Hongos entomopatógenos

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Curso de Producción de hongos entomopatogenos dictado en el IEST Huando

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Hongos entomopatógenos

  1. 1. PRODUCCION DE HONGOS ENTOMOPATOGENOS Ing. Yuri Calle CIP 54390 yurihcalle@hotmail.com 1
  2. 2. HONGOS ENTOMOPATÓGENOSQUE SON? Entomo = Insecto Pathos = enfermedad Micosis : Infección Obtienen su nutrición a partir de insectos. Se conocen aproximadamente 100 géneros de 700 especies. 2
  3. 3. ENTOMOPATOGENO:Son microorganismos que enfermana los insectos plagas.Pueden ser: Hongos, bacterias,virus, nematodos, etc. 3
  4. 4. Aplicación del control biológico: Existen 3 métodos de aplicación de los insectos benéficos para lograr las reducciones de las plagas:• Inundativo• Inoculativo• Conservación 4
  5. 5. HONGOS BENEFICOSIMPORTANTES EN EL PERU ENTOMOPATOGENOS Beuveria bassiana Beauveria brogniartii Paecilomyces fumosoroseus Lecanicillium lecanii Metarhizium anispliae Entomophthora virulenta Entomophtora muscae 5 5
  6. 6. HONGOS BENEFICOSIMPORTANTES EN EL PERU ANTAGONISTAS. Trichoderma harziamun Trichoderma viride T. virens T. stromaticum T. lignorum Gliocladium sp. NEMATOPATOGENOS Paecilomyces lilacinus Hirsutella sp Pochonia clamidosporium 6
  7. 7. Crecimiento de algunasespecies patógenos deinsectos .(a) Beauveria bassiana,(b) Metarhizium anisopliae,(c) Lecanicillium lecanii,(d) Entomophthora spp. (Zygomycota), este ultimo produce únicamente esporangios.
  8. 8. VENTAJAS DE ESTOS HONGOS 1. Presentan grados variables de especificidad, específicos a nivel de familia o especies muy relacionadas 2. Se reproduce y renueva en forma continua, es decir, se vuelve persistente. 3. Se pueden aplicar mezclas de hongos entomopatógenos con dosis sub letales de insecticidas para lograr efectos sinérgicos. 4. No contaminan el medio ambiente ni afectan al hombre 8
  9. 9. DESVENTAJAS DE ESTOS HONGOS 1. Sensibilidad a la variación de las condiciones climáticas 2. Requieren de condiciones de almacenamiento más exigentes que las moléculas inorgánicas. 3. En general, los insecticidas biológicos no matan instantáneamente. 9
  10. 10. CLASIFICACION DE LOSENTOMOPATOGENOS
  11. 11. CLASIFICACION DE LOSENTOMOPATOGENOS
  12. 12. CARACTERIZACION DE LOS HONGOSLa descripción y la caracterización de estos hongosse realiza a través de la morfología de sus distintasestructuras.ESTRUCTURAS DEREPRODUCCIONASEXUAL:-Conidias (Deuteromycetes)-Esporangios (Zygomycetes) Conidias Conidióforo Penicillium sp. Botrytis cinerea 12
  13. 13. Beauveria bassiana Hongo con micelio blanco, a la madurez se torna ligeramente crema a amarilla. Produce abundante esporulación, y también los conidios, fialides y conidióforos son blancos. El conidióforo puede ser simple o ramificado, de alli nace las celulas conidiogenas, las conidias se originan en forma simpodial, es decir en zig-zag. 13
  14. 14. Beauveria bassiana: origen de las células esporogenas, que se originanen sucesión acropetala. 14
  15. 15. Beauveria bassianaSu máxima capacidad de penetración e infección se vefavorecida a Tº de 20°C y HR mayor del 92%.
  16. 16. Parasitismo de Beauveria bassiana
  17. 17. Prueba en campoBeauveria bassiana
  18. 18. Prueba de patogenicidad por el entomopatógeno sobre Dagbertus sp. - 2009 Fuente: Soluciones agrosostenibles SAC.
  19. 19. Patogenicidad de Beauveriabassiana en Dagbertus sp.
