Pcr

604 views

Published on

Published in: Health & Medicine
0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total views
604
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
4
Actions
Shares
0
Downloads
24
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide
  • البادئات Primers وهي عبارة عن نيوكلوتيدات قليلة( Oligonucleotides (18 – 20 أساس آزوتي قادرة على الارتباط مع الأسس الآزوتية للحمض النووي المراد تضخيمه، وذلك في منطقة ذات ترتيب مميز ونوعي غير متبدل للأسس الازوتية في الحمض النووي أو ما يعرف بمنطقة عالية الحفظ Highly Conserved Region .كميات وافرة من النيوكليوزيدات ثلاثية الفوسفات منقوصة الأوكسجين(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)Deoxynuleoside triphosphates(dNTPs)أنظيم البوليميراز Polymerase مقاوم للحرارة المرتفعة، وأهمهاTaq Polymerase المستخلص من بكتيريا تعيش في الينابيع الحارةThermusaquaticus.محاليل واقيه Buffersشوا رد مناسبة، أهمها شاردة المغنيزيوم Mg+2 التي تعتبر عامل متمم Cofactor لأنظيم البوليمراز.
  • 1. جهاز للتحكم بدرجات حرارة التفاعل بشمل دقيق و متتالي ( الدورة الحراريةThermocycle ) : ويقوم هذا الجهاز بتغير درجة الحرارة بشكل سريع ، لآن تغير درجة الحرارة هو الأساس الذي تقوم عليه فكرة هذه التقنية .2. البليمريز : وهو الإنزيم الذي يقوم ببناء وترتيب القواعد النيتروجينية ( حدات الحمض النووي (DNA ) ) ، ويجب أن يكون هذا الإنزيم مقاوم للحرارة العالية ليتمكن من العمل . و قد اكتشف انزيم مقاوم للحرارة و اسم تاج Tag3. مجموعة متفرقة من القواعد النيتروجينية: ( A T C G ) ليتمكن الإنزيم من ترتيبها في مواقعها أثناء عملية نسخ الحمض النووي (DNA ) .4. بريمر Primer : وهو قطعة صغيرة من الحمض النووي (DNA ) ليتمكن الإنزيم من بداء البناء و النسخ عليها .5. والشيء الأهم هو وجود نسخة من الحمض النووي (DNA ) المراد نسخه .6. بالإضافة إلى محلول أو وسط ليتم به التفاعل : وهذا المحلول يختلف بين تفاعل و أخر .
  • Pcr

    1. 1. •. • (DNA ) (DNA )
    2. 2. DNAKary Mullis DNA
    3. 3. PCR •in vitro DNA Thermal Cycler • • •
    4. 4. • • • . • •DNA Sequenceing •
    5. 5. (DNA ) • . • •Human Genome Project • C&B Genotyping • • HLA- tissuc typing •
    6. 6. PCR • DNA PCR • DNA PCR • DNA:
    7. 7. PCRDNA - • Sample
    8. 8. PCR - Primers - • • Forward • Reverse • • 20-25 bp
    9. 9. PCR( Hot Star Taq polymerase - • :(Taq polymerase Thermus aquaticus • • º •
    10. 10. PCR - Nitrogen Base dNTPs - • Adenine  Thymine  Guanine  Cytosine dNTPs :Deoxynuleoside triphosphates
    11. 11. PCR PCR Buffer10x - •Mg+2 - • Cofactor DDW - •
    12. 12. PCR-:(Thermocycler - •
    13. 13. PCR Denaturation - . (DNA ) s.s.DNA d.s. DNA :Primers annealing - - . (DNA ) :Extension -(DNA ) - dNTPs . (DNA ) (DNA )
    14. 14. Figure 1: The different steps in PCR.
    15. 15. Quantity of Reaction Master Mix
    16. 16. Quantity of Reaction Master MixMaster Mix  PCR DNA 
    17. 17. Figure3 : Verification of the PCR product on gel
    18. 18. PCR Convential PCR PCR : Real Time PCR (DNA ) .
    19. 19. PCR • Extraction sector .1Reagent preparation sector .2 (Pre – PCR sector)Amplification + Detection .3 sector ( Post- PCR Sector )
    20. 20. A thermal cycler for PCR
    21. 21. THANKS forLISTINING

    ×