Abordaje laboratorial y epidemiológico
para el diagnóstico de hemoparásitos de
importancia veterinaria.
Efraín Benavides O...
(Benavides, 2014©)
La Conferencia
• Los organismos – hematozoarios
• La enfermedad y los ciclos silvestres
• Hemoparásitos...
(Benavides, 2014©)
 Las condiciones ecológicas del trópico
sudamericano proveen un habitat adecuado
para la multiplicació...
Neglected Tropical Diseases
(Benavides, 2014©)
Fuente: www.usaid.gov
Arthropod Borne Diseases
Tick Borne Diseases
(Benavides, 2014©)
• Organismos que viven en la sangre y se desarrollan
dentro o fuera de los glóbulos rojos. Son transmit...
Evolución de la parasitemia en
inmunocompetentes
(Benavides, 2014©)
Rey-Valeiron et al. (2007)
El hemoparasitismo…
• Nichos de endemicidad y ciclos silvestres
• Supervivencia y persistencia del vector en
diversas époc...
Hemoparásitos de animales domésticos
(En Colombia)
• Bovinos
– Babesiosis (fiebre de garrapatas)
– Anaplasmosis (fiebre de...
(Benavides, 2014©)
Hemoparasitismos de los bovinos
Babesiosis
Babesia bovis - Babesia bigemina
Anaplasmosis
Anaplasma marg...
Lecturas suplementarias hemoparásitos bovinos
(Benavides, 2014©)
Carta Fedegan (2002) Ciencia Animal (2012)
Babesiosis
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Hemoparasitismos
coinciden con su
distribución
Babesia
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Benigna
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Ciclo de vida Babesia spp.
Fuente: Veterinary Research
(Benavides, 2014©)
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Rickettsemia
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Ciclo de vida de Anaplasma marginale
(Benavides, 2014©)
Kocan et al., (2003)
(Benavides, 2014©)
Anaplasmosis y Babesiosis Bovinas en
Colombia
• Su distribución coincide con la del principal vector, l...
(Benavides, 2014©)
Distribución de
Hemoparásitos y
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Colombia
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distribuye en
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(Benavides, 2014©)
Precipitación Pluvial
y Humedad en
Colombia
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• Los brotes de fiebre de
garrapata no se dan en las
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(Benavides, 2014©)
Fiebre de Garrapata y Hemoparásitismos
• En clima cálido, generalmente existe estabilidad
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(Benavides, 2014©)
Epidemiología
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Explicaciones a la diapositiva anterior
• El modelo está basado en un hato
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Implicaciones sobre el diagnóstico
• En zonas endémicas, a
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(Benavides, 2014©)
Porcentaje de gotas gruesas positivas a
Babesia en diversos grupos de edad a través
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Conclusión sin equa non
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son constantes en el ganado, los
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Criterios de Interpretación Diagnóstica para Casos
Agudos de Enfermedad Hemoparasitaria en Bovinos
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La situación epidemiológica con
Anaplasma marginale es algo distinta
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• La importancia de la
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Hemoparásitos de bovinos en Colombia
Babesia bigemina
Anaplasma marginale
Babesia bovis
Trypanosoma vivax
Trypanosoma evan...
Tripanosomosis Bovina en el Trópico
Bajo Colombiano
Efraín Benavides Ortiz,
DMV, MSc, PhD.
(Benavides, 2014©)
Características del organismo
• Protozoario flagelado vive en la
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(Benavides, 2014©)
Las Tripanosomosis
Mundialmente no es una única dolencia, sino un grupo de
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(Benavides, 2014©)
Terminología usada en el caso de
Tripanosomas
 World Association for the Advancement of Veterinary
Par...
(Benavides, 2014©)
La Tripanosomosis en Colombia
• En Colombia se han detectado cuatro especies de
Trypanosomas en hombre ...
(Benavides, 2014©)
Epidemiología (Colombia)
• Primer reporte en
Sudamérica en 1928 (Plata)
posiblemente con ganado
Cebú tr...
