Successfully reported this slideshow.
We use your LinkedIn profile and activity data to personalize ads and to show you more relevant ads. You can change your ad preferences anytime.
PROTOCOLO DE CULTIVO MONOSPORICO
Materiales:
-Hongo al que queremos replicar
-Cajas de Petri
-Agar PDA
-Asa de punta
-Asa ...
PROTOCOLO DE AISLAMIENTO
Materiales:
-hongos
-cajas de Petri
-asas chuzo
-alcohol
-mechero
-papel chicle
-agar PDA
- se es...
PROTOCOLO DE PURIFICACIÓN
Materiales:
-Hongos aislados
-cajas de Petri
-asas bacterianas chuzo
-alcohol
-mechero
-papel ch...
PROTOCOLO DE MICROSCOPIA
Materiales:
-azul de lacto fenol
-asa de chuzo
-porta objeto
-cubre objeto
-hongos
-mechero
-guan...
PROTOCOLO DE SIEMBRA
Materiales:
-papel chicle
-pinzas
-cajas de Petri
-agar PDA
-hipoclorito de sodio
-bisturí
-muestras
...
PROTOCOLO DE DESINFECCIÓN
Materiales:
-Alcohol
-Hipoclorito de sodio
-Agua deshionisada estéril
-Pinzas
-Papel
-Tejidos de...
PROTOCOLO DE DILUCIONES SERIADAS
Materiales:
-Micro pipeta 1
-Tubos de ensayo 12
-Gentamicina 2
-Asa de vidrio 1
-Cajas de...
Upcoming SlideShare
Loading in …5
×

