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Aula inicial de laboratorio clínico

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Aula inicial de laboratorio clínico

  1. 1. 21/07/2015 1 Universidade da Região da Campanha Centro de Ciências da Saúde Curso de Medicina Veterinária Disciplina de Laboratório Clínico Profª Regina Pereira Reiniger 2015 - Objetivos da disciplina - Cronograma do semestre - Plano de ensino - Referências bibliográficas -labclinicourcamp@outlook.com (CRurcamp) ORGANIZAÇÃO DIDÁTICA PEDAGÓGICA REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS CHEW, D.J.; DIBARTOLA, S.P.; SCHENCK, P.A. Urologia e nefrologia do cão e do gato. 2ªed, Rio de Janeiro, 2012, 524p. COLES, E. H. Patologia Clínica Veterinária. 3ª ed., São Paulo, Manole, 1984. 565 p. KANTEK, C. E. Manual de Urianálise Veterinária. 1ª ed.,São Paulo,Varela Ltda,1996,95 p. KERR, M. G. Exames Laboratoriais em medicina veterinária. 2ª ed., São Paulo, Roca, 2003, 436 p. MEYER, D. J.; COLES, E. H.; RICH, L. J. Medicina de Laboratório Veterinária. São Paulo, Roca, 1995, 308 p. REBAR, A.H., MaCWILLIAMS, P.S., FELDMAN, B.F., METZGER, F. L., POLLOCK, R.V.H., ROCHE, J. Guia de hematologia para cães e gatos. São Paulo, Roca, 2003, 291p. REECE, W. O. Fisiologia dos animais domésticos. São Paulo, Roca, 1999, 298 p. SCOTT, M.A.; STOCKHAM, S.L. Fundamentos de patologia clínica veterinária. 2ªed, Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2011, 729p. SILVEIRA, J. M. Patologia Clínica Veterinária. Texto e Interpretação. Rio de Janeiro, Guanabara, 1988, 196 p. SINK, C.A.; FELDMAN, B.F. Hemoterapia. São Paulo, Roca, 2007, 104p. THRALL, M.A. Hematologia e Bioquímica Clínica Veterinária. São Paulo, Roca, 2007, 582p. Coleta -Obedecer a Técnica -Identificação -Acondicionamento -Meios de conservação -Coleta Diagnóstico Preciso  Perfeita coleta Introdução Exames hematológicos: - Mais práticos, econômicos - Grande utilidade na prática clínica - Coletar a amostra antes de iniciar o tratamento; - Preferência: punção Jugular - Homogenizar com anticoagulante Reiniger, R. (2009)
  2. 2. 21/07/2015 2 Coleta e Remessa para Laboratório -Sangue -Urina -Líquido Cavitário -Amostra de Tecido -Fezes Conservantes ? HEMATOLOGIA SANGUE -Constituição -Função -Volume Sanguíneo -Fatores de Maturação -Anemia Perniciosa Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 % peso corpóreo 7% sangue 93% outros fluidos e tecidos
  3. 3. 21/07/2015 3 Células . Glóbulos Vermelhos ou Eritrócitos ou Hemácias . Glóbulos Brancos ou Leucócitos . Neutrófilos, Eosinófilos, Basófilos . Linfócitos e Monócitos .Plaquetas ou Trombócitos PLASMA  Componente fluído do sangue  Constitui cerca de 55% do volume sanguíneo  Constituição:  90% Água  7% Proteínas – Albumina, Fibrinogênio e Gamaglobulinas  1% Substâncias inorgânicas - K,Cl,Na, HCO3  1% Substâncias orgânicas não proteícas  Restante – gases, hormônios e pigmentos Fatores de Maturação  Anemia megaloblástica ou perniciosa Sangue Total Hemograma Série Vermelha eritrograma Série Branca leucograma Contagem de Hemácias Determinação de Hb Contagem de Reticulócitos Contagem de Global e Diferencial Pesquisa de Hemoparasitos e Inclusões Morfologia Hemácias, Plaquetas e Leucócitos Hematócrito Proteínas PT Fibrinogênio P Índice Ictérico Fonte: Silveira, 1988 Hematopoese Hematopoiese Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 ERITROPOIESE Hipóxia Tecidual PO2 Eritropoetina Medula Óssea Acelera formação celular Reticulócitos Eritrócitos