(Benavides, 2014©)
Sintomatología
Severidad bastante variable, portadores subclínicos
frecuentes (Hipótesis Colombiana).
...
(Benavides, 2014©)
Cambios en las Interfases
Epidemiológicas
• Luego del brote
comprobado de
Trypanosoma evansi en
bovinos...
Condiciones de campo que sugieren la ocurrencia de
enfermedad hemoparasitaria en bovinos
(Benavides, 2014©)
Efraín Benavides Ortiz
Médico Veterinario, MSc., PhD
Profesor Asociado, Facultad de Ciencias Agropecuarias
Director Centro...
Enfermedades Febriles Anemizantes
• Serie de procesos infecciosos en caballos,
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Lecturas sugeridas, Febriles
anemizantes en équidos…
(Benavides, 2014©)
Hemoparásitos de Equinos
Piroplasmosis
Anemia Infecciosa
Equina?
Erhlichiosis
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(Surra)
(Benavides, 2014©)
Cuatro grupos de organismos
• Piroplasmosis equinas, transmitidas por
garrapatas
• Tripanosomosis equinas, transmitidas po...
Piroplasmosis Equina
Fiebre de Garrapata
• Dos tipos de parásitos involucrados
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Piroplasmosis Equinas
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El diagnóstico de laboratorio es vital
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Babesiosis - Epidemiología
• Diferencias entre Babesia
y Theileria
• Esporozoitos en
garrapata
• Merozoitos en GR
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Ciclo de vida de Theileria spp.
(Benavides, 2014©)
Garrapatas del caballo en Colombia
Amblyomma cajennense
La garrapata de Cayena o
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La garrapata co...
(Benavides, 2014©)
¿Existe Estabilidad Enzoótica en
Hemoparasitosis Equinas?
• Situación epidemiológica de
contacto benign...
Estudio serología piroplasmosis equinas
(Benavides, 2014©)
Tripanosomosis equina
(Surra)
Trypanosoma evansi (equinum)
Epidemiología
• Importado de África.
• Se multiplica en una variedad
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bovinos, ovinos, perros. Los
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Transmisión mecánica
(Benavides, 2014©)
El cuadro clínico de Surra (T. evansi)
• Principal efecto en équidos,
pero también son susceptibles,
bovinos búfalo, oveja...
Trypanosoma evansi
Fotos: Morales et al. (1986)
(Benavides, 2014©)
(Benavides, 2014©)
Durina (Enfermedad Coital Maligna)
• Causada por el protozoario Trypanosoma
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Efraín Benavides Ortiz
Médico Veterinario, MSc., PhD
Profesor Asociado, Facultad de Ciencias Agropecuarias
Director Centro...
Hemoparásitos de los caninos
Babesiosis
Erhlichiosis - Anaplasmosis
Tripanosomosis
Americana y africana
(Benavides, 2014©)...
Lecturas sugeridas, hemoparásitos
caninos
(Benavides, 2014©)
Biomédica 2011;31(Supl):11-73
Regiones zoogeográficas reconocidas
Newton & Dale (2001)
. http://people.eku.edu/ritchisong/birdbiogeography1.htm).
(Benav...
Babesiosis canina
• Babesia canis. tres genotipos:
– Babesia canis canis
– Babesia canis vogeli
– Babesia canis rossi
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Babesias pequeñas y grandes
(Benavides, 2014©)
(Homer et al., 2000)
Las babesiosis caninas
(Benavides, 2014©)
Babesia canis. Cruz de Malta
(Benavides, 2014©)
Babesia, morfología
(Benavides, 2014©)
Rangelia vitalii
(Benavides, 2014©)
R. vitalii
(Benavides, 2014©)
Ehrlichiosis
• Enfermedad de moda
• Son bacterias, parásitos intracelulares obligados,
transmitidas por vectores.
• Recien...
EGE, morfología
(Benavides, 2014©)
EME, Morfología
(Benavides, 2014©)
(Benavides, 2014©)
Reorganización Familia Anaplasmataceae
Dumler et al. Int J Syst Evol Microbiol. (2001) 51:2145-65
Ehrlichia o Anaplasma?