Protocolos

306 views

Published on

Published in: Education
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

Protocolos

  1. 1. PROTOCOLO DE CULTIVO MONOSPORICO Materiales: -Hongo al que queremos replicar -Cajas de Petri -Agar PDA -Asa de punta -Asa de vidrio triangular -Pipeta de 1ml -Pipeteador -Mechero Proceso: - Primero se prepara el medio PDA para la cantidad de cajas necesarias - Para mayor protección se mete a la autoclave el agar, las cajas de pretri necesarias, el asa de punta, con la pipeta y el agua que se utilizara para el proceso. - Se sirve el medio de cultivo y se espera aprox 10 min para que este solidifique. - Con el asa de punta raspamos la superficie del hongo al que queremos replicar para que en este queden pegaras algunas conidias. - Para sembrar estas conidias, ponemos el asa sobre la caja de petri y con agua estéril lo goteamos, haciendo que las conidias caigan en la caja de petri con agar. - Con el asa de triangulo previamente remojada en alcohol y flameada se frota todo el medio hasta que este adsorba el agua y con ella las conidias. - Sellamos las cajas de pretri con papel chicle y esperamos aprox 8 días para el desarrollo total del hongo
  2. 2. PROTOCOLO DE AISLAMIENTO Materiales: -hongos -cajas de Petri -asas chuzo -alcohol -mechero -papel chicle -agar PDA - se esteriliza el material en el autoclave durante 45 minutos -luego se entra a la cabina de flujo laminar y previamente desinfectados -de la caja de Petri se va a sacar un trozo del hongo y lo pasaremos a l otra con el agar PDA -desinfectaremos el asa con el alcohol y el mechero -realizaremos lo misma acción con los hongos -al finalizar se marcan las cajas y se sellan bien con el papel chicle
  3. 3. PROTOCOLO DE PURIFICACIÓN Materiales: -Hongos aislados -cajas de Petri -asas bacterianas chuzo -alcohol -mechero -papel chicle -agar PDA -se esterilizan los materiales con el autoclave durante 45 minutos -luego se entra a la cabina de flujo laminar previamente desinfectados -de los hongos aislados se toma un trozo y al pasarlo a la otra caja de Petri se traslada el asa con el (mechero y alcohol) hacia la siguiente caja de Petri y se coloca en el centro de ella
  4. 4. PROTOCOLO DE MICROSCOPIA Materiales: -azul de lacto fenol -asa de chuzo -porta objeto -cubre objeto -hongos -mechero -guantes -microscopio Alcohol -se coge el porta objetos se le echa una gota de azul de lacto fenol -con el asa previamente esterilizada se coge un trozo del hongo y se esparce en el portaobjetos -se le coloca el cubre objetos sobre esta muestra y se retira el exceso de azul - se observa en el microscopio y se determina las características de ella
  5. 5. PROTOCOLO DE SIEMBRA Materiales: -papel chicle -pinzas -cajas de Petri -agar PDA -hipoclorito de sodio -bisturí -muestras - se esteriliza el material en el autoclave durante 25 minutos -Previamente esterilizados se entra a la cabina de flujo laminar para realizar el debido proceso el cual consta de cortar con el bisturí trozos de hojas tallos y vainas tanto bueno como malo para poder sembrar estos tejidos se les hace un proceso de desinfección (Anexo 1) -Se colocan de a 5 partes de cada muestra (hoja, tallo vaina, grano) en cada caja de pretri -Se marcan las cajas de pretri y se cella con papel chicle
  6. 6. PROTOCOLO DE DESINFECCIÓN Materiales: -Alcohol -Hipoclorito de sodio -Agua deshionisada estéril -Pinzas -Papel -Tejidos del cultivo de frijol -Cajas de Petri -Medio de cultivo (PDA) -Se esterilizan las cajas de Petri y el medio de cultivo en el autoclave - se cogen los tejidos del cultivo de frijol los cuales son: Hojas Tallos Vainas Luego se sumergen en hipoclorito de sodio duran te un minuto esto se hará para quitar los hongos superficiales y solo queden los hongos que de verdad estén afectando al cultivo, luego se sumergen en agua deshionisada estéril para quitar los reactivos y no vaya a afectar al medio de cultivo y después se vuelve a sumergir en agua deshionisada para rectificar que si se hallan eliminado los reactivos más adelante, se dejan secar estos tejidos en el papel para que absorba el agua y quede totalmente seco para poder sembrar en el medio de cultivo (PDA) -se disuelve el agar en las cajas de Petri para poder sembrar - se siembran los tejidos de frijol a los cuales se les hizo el proceso de desinfección se siembran cuatro tejidos (hojas, tallos y vainas) por cada caja de Petri que son aproximadamente 20 cajas. Se espera aproximadamente ocho días para que crezca algún microorganismo
  7. 7. PROTOCOLO DE DILUCIONES SERIADAS Materiales: -Micro pipeta 1 -Tubos de ensayo 12 -Gentamicina 2 -Asa de vidrio 1 -Cajas de Petri 14 -Schott 3 -Agar PDA 5.46 g -Agar SDX 9.1g -Mechero 1 -Vortex 1 -Agua desionizada estéril 9mlpor cada tubo -Puntas estériles *Se coge la tierra (10g por cada muestra), se mezcla con el agua desionizada estéril y se agita manualmente. *Se adiciona el antibiótico Gentamicina 0.14 ml (3 gotas) por cada 140 ml. Luego se vierte el agar en las cajas de Petri. *Adicionalmente se hará las diluciones seriadas, luego de la solución madre con una micro pipeta se toma 1 ml y se pasa al primer tubo 10-1, se mezcla en el vortex por 60 segundos ,después se toma de ese tubo(10-1) 1 ml y se repite el mismo proceso hasta llegar a 10-4. *Después, se toma 1 ml de las últimas diluciones 10-3 y 10-4 para pasarlos a la caja de Petri, se esparce en ella con el asa de vidrio (previamente flameado) *Se encuba a temperatura ambiente (25 a 27°c), se espera aproximadamente 5 días para ver si ha crecido algún microorganismo y observar el crecimiento.

×