Successfully reported this slideshow.
We use your LinkedIn profile and activity data to personalize ads and to show you more relevant ads. You can change your ad preferences anytime.

SPOED FISH acute promyelocytenleukemie

  • Login to see the comments

  • Be the first to like this

SPOED FISH acute promyelocytenleukemie

  1. 1. SPOED FISH APL Een snelle diagnostiek van FISH op beenmergsmears voor de detectie van acute promyelocytenleukemie Naam: Kristiaan Huijbers
  2. 2. Inhoud • Wat is APL? • De nieuwe FISH methode • Resultaten • Waarom een snellere diagnostiek?
  3. 3. APL • APL = acute promyelocyten leukemie • Leukemische/ Oncologische ziekte • Aangedane cel: promyelocyt • Ontstaan van maligniteit: beenmerg • Mediane leeftijd: 30-40 jaar. • Ontstaan van maligne aandoening: • Chromosomale translocatie (15;17) • Morfologisch herkenbaar • Auerse staven (‘takkenbosjes’)
  4. 4. Morfologie promyelocyt Normaal Afwijkend
  5. 5. De translocatie (15;17) • In 99% van de gevallen gevonden • Betrokken genen: • PML en RARα • Detectie met FISH
  6. 6. FISH • Directe uitstrijk op ongekweekt materiaal • beenmergsmear • Voorbehandelen • Pepsinebehandeling • Wasstappen ter verbetering FISH resultaat • Opbrengen probe • Vysis PML-RARA t(15;17) Dual Color Dual Fusion
  7. 7. FISH • Hybridiseren • 3 minuten denatureren, 76 °C • 120 minuten hybridiseren, 37 °C • Posthybridisatiewassen • Stap 1: wassen op hoge temperatuur: 76 °C • Stap 2: wassen op kamertemperatuur • Tijdschema • Inzetten: 4 uur (inclusief hybridiseren)
  8. 8. FISH • Analyseren Normaal afwijkend
  9. 9. Resultaten • Validatie: • 5 patiënten (indicatie AML) getest zonder voorbehandeling. • Resultaat: bij 1/5 preparaten, storende achtergrond. • Tweede validatie: • 5 patiënten (indicatie AML) getest met voorbehandeling. • Resultaat: 5/5 preparaten van voldoende kwaliteit. • Ontbrekende positieve controle
  10. 10. Waarom deze snellere diagnostiek? • De patiënt heeft baat bij een snelle behandeling • ATRA (vitamine A afgeleide) en chemotherapie • Na snelle en juiste behandelwijze, gunstige prognose • 12 jaars overleving van 70%
  11. 11. Tijdschema • Tijdschema SPOEDFISH APL • Beenmergsmears maken 20 minuten • 2 stuks • Voorbehandelen en probe opbrengen 45 minuten • Denatureren en hybridiseren 125 minuten • Posthybridisatiewassen 20 minuten • Analyseren van preparaat 30 minuten • Superviseren van preparaat 15 minuten • Totaal benodigde tijd: 4 uur en 15 minuten
  12. 12. SOP • Van deze is SPOED methode is een SOP opgesteld: • SOP: M06035: ‘SPOEDFISH APL.’

×