  20. 20. Paecilomyces fumosoroseusColonias de color lila claro a marrón, desarrollorápido, con aspecto polvoriento y granular.Paeciliomyces sp. es un hongo moniliaceo, que sepropaga a través de estructuras de reproducciónasexual como son los conidios. Es un hongo común del ambiente que se encuentra parasitando e infectando a ciertos insectos . 20
  21. 21. Paecilomyces fumosoroseus: Parasita eficientemente mosca blanca en cultivos de tomate en invernadero. Controla eficazmente huevos, larvas y adultos de Trialeurodes vaporariorum, Bemisia tabaci y Aleroidicus dispersus
  22. 22. A: Paecilomyces elegans, B: P. fumosoroseus, C: P.bacilispora, D: P. terricola. 22
  23. 23. Paecilomyces fumosoroseusEl micelio tiene una coloración blanca liláceo,el conidióforo bien desarrollado, simple oramificado. En algunos especies la célulaconidiogena nace directamente de la hifa, y dalugar a las conidias.La producción de conidias es en cadena, concrecimiento basipetalo. 23
  24. 24. Paecilomyces fumosoroseusP. fumosoroseus ,es un hongo con alta capacidadde parasitar mosca blanca, especialmente Bemisiatabaci , Bemisia argentifolii y Aleurotrixus flocosus. Mosca blanca (Bemisia tabaci), infectado y muerto por el hongo entomopatogeno Paecilomyces 24
  25. 25. Mosca blanca (Bemisia tabaci), infectado y muerto por el hongo entomopatógeno Paecilomyces fumosoroseus hongo Alas de Bemisia tabaci 25
  26. 26. Mosca díptera, infectado y muerto por el hongo entomopatogeno Entomophthora sp.Entomophthora sp. 26
  27. 27. Metarhizium anisopliae 27
  28. 28. Metarhizium anisopliaePuede infectar estadios como huevos, ninfas,pupas y adultos).Las condiciones que favorecen para lapenetración e infección es entre 22 a 30° C yhumedad relativa de 75 al 100%Colonias de color verde olivo a oscuro, que varíandesde el oliváceo hasta verde amarillo o verdeoscuro. 28
  29. 29. Metarhizium anisopliaeConidioforo ramificado en forma alternada , conidiascilíndricas a ovales que se forman en cadenasoriginadas en fialides.Las conidias se originan a partir de las fialides consucesión basipétala, estando la conidia más joven enla base de la cadena.Las conidias son blancos cuando son jóvenes, peroconforme maduran toman el color verde oscurocaracterístico de esta especie. 29
  30. 30. Metarhizium anisopliaeLos insectos infectados por este hongopresentan un moho, color verde oscura. 30
  31. 31. Metarhizium anisopliaeAdultos de Metamasius hemipterus sericeus, infectados por el hongoMetarhizium anisopliae 31
  32. 32. Lecanicillium lecani afectando Pulgón 32
  33. 33. Pochonia chlamydosporiaEs un hongo con colonias color blanco, micelio sumergidoen cultivo in vitro. Al estado de madurez en placa conmedio PDA tiene aspecto de polvo. 33
  34. 34. MECANISMO DE INFECCION DEENTOMOPATOGENOS1. Adhesión y germinación de la espora en la cutícula del insecto.2. Penetración dentro del hemocele.3. Desarrollo del hongo que resulta en la muerte del insecto- 34
  35. 35. CICLO BIOLOGICO DEL ENTOMOPATOGENO 35
  36. 36. MECANISMO DE INFECCION DEENTOMOPATOGENOS 36
  37. 37. NEMATOPATOGENO 37
  38. 38. Trichoderma spp. Trichoderma es un hongo que pertenece a los ascomicetes su fase perfecta y los Deuteromycetes su fase asexual. En La mayoría de las especies, fase asexual se caracteriza por tener un color verde brillante o blanco amarillento por el conglomerado de conidios. Las colonias son al principio blancas y algodonosas. La estructura de multiplicación asexual son las conidia, cuyo color le da la tonalidad de colonia verde. La conidiogenesis en algunas especies son favorecidas con la luz azul . Bajo condiciones desfavorables de crecimiento, este hongo tiene la capacidad de formar clamidosporas a partir de su hifa.
