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Columna de winogradsky

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Columna de winogradsky

  1. 1. La columna de Winogradsky es una demostración clásica de cómo los microorganismos ocupan "microespacios" altamente específicos de acuerdo con sus tolerancias medioambientales y sus necesidades vitales.
  2. 2. También ilustra cómo diferentes microorganismos desarrollan sus ciclos, y la interdependencia que llega a existir entre ellos. Esta columna es un sistema completo y autónomo de reciclamiento, mantenido sólo por la energía de la luz.
  3. 3. A lo largo de la columna se desarrollan diversos organismos:
  4. 4. Después de cuatro a seis semanas de la preparación de la columna, se establecen tres tipos de ambientes:  Anaerobio  Microaerofílico  Aerobio
  5. 5. Ambiente Anaeróbico Se localiza en el fondo de la columna en donde crecen dos tipos de organismos: los que fermentan la materia orgánica y los que realizan la respiración anaerobia, ambos descomponen la materia orgánica y dan lugar a la formación de ácidos orgánicos, alcoholes y H2. La fermentación es un proceso en el que los compuestos orgánicos son degradados de forma Incompleta.
  6. 6. Ambiente Microaerofilico No todo el H2S es utilizado, ciertas cantidades se difunden hacia arriba a lo largo de la columna de agua y son utilizados por otros organismos que crecen en las zonas superiores. Este crecimiento se visualiza bajo la forma de dos bandas estrechas, brillantemente coloreadas, inmediatamente por encima del sedimento
  7. 7. Ambiente Aerobio La parte superior de la columna de agua puede contener abundantes poblaciones de bacterias de diferentes tipos. Son organismos aerobios que se encuentran generalmente en los hábitats acuáticos ricos en materia orgánica (estanques poco profundos, arroyos contaminados, etc.). Suelen ser flagelados o ciliados (protozoarios), lo que les permite moverse y establecerse en nuevas áreas.
  8. 8. Material  300 a 500g de muestra de suelo o barro de un arroyo, lago, pantano o costa de mar o río (sedimento superficial o subsuperficial).  1 500 mL de agua de estanque, río o asequía.  1 recipiente alto de boca ancha, de paredes trasparentes, rectas y sin bordes (botellas plásticas de 2.0 L).  1 yema de huevo cocido.
  9. 9. Material  3 tornillos o clavos de hierro.  Papel periódico finamente cortado.  500 mL de medio mineral.  3 m de cordón de nylon o hilo cáñamo.
  10. 10. Material  8 portaobjetos con muesca en uno de los extremos  1 espátula  1 pliego de papel auto adherible transparente (20 cm x 20 cm) o bolsa de plástico transparente
  11. 11. Procedimiento 1. Remover las piedras, ramas o partículas grandes del material en estudio.
  12. 12. Procedimiento 2. Adicionar al suelo 1 g de cada una de las sales, el papel finamente cortado y el huevo desmenuzado. Mezclar hasta homogenizar completamente.
  13. 13. Procedimiento 3. Colocar la mezcla en un recipiente adecuado hasta ocupar 1/3 del volumen total. Compactar el suelo con la ayuda de una espátula a fin de eliminar las burbujas de aire
  14. 14. Procedimiento 4. Mezclar la muestra de agua con el medio mineral en proporción de 1:1.
  15. 15. Procedimiento 5. Añadir la solución anterior a la muestra de suelo hasta llegar a una altura de aproximadamente de 3 a 5 cm abajo del borde. Tener cuidado de no resuspender la muestra compactada, para ello inclinar la botella y resbalar el agua lentamente por las paredes
  16. 16. Procedimiento 6. Colocar los 8 portaobjetos en una posición vertical a diferentes niveles, cuatro sobre el sustrato inclinados contra la pared del recipiente dejando que el extremo de hilo suelto quede suspendido fuera de la botella y cuatro en los primeros 10 cm de la superficie.
  17. 17. Procedimiento 7. Colocar dos clavos (uno galvanizado y uno no galvanizado) al fondo, sobre el sustrato amarrados de un hilo
  18. 18. Procedimiento 8. Marcar el nivel de agua y cubrir la boca de la botella con el plástico auto adherible. Hacer algunas perforaciones para reducir la evaporación. Puede ser necesario reponer agua para mantener el nivel original.
  19. 19. Después de incubar a temperatura ambiente (25 a 30°C) cerca de una ventana para que reciba iluminación. Observar la columna y registrar, los cambios físicos producidos con respecto al aspecto inicial.
  20. 20. Primera Semana El nivel del agua disminuy o El nivel de Suelo aumento
  21. 21. Primera Semana  Enturbiamiento del agua  El suelo se torno de un color mas obscuro  Aparición de Larvas  Crecimiento de ramificaciones en los cordones de Nylon  Emitía olor a podrido  Emanación de burbujas desde el suelo a la superficie
  22. 22. Segunda Semana El nivel del agua disminuyo El nivel de Suelo aumento
  23. 23. Segunda Semana  El agua tomo un color verdoso  El suelo se torno de un color mas obscuro y su textura cambio.  Aparición de Larvas  Las ramificaciones en los cordones de Nylon aumentaron  El olor emitido se hizo mas fuerte  Las burbujas emanadas desde el suelo a la superficie eran menos  Formación de una capa
  24. 24. Observación Húmeda Remover dos portaobjetos (uno de la superficie y otro del fondo). Observar los microorganismos sin teñir con los objetivos de 10X y 40X. Segunda Semana:
  25. 25. Observación Teñida Fijar con alcohol-ácido acético durante 5 minutos a temperatura ambiente y teñir con azul de metileno o safranina.
  26. 26. Observación Teñida  Primera Semana  Segunda Semana Superfici e Fondo
  27. 27. Observaciones por Niveles Tomar muestras de los diferentes niveles de la columna, con una pipeta de vidrio, iniciando en la superficie y terminando en la zona más profunda. Realizar de cada muestra una preparación húmeda y una fija y teñida.
  28. 28. Observaciones por Niveles Preparación Húmeda  Segunda Semana: Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 Nivel 4
  29. 29. Observaciones por Niveles Preparación Fija y Teñida  Primera Semana  Segunda Semana: Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 Nivel 4

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