  4. 4. 21/07/2015 4 Erítron – Compartimentos e Funções -Morfologia Normal -Tempo de Vida Espécie animal - Vida média do eritrócito Cão 120(100) Gato 70(85-90) Bovinos 160 Equinos 145 Ovinos 125 (90) ESTRUTURA DA HEMOGLOBINA α1 OXIHEMOGLOBINA Hb + 4 O2  Hb (O2)4 Diferenças importantes entre as hemácias de várias espécies Espécie Diâmetro (µm) Rouleax Palidez central Reticulócitos (%) Cão 7 + ++++ 1 Suíno 6 ++ +- 1 Gato 5,8 ++ + 0,5 Equino 5,7 +++ - 0 Vaca 5,5 - + 0 Ovino 4,5 +- + 0 Caprino 3,2 - - 0 Fonte: Thrall, 2007 O nº de hemácias circulantes é afetado por mudanças:  volume plasmático  velocidade de destruição ou perda dos eritrócitos  contração esplênica  secreção de eritropoietina  taxa de produção da medula óssea OBS: A eritropoietina estimula produção  plaquetas  hemácias NÃO ESTIMULA a produção de leucócitos
  5. 5. 21/07/2015 5 - Equilíbrio Medula óssea  sangue  hemocaterese Cão 15Kg  800.000 hemácias/segundo A eritropoiese e o nº de hemácias são afetados: -Aumento:Andrógenos, cortisol, tiroxina, adrenalina, prolactina, THS, STH e ACTH. - Excesso desses hormônios  aumento Vg. Ex: Síndrome de Cushing. - Diminuição  anemia discreta. Ex: hipotireoidismo, hipoadrenocorticismo. - Diminuição: estrógenos. -OBS: O macho apresenta Vg maior que a fêmea – efeito abolido com a castração. Morfologia na Doença Anisocitose – Variação no Tamanho - Macrócitos e Micrócitos Policromasia Hipocromasia – diminuição da concentração de Hb Poiquilócitos – morfologia anormal - Acantócitos-2 a 10 prolongamentos em forma dedo de luva - Esferócitos –sem halo pálido central - Eliptócitos –Ovais - Dacriócitos –Gota - Estomatócitos –halo pálido central oval - Excentrócitos –concentrado de Hb em um dos pólos - Esquistócitos –forma irregular ou bizarra - Forma de broca(burr cells) –elípticas com espículas Crenação – artefato durante a coleta ou laboratório Associações com doenças Anemia regenerativa + esferócitos = anemias hemolíticas Doença auto-imune Dirofilariose Linfoma Lúpus eritrematoso Drogas ou medicamentos Acantócitos – associados com hemangiossarcoma hepático Anemia Falciforme Fonte: www.wikiped.com Anisocitose – bovino Fonte:www.ufrgs.br/atlashematologia Eliptócitos Rouleaux
  6. 6. 21/07/2015 6 Esferócitos Eritrócitos em alvo Esfregaço bovino – Secagem à fogo Inclusões Eritrocitárias . Reticulócitos . Ponteado Basófilo . Policromatofilia . Corpúsculo de Howell-Jolly . Corpúsculo de Heinz . Corpúsculo de Lentz Reticulócitos Fonte: www.nlm.nih.gov Grau de resposta (canino) (felino) (ruminantes e equinos) Normal 0-1,5 0-0,4 ausentes Leve 1-4 0,5-2,0 1 é sinal regenerativo Moderada 5-20 3,0-4,0 Intensa 21-50 >50 Grau de resposta da medula na produção de reticulócitos (%) Sangue canino - Hipocromasia Fonte: atlas de hematologia/ufrgs
  7. 7. 21/07/2015 7 Corpúsculo de Lentz Sangue Canino Babesia canis Fonte: Corpúsculo de Howell-Jolly - Cão Metarrubrócito - Cão Policromasia - Cão Esfregaço Felino Corpúsculo de Howell-jolly Metarrubrícito
  8. 8. 21/07/2015 8 Esfregaço Felino Corpúsculo de Heinz Anisocitose Leucócitos Divide-se em: 1.Granulócitos -Neutrófilos (10-12µm) .Morfologia .Desenvolvimento .Funções . 50 a 70% circulante Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Sangue Circulante Interior da Medula Óssea Granulopoiese Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Leucócitos Fonte: Junqueira e Carneiro, 2004 Neutrófilo humano x 100 Neutrófilos humanos x 100
  9. 9. 21/07/2015 9 Neutrófilos x 100 - bovino Bastão - canino Eosinófilos ( 9 - 15µm) .Morfologia .Funções . 1 – 4% Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Sangue Circulante Medula Óssea Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Eosinófilo Eosinófilo x 100 - bovino Eosinófilo humano x 100