  39. 39. HONGO TRICHODERMA VIRIDE 39
  40. 40. HONGO TRICHODERMA VIRIDE 40
  41. 41. MECANISMOS DE ACCIÓN•Competencia•Antibiosis•Micoparasitismo y lisis enzimática.•Inducción de resistenciaSegún Harman et al. el micoparasitismoes el principal mecanismo de acción deTrichoderma, sobre su hospedante. 41
  42. 42. AntibiosisTrichoderma actúa sobre su antagonistaproduciendo ciertos metabolitos como partede su metabolismo normal.Estos pueden ser como viridinas, gliotoxinas,etc, las cuales actúan directamente sobreotros organismos, para inhibir el crecimientoy desarrollo. 42
  43. 43. MicoparasitismoLuego de entrar en contacto la hifa deTrichoderma, esta ejerce una presión mecánicasobre la hifa del hospedante (patógeno).Luego hay una explosión metabólica alreconocimiento de su hospedante y da lugar a laproducción de enzimas quitinoliticas paradegradar las quitinas del hongo patógeno.Seguidamente hay mecanismos de absorción decontenido citoplasmático del patógeno porTrichoderma. 43
  44. 44. Micoparasitismo T= hifas de Trichoderma, R= hifas de R. solani 44
  45. 45. T R T= hifas de Trichoderma, R= hifas de R. solani
  46. 46. PRODUCCION DEENTOMOPATOGENOS Aspectos a tener en cuenta: (Soberanis, W. - SENASA)1. Selección cepa adecuada.2. Selección del medio de cultivo que permita obtener el máximo potencial patogénico del microorganismo.3. Producción tecnológica con bajo costo.4. Formulación que permita almacenar por períodos prolongados, facilidad de aplicación y estabilidad en condiciones de campo.
  47. 47. ETAPAS DE LA PRODUCCION DEENTOMOPATOGENOS1. Primera etapa: OBTENCION DE LA CEPA DE HONGO -Aislamiento del hongo en campo -Pruebas de patogenicidad2. Segunda etapa: MULTIPLICACION IN VITRO DE P. fumosoroseus. -Multiplicación en medio PDA -Multiplicación en frascos.3. Tercera etapa: PRODUCCION MASIVA DEL ENTOMOPATOGENO -Multiplicación en medio sustrato sólido4. Control de calidad del hongo formulado. -Concentración de conidias o esporas -Viabilidad de conidias o esporas -PurezaAplicación en campo del entomopatógeno
  48. 48. ESQUEMA DE LA PRODUCCION DEENTOMOPATOGENOS
  49. 49. Proceso de producción de Trichodermaspp. en sustrato sólido. Tesis para M Sc Yuri Calle.
  50. 50. 50
  51. 51. 51
  52. 52. PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE ANTAGONISTASSe puede realizar mediante cultivo o confrontaciondual, sin embargo es mas efectiva el método de lasplacas precolonizadas
  53. 53. METODO DE LAS PLACASPRECOLONIZADAS Fuente: Tesis MSc. Yuri Calle- UNALM 53
  54. 54. PRUEBA DE PATOGENICIDAD DETrichoderma spp. IN VITRO Crecimiento de Trichoderma viride A y Trichoderma sp. de Chincha B, sobre un aislamiento de R. solani procedente de Chincha. Tesis para M Sc Yuri Calle- UNALM 54
  55. 55. PRUEBA DE PATOGENICIDAD DETrichoderma spp. IN VITROCrecimiento de Trichoderma spp. : T. viride A, aislamiento Ca1 de Cañete B, Ch1 deChincha C, y T. harzianum D, sobre un aislamiento de R. solani procedente de ChinchaTesis para M Sc Yuri Calle- UNALM 55
  56. 56. PRUEBA DE PATOGENICIDAD DETrichoderma spp. EN CAMPO Daños en cuello y raíces en plántulas de algodón causado por R. solani. Testigo (control) A, Control químico B, Inmersión con Trichoderma sp. Ch1 C, Trichoderma viride + estiércol ovino D, Trichoderma sp. Ch1 + estiércol ovino E, Trichoderma sp. Ca1 + estiércol ovino F. Tesis para M Sc Yuri Calle- UNALM
  57. 57. CONCENTRACION DE CONIDIASCámara de Neubauer vista al microscopio (40X). 57
  58. 58. Buenas Prácticas de ProducciónLas Buenas Prácticas de Producción (BPP) son unaherramienta básica para la obtención de productosseguros que se centralizan en la asepsia y forma demanipulación. Microorganismos modificados genéticamente: alto riesgo - Microorganismos autóctonos: Menor riesgo - Microorganismos exóticos: riesgo variable 58
  59. 59. SEGURIDAD Y CUIDADOSLa bioseguridad es un conjunto de medidas yprocedimientos destinadas a proteger al operador , a lacomunidad y al ambiente, de los riesgos que entraña eltrabajo con estos agentes.El riesgo biológico : Es la probabilidad de que ocurraun daño sobre el personal del laboratorio, los animaleso el ambiente asociado a la producción, uso ymanipulación general de los agentes biológicos. 59
  60. 60. THANK YOUR…. 60

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