Maracadores Tumoral Gy Bm 2010 Pdf

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Maracadores Tumoral Gy Bm 2010 Pdf

  1. 1. MARCADORES TUMORALES GENETICA Y BIOLOGICA MOLECULAR ADRIANA MARIA GIL ZAPATA. Msc. CIENCIAS BASICAS BIOMEDICAS
  2. 2. MARCADORES TUMORALES Sustancia generalmente de carácter proteico producidas por tejidos tumorales. Lo ideal es que sean sensibles y capaces de detectar a los enfermos con cáncer, evitando los falsos negativos.
  3. 3. MARCADOR TUMORAL • Biomolecula o proceso biologico que puede ser medido y que es sintetizado o liberado por las celulas cancerosas como respuesta a un proceso tumoral maligno. • Marcado tumoral ideal: especificidad 100%: especifico del tumor. • Sensibilidad 100%: Dx etapas tempranas.
  4. 4. CONCEPTOS Son sustancias antigénicas que pueden ser dosables en tejidos, orina y sangre. Pueden elevarse en condiciones benignas. Algunos no son específicos de un tipo particular de cáncer. No se elevan en todos los portadores de cáncer
  5. 5. CONCEPTOS • Especialmente en etapas tempranas de la enfermedad • Los niveles se miden para programar la terapia y seguimiento • Su disminución es signo favorable del tratamiento • Control de recaída
  6. 6. INDICACIONES Screening: Muy pocos Diagnóstico: Frecuente en pacientes sintomáticos Evaluación de Tto médico quirúrgico: lo más usado
  7. 7. CLASIFICACIÓN MARCADORES TUMORALES SEGÚN SU ESTRUCTURA TIPO DE MARCADOR EJEMPLO Fosfatasa ácida, fosfatasa alcalina, ENZIMAS creatincinasa, deshidrogenasa láctica, enolasa neuroespecífica,… Gonadotropina coriónica humana, HORMONAS, catecolaminas (y metabolitos), NEUROTRANSMISORES Y SUS serotonina y ácido 5- METABOLITOS hidroxindolacético,… α-fetoproteína, antígeno carcinoembriónico, antígeno específico PROTEÍNAS de la próstata, ferritina, inmunoglobulinas, CA19-9, CA15-3,… RECEPTORES CELULARES Estrógeno y progesterona ÁCIDOS NUCLEICOS DNA
  8. 8. ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO (PSA) DIAGNÓSTICO: • Tacto rectal: • PSA • Biopsia: para determinar si una masa sospechosa es CA de próstata examinar microscópicamente una muestra del tejido tomado del área.
  9. 9. PSA CARACTERISTICAS: – Glucoproteina 28.4KDa. – células de acini prostático normal, hiperplasia y cáncer de prostata – valores de referencia: hasta 4 ng/ml
  10. 10. PSA INDICACIONES: – Screening CA. Prostata: PSA + Tacto rectal, Sensbilidad:96% – Diagnostico: • Hasta 4 ng/ml se considera normal • > 4 hasta 10 ng/ml Sospechoso ( Adenoma prostático ó prostatitis) • > 10 ng/ml Gran probabilidad de ser CA. Próstata – SEGUIMIENTO: • A las 6 semanas postquirúrgico se hace no detectable • aumento: recurrencia ó metastasis
  11. 11. PSA • 200.000 casos anuales. • Segundo cáncer más mortífero en hombres. • Aparece sobre los 60 años. • Normalmente se detecta cuando el tumor ya está muy avanzado y es de difícil curación. Si e detectase a tiempo, las posibilidades de sobrevivir son muy altas
  12. 12. TECNICAS INMUNOQUIMICAS • Técnicas de laboratorio que aplican las propiedades de la reacción antígeno- anti cuerpo para medir compuestos, enzimas entre otros. • ANTIGENO (Ag) Material que estimula la formación de anticuerpos. Es un Inmunógeno. Epitope.
  13. 13. TECNICAS INMUNOQUIMICAS ANTICUERPO (Ac) Proteínas tipo gamaglobulinas, formadas por dos cadenas pesadas y dos livianas. Cada cadena posee una región constante y una variable (le confiere el carácter único al Ac, por allí se une al Ag) Inmunoglobulinas (paratopo ) Hay 5 tipos: Ig M, Ig G, Ig A, Ig E, Ig D.