(Benavides, 2014©)
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asociada
Huéspedes
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(Benavides, 2014©)
Ehrlichia canis
(Benavides, 2014©)
(Benavides, 2014©)
Las Ex Ehrlichias
Nombre actual Nombre previo Enfermedad
asociada
Huéspedes
naturales
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afectada
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Ehrlichiosis monocíticas
(Benavides, 2014©)
E. canis
http://www.capcvet.org/
E. chaffeensis
http://www.lookfordiagnosis.com
Ehrlichia canis
(Benavides, 2014©)
Ehrlichia granulocítica
E. ewingii
http://www.vet.uga.edu
(Benavides, 2014©)
E. ewingii
http://www.cvbd.org
Pero en las condiciones colombianas….
• Posiblemente es más frecuente
e importante la infección por
Rickettsia rickettsii
...
(Benavides, 2014©)
Efecto Rickettsia en células
endoteliales
La enfermedad de Tobia
• Los perros afectados en
los focos peridomésticos
sufren una enfermedad
macular muy similar a la
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Babesia canis vogeli y Ehrlichia canis en Colombia
(Benavides, 2014©)
Rol de la fauna silvestre en la transmisión
(Benavides, 2014©)
Ehrlichia chaffeensis Anaplasma phagocytophilum
Garrapatas que afectan al canino que no
existen en Colombia
Amblyomma americanum, la garrapata de la
estrella solitaria
...
Amblyomma americanum
(Benavides, 2014©)
Dermacentor variabilis
• La garrapata
americana del perro
• Vector de la Fiebre
Moteada de las
Montañas Rocosas
(Rocky Mou...
Garrapatas exóticas……
(Benavides, 2014©)
Ixodes scapularis
• Garrapata de patas
negras del venado
• Vector de enfermedad
de Lyme - Borrelia
(Benavides, 2014©)
Ixodes scapularis
(Benavides, 2014©)
http://www.oes.org/html/how_2_identify_different_ticks.html
Ixodes pacificus
• Garrapata occidental
de patas negras
• Vector enfermedad
de Lyme
(Benavides, 2014©)
Ixodes ricinus
• La garrapata europea
(Benavides, 2014©)
http://www.isw-tbe.info
Distribución geográfica aproximada de cuatro garrapatas de
importancia médica del complejo Ixodes ricinus.
Fuente: Swanson...
Las garrapatas en Colombia
(Benavides, 2014©)
Otras fuentes…..
(Benavides, 2014©)
Algunas garrapatas que sí existen en
Colombia
• Ixodes pararicinus
• Límites de Antioquia y
Chocó
• Posiblemente clasifica...
Ixodes pararicinus
(Benavides, 2014©)
Diagnóstico de hemoparásitos
• Directo: Parasitológico
– Capacidad de
reconocer las diferentes
formas parasitarias
– Prepa...
Porqué se requiere una
Buena Coloración?
 La visualización microscópica y la
diferenciación celular en extendidos de
sang...
La Selección del Tipo de Coloración
• La coloración de Giemsa es la
más sensitiva de las técnicas para
la identificación d...
La Coloración Hemacolor –Diff quick
Ventajas del Kit de Hemacolor El Kit
Hemacolor contiene:
Resultados comparables con l...
Recomendación Final
• Evalue cuidadosamente de forma
rutinaria, la calidad de sus coloraciones
• Escoja la coloración que ...
Metodos de Cuantificación en Lámina para
Hemoparásitos (1)
Identificación
•El extendido de sangre debe
ocupar las 2/3 part...
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Hemoparásitos (2)
Anaplasma marginale, Babesia bovis
y Babesia bigemina:
•Recuent...
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Hemoparásitos (3)
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•En 100 Glóbulos blancos se establece el
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(Benavides, 2014©)
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(Benavides, 2014©)
(Benavides, 2014©)
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o Prueba de Woo
• Tomar la muestra de sangre periférica; Punta de la cola o un...
