Resultados Finales Agosto-Diciembre 2008!!!

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Resultados Finales Agosto-Diciembre 2008!!!

  1. 1. Resultados de Monitoreo a Biblioteca Metagenómica de 160 clones
  2. 2. Producción Antibióticos # Prueba Observaciones 1 <ul><li>No se observó halo de inhibición alrededor de las colonias. </li></ul><ul><li>Hubo problemas al vertir el top agar por lo que afectó las colonias. </li></ul>2 <ul><li>Crecimiento de colonias, aunque no se observó halo de inhibición </li></ul>Actividad Amilasa # Prueba Observaciones 1 <ul><li>No hubo crecimiento de colonia s. </li></ul>2 <ul><li>Crecimiento de colonias. </li></ul><ul><li>Al añadirle el iodo no se observó el color anaranjado en las colonias . </li></ul>
  3. 3. Actividad Esterasa # Prueba Observaciones 1 <ul><li>Crecimiento de colonias con halo alrededor de todas. </li></ul>2 <ul><li>Se observó nuevamente halo alrededor de todas las colonias. Hay que determinar si la actividad proviene de E.coli. </li></ul>Actividad Quitinasa # Prueba Observaciones 1 <ul><li>Poco crecimiento de colonias. </li></ul><ul><li>No se observó halo. </li></ul>2 <ul><li>No hubo crecimiento de colonias (al cambiar medio de cultivo) </li></ul>
  4. 4. Resultados de Monitoreo a Bibliotecas Metagenómicas de 14,000 y 600,000 clones
  5. 5. Datos Generales <ul><li>Tamaño bibliotecas metagenómicas </li></ul><ul><ul><ul><li>Rainy Bottom- 14,000 clones. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Dry One- 600,000 clones. </li></ul></ul></ul><ul><li>Dilución </li></ul><ul><ul><li>10 -4 </li></ul></ul><ul><ul><li>Aproximadamente 80-100 colonias por plato para dry one. </li></ul></ul><ul><ul><li>Aproximadamente 50-60 colonias para rainy bottom. </li></ul></ul><ul><li>10 platos por cada prueba </li></ul><ul><ul><li>Las pruebas se le realizaron a cada biblioteca. </li></ul></ul>
  6. 6. Producción Antibióticos # Prueba Observaciones 1 <ul><li>No se observó ningún halo de inhibición. </li></ul><ul><li>Células contaminadas. </li></ul>2 <ul><li>No hubo halo de inhibición alrededor de los clones. </li></ul>Actividad Proteolítica # Prueba Observaciones 1 <ul><li>Platos no estaban bien diluidos. </li></ul><ul><li>No se observaron colonias individuales. </li></ul>2 No fue observada actividad enzimática alguna. 3 <ul><li>No se observó halo alrededor de ninguna de las colonias. </li></ul>
  7. 7. Actividad Amilasa # Prueba Observaciones 1 <ul><li>Demasiado crecimiento por lo que no se pudo observar colonias individuales. </li></ul>2 <ul><li>No fue observada la actividad enzimática. </li></ul>3 <ul><li>Clones se tornaron color marrón pero no fue observado el color anaranjado indicativo de la actividad enzimática. </li></ul>
  8. 8. Clones no produjeron actividad antimicrobiana <ul><li>No se observó ningún halo de inhibición alrededor de las colonias. </li></ul>
  9. 9. Clones no produjeron actividad proteolíca <ul><li>Dry one </li></ul><ul><li>Rainy bottom </li></ul>
  10. 10. Ambas bibliotecas no produjeron actividad para degradar azúcares <ul><li>Crecimiento clones en medio almidón </li></ul>Dry One Rainy Bottom <ul><li>Crecimiento clones en medio almidón </li></ul><ul><li>Clones con iodo </li></ul><ul><li>Clones color </li></ul><ul><li>marrón </li></ul><ul><li>Clones con iodo </li></ul><ul><li>Clones color </li></ul><ul><li>marrón </li></ul>
  11. 11. Pruebas E.coli EPI 300
  12. 12. Datos Generales <ul><li>Las pruebas para determinar actividad enzimática tambien fueron realizadas en E.coli EPI 300. </li></ul><ul><ul><ul><li>E. coli EPI 300 – cepa utilizada como organismo portador del inserto en las bibliotecas metagenómicas. </li></ul></ul></ul><ul><li>Pruebas realizadas: </li></ul><ul><ul><ul><li>Actividad proteolítica </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Producción enzima amilasa </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Producción enzima esterasa </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><ul><li>Cada prueba se realizó en triplicado. </li></ul></ul></ul></ul></ul>
  13. 13. E. coli Epi 300 Prueba Observaciones Proteasa <ul><li>Crecimiento de la bacteria en el medio. </li></ul><ul><li>No se observó halo alrededor de la bacteria, lo cual indica que no es capaz de degradar proteínas. </li></ul><ul><li>Proteasa negativo. </li></ul>Amilasa <ul><li>Crecimiento de la bacteria en medio. </li></ul><ul><li>No hubo cambio de color al añadirle iodo, por lo que esta cepa no tiene la capacidad de hidrolizar glucosa y glucógeno en azúcares más simples </li></ul><ul><li>Amilasa negativo. </li></ul>Esterasa <ul><li>Crecimiento de la bacteria en el medio. </li></ul><ul><li>Se observó un halo alrededor de todo el estriado indicativo de la degradación de ésteres. </li></ul><ul><li>Esterasa positivo. </li></ul>
  14. 14. Producción de la enzima esterasa por E.coli Epi 300 <ul><li>Se observa un halo alrededor del microorganismo. </li></ul>
  15. 15. E.coli Epi 300 no produjo las enzimas proteasa ni amilasa <ul><li>No se observó halo alrededor de E.coli. </li></ul><ul><li>No se observó color anaranjado en E.coli. </li></ul>

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