  14. 14. UNION ANTIGENO _ ANTICUERPO
  15. 15. TECNICAS INMUNOQUIMICAS REACCIONES AG - AC: La unión Ag-Ac es no covalente, intervienen fuerzas como: Atracción electrostática Fuerzas de Van der Waals Puentes de hidrógeno Interacciones hidrofóbicas
  16. 16. TECNICAS INMUNOQUIMICAS CARACTERISTICAS UNION AG-AC: La especificidad de la reacción es 100% Ag + Ac Ag - Ac a. Afinidad b. Heterogeneidad de la respuesta c. Avidez d. Reactividad cruzada Es Reversible Serologìa: el estudio de las reacciones Ag,Ac.
  17. 17. Caracteristicas unión Ag-Ac Afinidad Es la suma de todas las fuerzas atractivas y repulsivas entre un sitio de unión de ese anticuerpo y el correspondiente epitopo. Avidez Es la fuerza con la que el Ac multivalente se une a un Ag multivalente. Aunque depende de las afinidades individuales de cada uno de los determinantes individuales de ese antígeno, su valor es mucho mayor que la suma de afinidades.
  18. 18. CLASIFICACION DE LOS INMUNOENSAYOS La reacción Ag – Ac es indetectable in vitro. Requiere una segunda reacción o fase indicadora, que permite clasificarlas en: • Neutralización • Inmunoensayos de precipitación • Inmunoensayos por aglutinación • Fijación del complemento • Inmunonefelometría • Inmunoensayos: ELISA, RIA, etc.
  19. 19. ELISA
  20. 20. DETECCION PSA A ntígen os 1 + A n ticu erpos P rim er co m plejo A c-A g S up erficie só lida I I I + I 2 I I E xceso d e anticuerp os m arcados C o m p lejo "sandw ich " A c-A g-A c*
  21. 21. ELISA directo (ensayo ELISA simple de dos capas). Las placas ELISA se preparan recubriendo los pocillos con las soluciones en las que se sospecha se encuentra el antígeno. Se incuban con anticuerpos marcados. Indican la presencia de antígeno en la solución analizada ELISA indirecto: Las placas ELISA se preparan de una forma idéntica a la anterior. Los controles positivos y negativos son los mismos. El sistema de detección emplea dos anticuerpos : uno primario contra el antígeno, y uno secundario marcado contra el primario
  22. 22. ELISA sandwich (ensayo de captura de antígeno y detección mediante inmunocomplejos). el pocillo con un primer anticuerpo anti-antígeno se lava el exceso de anticuerpo, se aplica la muestra donde se encuentra el antígeno, que será retenido en el pocillo al ser reconocido por el primer anticuerpo. Después de un segundo lavado se elimina el material no retenido se aplica una solución con un segundo anticuerpo anti-antígeno marcado. Cada molécula de antígeno estará unida a un anticuerpo en la base y un segundo anticuerpo, que lo marca. Este ensayo tiene una gran especificidad y sensibilidad debido a la amplificación de señal que permite el segundo anticuerpo.
  23. 23. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Sandwich ELISA Antigen Test Adapted from Kuby Immunology, 4th Edition
  24. 24. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Sandwich ELISA Antigen Test Add Specimen Adapted from Kuby Immunology, 4th Edition
  25. 25. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Sandwich ELISA Antigen Test Add Specimen Adapted from Kuby Immunology, 4th Edition
  26. 26. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Sandwich ELISA Antigen Test Add Specimen Containing Ag Adapted from Kuby Immunology, 4th Edition
  27. 27. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Indirect ELISA Antibody Test (Specimen) Adapted from Kuby Immunology, 4th Edition
  28. 28. Daría todo lo que sé, por la mitad de lo que ignoro. René Descartes

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