  10. 10. 21/07/2015 10 Eosinófilo - bovino Eosinófilo - Equino Eosinófilo - Galinha Basófilos (10 – 12 µm) .Morfologia .Funções . 0,5 a 1% neutrófilo basófilo hemácias Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Medula Óssea Sangue Circulante Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Basófilo Basófilo - Bovino Basófilo - Equino Basófilo e Neutrófilos - Cães
  11. 11. 21/07/2015 11 Basófilo - Pingüim 2. Agranulócitos - Linfócitos (6 a 8 µm) .Morfologia .Funções .20 a 40% .Linfócito T e B Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Linfócitos humanos Esfregaço humano Linfócito Reativo - Cão Linfócitos - Equino Esfregaço - Galinha Seta azul – linfócito, Seta vermelha - Heterófilo
  12. 12. 21/07/2015 12 Monócitos (9 - 22µm) .Morfologia .Funções Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Esfregaço bovino x 100 Linfócito, Monócito x 100 - Bovino Monócito - Galinha Leucócitos Anormais . Célula do Lupus Eritrematoso . Cristal de Charcot-Leyden . Corpúsculo de Döhle . Eritrofagocitose . Granulações Tóxicas . Neutrófilos Hipersegmentados . Neutrófilos Gigantes Esfregaço Felino Neutrófilo grânulos tóxicos Eritrofagocitose
  13. 13. 21/07/2015 13 Esfregaço Canino Neutrófilo fagocitando bactérias Plaquetas ou Trombócitos . Corpúsculos ovais ou irregulares, anucleados . Originam-se da fragmentação do citoplasma dos megacariócitos. Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Produção de plaquetas  Dividido em Megacariopoiese e Trombopoiese  Megacariopoiese – é a proliferação e a maturação de megacariócitos;  Trombopoiese – é a formação de plaquetas a partir de megacariócitos e sua liberação para a circulação,  A trombopoietina (Tpo) é produzida principalmente nos hepatócitos, no epitélio tubular renal e em células do estroma da medula óssea.  À medida que as plaquetas aumentam mais Tpo é ligada e removida da circulação, de modo que ocorre menos estimulação de megacariócitos ou de células-tronco. Produção de plaquetas A produção de Tpo aumenta em determinados estados patológicos:  Inflamação causa aumento de IL-6, que induz hepatócitos a produzir mais Tpo, o que, por sua vez, pode causar trombocitose.  Em consequência da produção aumentada de Tpo, a Tpo do plasma na trombocitose inflamatória é maior do que a esperada em relação as plaquetas.  As plaquetas ativadas podem liberar Tpo, aumentando assim as concentrações sanguíneas durante condições de consumo de plaquetas. Cinética plaquetária  As plaquetas no sangue são geralmente estabelecidas pelas taxas de produção, consumo e destruição de plaquetas bem como pelo desvio de plaquetas da circulação e para a circulação.  A produção de plaquetas é influenciada principalmente pelo grau de estimulação de citocinas e pelo número de células responsivas. O tempo de maturação total de megacariócitos varia de 2 a 10 dias (humanos e roedores).  O consumo de plaquetas é contínuo em virtude do reparo constante de defeitos vasculares de menor gravidade. O período médio de vida é em torno de 5 a 10 dias em indivíduos sadios.  O baço de humanos e de coelhos abrigam cerca de 33% das plaquetas sanguíneas em qualquer momento. Epinefrina e contração esplênica podem mobilizar essas plaquetas para a circulação, ao passo que ingurgitamento esplênico pode aprisionar mais plaquetas. Trombocitopenia É um estado patológico em que o número de plaquetas é menor que um limiar de referência inferior estabelecido. Ex: cães Greyhound apresentam concentrações menores de plaquetas em relação a outras raças. Indica um processo patológico e seu significado principal é a potencialização de sangramento. Sua presença pode sugerir distúrbios ou doenças específicas. Sinais clínicos: Petéquias e equimoses. Sangramento em mucosas (epistaxe, hematoquezia ou melena), hematúria e hemorragia prolongada após traumatismo acidental ou intencional (ex. venopunção).
