EPIGENETIKAI ÉS GENETIKAI VIZSGÁLATOK  FOLLICULÁRIS LYMPHOMÁBAN: EZH2  mutációk, Hiszton és DNS metiláció Bödör Csaba [ema...
Bevezetés – Epigenetika
Bevezetés – Epigenetika
Az  Epigenetikai Kód <ul><li>DNS metiláció </li></ul><ul><li>Hiszton modifikáció  (metiláció, acetyláció, foszforiláció) <...
Hiszton metiláció: PRC2 komplex <ul><li>Polycomb Repressive Complex 2  (EZH2, EED, SUZ12) </li></ul><ul><li>EZH2 : HMTáz a...
EZH2 fiziológiás és patológiás szerepe <ul><li>Fiziológiás </li></ul><ul><li>Daganatokban </li></ul><ul><li>Fokozott expre...
EZH2 Y641 mutációk GC lymphomákban <ul><li>EZH2 Y641   kodon mutációi  FL 8% -ában   (Nat ure  Gen etics , 2010) </li></ul...
G  A  A   T   A / T   C   T   G  T Y641F G  A  A   T / A   A   C   T   G  T G  A  A   T / C   A   C   T   G  T Y641N Y641H...
EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Megváltozik-e a gén expressziója (EZH2) a mutációk hatására ? </li></ul><ul><li>V...
EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Megváltozik-e a gén expressziója (EZH2) a mutációk hatására ? </li></ul>EZH2  mut...
EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Megváltozik-e a gén expressziója (EZH2) a mutációk hatására ? </li></ul>Mi állhat...
 
EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Változik-e a globális DNS metilációs profil a mutációk hatására ? </li></ul>Array...
EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Milyen hatással vannak a mutációk a  H3K27  trimetilációra ?   Valóban funkcióves...
Kitekintés: EZH2 mutációk myeloid kórképekben Inactivating mutations of the histone methyltransferase gene EZH2 in myeloid...
EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Milyen hatással vannak a mutációk a  H3K27  trimetilációra ?   Valóban funkcióves...
EZH2 Y641 mutációk: Hogyan tovább? <ul><li>Valószínű a funkciószerzés, tehát az EZH2 onkogén szerepe FL-ben  </li></ul><ul...
Az Epigenetikai kód, Epigenetikai terápia DNMT HDAC <ul><li>DNS metiláció </li></ul><ul><li>Hiszton modifikáció  (metiláci...
Epigenom projekt …
 
 
Köszönöm a figyelmet !
Upcoming SlideShare
Loading in …5
×

EPIGENETIKAI ÉS GENETIKAI VIZSGÁLATOK FOLLICULÁRIS LYMPHOMÁBAN

879 views

Published on

Published in: Health & Medicine
0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total views
879
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
52
Actions
Shares
0
Downloads
4
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide

