ul>In vivo el espacio de Bowman es más estrecho de lo que se ve en los cortes procesados de manera convencional. (H&E, X300).<br />
  12. 12. PROPÓSITO DE LA FIJACIÓN<br /><ul><li>Evitar la autolisis debida a las propias enzimas.
  13. 13. Proteger el corte o la pieza del ataque bacteriano.
  14. 14. Insolubilizar los componentes celulares que se desean estudiar.
  15. 15. Preparar a las distintas estructuras para posteriores tratamientos.
  16. 16. Evitar la disolución de determinados compuestos en el fijador.
  17. 17. Conservar o provocar determinadas reacciones químicas.
  18. 18. Mantener las propiedades físicas.</li></li></ul><li>PRINCIPIOS GENERALES DE LA FIJACIÓN<br /><ul><li>No existe un método universal de fijación
  19. 19. No todos los fijadores conservan indefinidamente los tejidos
  20. 20. Un defecto de la fijación jamás puede ser corregido
  21. 21. Es imposible realizar un estudio histológico sobre un material con defectos de fijación</li></li></ul><li>CUALIDADES DE UN FIJADOR<br /><ul><li>Capacidad de bloquear la autólisis inmediatamente
  22. 22. Poseer un efecto microbicida.
  23. 23. Impedir la generación de estructuras artificiales (artificios y artefactos)
  24. 24. No generar retracción excesiva de los tejidos ni volverlos friables o quebradizos
  25. 25. Permitir o favorecer la aplicación de técnicas histológicas ,histoquímicas o inmuno-histoquímicas específicas.  
  26. 26. Ser económico, estable, con baja toxicidad y de fácil manejo
  27. 27. Que posea una gran velocidad de penetración</li></li></ul><li>TIPOS DE FIJACIÓN<br />FIJACION HISTOLÓGICA O CITOLÓGICA: conservación de la arquitectura y estructura de los tejidos y células<br />FIJACIÓN HISTOQUÍMICA: conservación de la composición molecular y bioquímica de los tejidos<br />FIJACIÓN PRIMARIA: la que se realiza de forma inmediata sobre el tejido fresco<br />FIJACIÓN SECUNDARIA O REFIJACIÓN: consiste en colocar el tejido ya fijado en un segundo fijador para demostrar algún componente tisular específico o simplemente para intensificar la fijación inicial<br />
  28. 28. Principios de la fijación<br />La fijación consiste en conservar un tejido lo más parecido posible a sus condiciones normales para ello es necesario:<br /><ul><li>Protegerlo del ataque bacteriano
  29. 29. Evitar su autólisis
  30. 30. Insolubilizar los constituyentes celulares
  31. 31. Evitar las distorsiones y retracciones
  32. 32. Preparar las estructuras para posteriores tratamientos</li></li></ul><li>REGLAS GENERALES A CONSIDERAR<br />EN EL EMPLEO DE FIJADORES<br /><ul><li>Rapidez al colocar el líquido fijador
  33. 33. El tejido debe estar seccionado en láminas de 5mm
  34. 34. La relación del fijador es de 1/20
  35. 35. La presión osmótica del fijador y de la pieza deben ser lo más parecidas al suero fisiológico
  36. 36. El pH debe ser igual al suero fisiológico
  37. 37. El tiempo específico de cada fijador</li></li></ul><li>CARACTERÍSTICAS DE LOS FIJADORES <br /><ul><li>Velocidad de penetración
  38. 38. Velocidad de fijación
  39. 39. Coeficiente de endurecimiento
  40. 40. Efecto de retracción
  41. 41. Osmosis y pH
  42. 42. Efecto mordiente
  43. 43. Artefactos </li></li></ul><li>MÉTODOS DE FIJACIÓN<br /><ul><li>Criodesecación
  44. 44. Criosustitución </li></ul>FÍSICOS:<br /><ul><li>El tipo de muestra lo requiere
  45. 45. Los fijadores químicos alteran las estructuras que queremos observar
  46. 46. Necesitamos una fijación rápida
  47. 47. CONGELACION
  48. 48. CALOR</li></ul>FIJACIÓN POR INMERSIÓN<br />QUÍMICOS:<br />utilizan soluciones acuosas compuestas por moléculas fijadoras que establecen puentes entre las moléculas celulares, manteniéndolas en sus lugares originales e impidiendo su degradación<br /><ul><li>INMERSIÓN
  49. 49. PERFUSIÓN</li></ul>FIJACIÓN POR PERFUSIÓN<br />

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