  14. 14. 21/07/2015 14 Doenças e condições que causam trombocitopenia -Sequestro – esplenomegalia, hipotermia intensa; - Produção diminuída  Quimioterápicos (doxorrubicina), estrógenos (cães), envenenamento por samambaia (ruminantes).  Drogas- griseofulvina, fenilbutazona...  Infecções – Diarreia viral bovina, cinomose, AIE, erliquiose crônica, parvovirose, Trombocitose  Número de plaquetas maior do que o limite superior de referência.  Redistribuição ou aumento da produção plaquetária. Doenças e condições que causam trombocitose Neoplasia hematológica Trombocitemia primária, Leucemia megacariocítica aguda; Trombocitose reativa Redistribuição – exercício e epinefrina Produção aumentada Inflamação:Infecção, imunomediada, cirurgia, trauma; Deficiência de Ferro Pós esplenectomia Perda de sangue Funções: . Hemostasia de aderência . Coagulação sanguínea . Retração do coágulo . Reparam pequenos defeitos endoteliais . Não hemostáticas: são importantes na inflamação e cicatrização de feridas. Fonte:Junqueira e Carneiro, 2004 Esfregaço Humano x 100 Coagulação Sanguínea São 3 os componentes principais da hemostasia: 1.Integridade Vascular 2.Plaquetas 3.Coagulação do Sangue
  15. 15. 21/07/2015 15 Coagulação Sanguínea Envolve 2 recursos: 1º Fisiológico ou hemostasia Mastócito e Basófilo  Serotonina,histamina vasoconstrição diminuir a saída do sangue 2º Recurso: Processo Químico Etapa 1 Extrínseco – rápido Lesão na parede do vaso Liberação Tromboplastina Tecidual + VII + III + Ca Intrínseco – lento Lesão do vaso por asperesa de parede Liberação Fator Plaquetário +Ca + XII + XI + IX + VIII Protrombina Etapa 2 Fibrinogênio Fibrina Tampão estabilizado XIII Coagulação Sanguínea - Há um contínuo balanço fisiológico entre o reparo do endotélio vascular e a lise do coágulo para manter o vaso desobstruído. - Eventos que impedem este equilíbrio: 1.Trombocitopenia manifestada por petéquias 2.Deficiência dos fatores de coagulação 3.Coagulação intravascular disseminada Coagulação Sanguínea Lesão Endotelial Adesão Plaquetária Ativação da cascata de coagulação Ativação Plaquetária Fibrina Coágulo de Plaquetas e Fibrina Plasmina Lise do Coágulo Plasminogênio Produtos de degradação da fibrina Fonte:Meyer, Coles e Rich, 1995 FATOR SINÔNIMO I Fibrinogênio II Protrombina III Tromboplastina Tecidual IV Cálcio V Fator Lábil, globulina A-C VII Proconvertina,fator estável VIII Fator antihemolítico-Tromboplastinogênio IX Fator Christmas-Componente tromboplastínico do plasma X Fator de Stuart-Power XI Antecedentes tromboplastínico XII Fator de Hageman XIII Fator de estabilização da Fibrina(F.Laki-Lorand) FATOR SINÔNIMO Local de síntese meia vida plasmática I Fibrinogênio Fígado 1,5-6,3 dias II Protrombina Fígado e macrófagos 2,1 – 4,4 dias III Tromboplastina Constituintes de fibroblastos Tecidual e memb plasmat de cél musculares lisas IV Cálcio V Proacelerina Fígado e macrófagos 15-24hs VII Proconvertina,fator estável Fígado e macrófagos 1 – 6h VIII Fator antihemofílico Fígado 2,9 dias IX Fator Christmas Fígado 24hs -Componente tromboplastínico do plasma X Fator de Stuart-Power Fígado e macrófagos 32-48 hs XI Antecedentes tromboplastínico Fígado (provavelmente) 30hs XII Fator de Hageman Fígado (provavelmente) 18-52hs XIII Fator de estabilização Fígado (provavelmente) 4,5-7 dias da Fibrina(F.Laki-Lorand) Fonte: Thrall et al. (2004)
  16. 16. 21/07/2015 16 Deficiências na Coagulação . Fibrinogênio . Protrombina . V, X, XII, VIII-IX-XI Termos Utilizados: . Trombocitopenia: nº de plaquetas; . Trombocitopatia: nº de plaquetas normal, deficiência de tromboplastina plaquetária; . Tromboblastemia: deficiência na retração coágulo.

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