EPIGENETIKAI ÉS GENETIKAI VIZSGÁLATOK FOLLICULÁRIS LYMPHOMÁBAN

  1. 1. EPIGENETIKAI ÉS GENETIKAI VIZSGÁLATOK FOLLICULÁRIS LYMPHOMÁBAN: EZH2 mutációk, Hiszton és DNS metiláció Bödör Csaba [email_address] Veszprém, 2010. november 18. 1, Institute of Cancer, Barts and The London School of Medicine and Dentistry, 2, Semmelweis Egyetem, 1. Patológiai és Kísérleti Rákkutató Intézet
  2. 2. Bevezetés – Epigenetika
  3. 3. Bevezetés – Epigenetika
  4. 4. Az Epigenetikai Kód <ul><li>DNS metiláció </li></ul><ul><li>Hiszton modifikáció (metiláció, acetyláció, foszforiláció) </li></ul>DNS metiláció Hiszton metiláció DNMT PRC2
  5. 5. Hiszton metiláció: PRC2 komplex <ul><li>Polycomb Repressive Complex 2 (EZH2, EED, SUZ12) </li></ul><ul><li>EZH2 : HMTáz aktivitás </li></ul><ul><li>Transzkripció repressziója embrionális őssejtekben </li></ul><ul><li>Reaktiváció a differenciáció során </li></ul>H3K27 me3 transzkripciós represszor H3K27 <ul><li>DNS metilációval való kapcsolat </li></ul>SUZ12 EZH2 EED UTX DNMT EZH2
  6. 6. EZH2 fiziológiás és patológiás szerepe <ul><li>Fiziológiás </li></ul><ul><li>Daganatokban </li></ul><ul><li>Fokozott expresszió (mRNS és/vagy fehérje) és kedvezőtlen prognosztikus szerep prosztata-, emlő-, tüdődaganatokban </li></ul>Lehetséges onkogén szerep <ul><li>Hiszton és DNS metiláció </li></ul><ul><li>Fokozott expresszió a centrum germinativumban </li></ul><ul><li>Korai B-sejt fejlődés, Immunglobulin génátrendeződés </li></ul>DNMT EZH2
  7. 7. EZH2 Y641 mutációk GC lymphomákban <ul><li>EZH2 Y641 kodon mutációi FL 8% -ában (Nat ure Gen etics , 2010) </li></ul><ul><li>Mutáció a kulcsfontosságú SET katalikus doménben </li></ul><ul><li>GC specifi kus ! </li></ul><ul><ul><li>Tirozin szubsztitúció (Y641N, Y641F, Y641H, Y641S) </li></ul></ul><ul><ul><li>Morin és mtsai, Nat Gen, 2010 </li></ul></ul><ul><li>Metiltranszferáz aktivitás csökkenés </li></ul>Funkcióvesztés ( in vitro!) H3K27 me3 transzkripciós represszor X X <ul><li>Tumor szupresszor szerep FL-ben ?? </li></ul><ul><li>de …. ! </li></ul>EZH2
  8. 8. G A A T A / T C T G T Y641F G A A T / A A C T G T G A A T / C A C T G T Y641N Y641H G A A T A / C C T G T Y641S D1 D2 CXC SET <ul><ul><li>Y641N (8), Y641F (14), Y641H (3),Y641S (1) </li></ul></ul>EZH2 Y641 mutációk: Saját eredmények <ul><li>26 mutáció 221 vizsgált beteg esetében (12%) </li></ul><ul><li>31 FL és tFL mintapár analízise: 9 mutáció (29%) </li></ul>
  9. 9. EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Megváltozik-e a gén expressziója (EZH2) a mutációk hatására ? </li></ul><ul><li>Változik-e a globális DNS metilációs profil a mutációk hatására ? </li></ul><ul><li>Milyen hatással vannak a mutációk a H3K27 trimetilációra ? Valóban funkcióvesztés? </li></ul><ul><li>Mutáns és vad típusú GC B-sejtvonalak </li></ul><ul><li>FL szövetminták </li></ul>
  10. 10. EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Megváltozik-e a gén expressziója (EZH2) a mutációk hatására ? </li></ul>EZH2 mutáns EZH2 vad típus SU-DHL - 4 SU-DHL - 6 Karpas 422 SC-1 DOHH - 2 HRC57 Nc - Nc EZH2 GAPDH FL-1 FL-2 FL-3 FL-4 FL-5 FL-6 Tonsil-1 Tonsil-2 Tonsil-3 Q-PCR WB EZH2 EZH2 IHC
  11. 11. EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Megváltozik-e a gén expressziója (EZH2) a mutációk hatására ? </li></ul>Mi állhat a heterogén EZH2 expresszió hátterében?? <ul><li>MikroRNS általi szabályozás: miR-101, miR-26a </li></ul><ul><li>AKT kináz általi szabályozás </li></ul><ul><li>Ciklin dependens kinázok általi szabályozás </li></ul>miR-101 miR-26a EZH2 AKT CDK
  12. 13. EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Változik-e a globális DNS metilációs profil a mutációk hatására ? </li></ul>Array (chip) alapú metilációs analízis Mindössze 2% különbség az EZH2 mutáns és vad típusú esetek között. DNMT EZH2
  13. 14. EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Milyen hatással vannak a mutációk a H3K27 trimetilációra ? Valóban funkcióvesztés? </li></ul>H3K27 me3 transzkripciós represszor X X EZH2
  14. 15. Kitekintés: EZH2 mutációk myeloid kórképekben Inactivating mutations of the histone methyltransferase gene EZH2 in myeloid disorders. Ernst et al, Nature Genetics,. 2010, July 4 Somatic mutations of the histone methyltransferase gene EZH2 in myelodysplastic syndromes. Nikoloski et al, Nature Genetics,. 2010, July 4 D1 D2 CXC SET <ul><li>Különböző típusú mutációk a génben, de az Y641 kodon érintetlen!! </li></ul><ul><li>Gyakran homozigóta mutációk >>> egyértelmű funkcióvesztés </li></ul>H3K27 me3 transzkripciós represszor X X <ul><ul><li>Makishima és mtsai, Leukemia, 2010 </li></ul></ul>EZH2
  15. 16. EZH2 Y641 mutációk: Mechanizmus? <ul><li>Milyen hatással vannak a mutációk a H3K27 trimetilációra ? Valóban funkcióvesztés? </li></ul>X X ? SU-DHL - 4 SU-DHL - 6 Karpas 422 SC-1 DOHH - 2 HRC57 Nc - Nc EZH2 H3K27me3 GAPDH FL-1 FL-2 FL-3 FL-4 FL-5 FL-6 Tonsil-1 Tonsil-2 Tonsil-3 WB IHC H3K27me3 LOW HIGH H3K27me3 Nem valószínű a funkcióvesztés, sőt… ! EZH2
  16. 17. EZH2 Y641 mutációk: Hogyan tovább? <ul><li>Valószínű a funkciószerzés, tehát az EZH2 onkogén szerepe FL-ben </li></ul><ul><li>Mutáns konstrukciók szerkesztése és expressziója: </li></ul><ul><ul><li>változik-e az inaktivált gének „névsora”? </li></ul></ul><ul><ul><li>hozzájárul-e a mutáció az FL sejtek kemorezisztenciájához? </li></ul></ul><ul><ul><li>HMTáz és DNS metiláció gátlókkal való kezelés </li></ul></ul><ul><ul><li>specifikus EZH2 SET domén inhibítorok </li></ul></ul><ul><ul><li>demetilázok vizsgálata </li></ul></ul><ul><li>Az EZH2-H3K27me3 tengely egyéb szabályozói </li></ul><ul><li>Hamarosan: … újabb hiszton metiltranszferáz (MLL2) mutációi FL-ben! </li></ul>Mendez-Lago et al , ASH 2010.
  17. 18. Az Epigenetikai kód, Epigenetikai terápia DNMT HDAC <ul><li>DNS metiláció </li></ul><ul><li>Hiszton modifikáció (metiláció, acetyláció, foszforiláció) </li></ul>HMT 5-aza-2'-deoxycytidine … Panobinostat DZNep ( 3-deazaneplanocin)
  18. 19. Epigenom projekt …
  19. 22. Köszönöm a figyelmet !

×