(Benavides, 2014©)
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de T. vivax y de
T. evansi
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Motilidad Trips (videos)
Trypanosoma vivax Trypanosoma theileri
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Gota Gruesa
•Gota de sangre mediana
•Extendida en forma circular con portaobjetos
•Fijación al calor mo...
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Diagnóstico de Babesiosis
• Diagnóstico indirecto: Serológico
• Prueba Inmunofluorescencia Indirecta
– ...
(Benavides, 2014©)
Trypanosomosis, Diagnóstico
• Directo, Parasitológico
– Prueba de Woo
(diferenciación de especies)
– Go...
PCR específico, B. canis; E. canis
(Benavides, 2014©)
La prueba Snap 4D
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• Lyme Disease
• Canine
Anaplasmosis
• Canine Ehrlichiosis
• Hearthworm
Kit Snap 4Dx®
Dirofilaria
immitis,
Anaplasma
phagocytophilum
,
Anaplasma
platys, Borrelia
burgdorferi
Ehrlichia canis
y Eh...
Kit de prueba Antigen Rapid E. canis Ab
• Es un inmunoensayo
cromatográfico
• Detección cualitativa
de anticuerpos de
Ehrl...
Pruebas para el diagnóstico de Ehrlichiosis
en caninos
(Benavides, 2014©)
Otras pruebas de diagnóstico
• Buffy coat
• Naranja de acridina
(Benavides, 2014©)
Pruebas moleculares
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Diagnóstico de hemoparásitos de importancia veterinaria

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Abordaje laboratorial y epidemiológico para el diagnóstico de hemoparásitos de importancia veterinaria. (Benavides, E., 2014). La presentación brinda una descripción de la epidemiología de los parásitos sanguíneos de los animales domésticos y componentes de su diagnóstico laboratorial con base en la realidad del trópico colombiano.

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Diagnóstico de hemoparásitos de importancia veterinaria

  1. 1. Abordaje laboratorial y epidemiológico para el diagnóstico de hemoparásitos de importancia veterinaria. Efraín Benavides Ortiz DMV., MSc., PhD, Profesor asociado Programa de Medicina Veterinaria, Facultad de Ciencias Agropecuarias Director Centro de Investigación en Medicina y Reproducción Animal, CIMRA Universidad de La Salle efbenavides@unisalle.edu.co Simposio de actualización en Bacteriología, UDES Bucaramanga, abril 24 y 25 de 2014 I Seminario nacional de Salud y Producción Animal, UCC Ibagué, mayo 14 y 15 de 2014
  2. 2. (Benavides, 2014©) La Conferencia • Los organismos – hematozoarios • La enfermedad y los ciclos silvestres • Hemoparásitos en algunas especies de animales domésticos • Epidemiología – estabilidad enzoótica • El diagnóstico – bases epidemiológicas
  3. 3. (Benavides, 2014©)  Las condiciones ecológicas del trópico sudamericano proveen un habitat adecuado para la multiplicación de artrópodos vectores (garrapatas, moscas, tábanos y mosquitos) de una serie de enfermedades infecciosas tropicales  Básicamente se trata de Protozoarios y Ricketsias, pero también algunos virus se comportan de forma similar (Arthropod Borne Viruses) Introducción
  4. 4. Neglected Tropical Diseases (Benavides, 2014©) Fuente: www.usaid.gov Arthropod Borne Diseases Tick Borne Diseases
  5. 5. (Benavides, 2014©) • Organismos que viven en la sangre y se desarrollan dentro o fuera de los glóbulos rojos. Son transmitidos por vectores artrópodos (moscas y garrapatas) • Evolutivamente habitantes del tubo digestivo del vector, que se adaptaron a las células sanguíneas • La afección primaria aguda se caracteriza por fiebre, anemia e incluso la muerte. El curso clínico luego del contacto inicial y desarrollo de inmunidad generalmente es benigno (Estabilidad enzoótica). Problemas de deposición de complejos inmunes en casos crónicos? • Básicamente Protozoarios, pero también Rickettsias Hemoparásitos
  6. 6. Evolución de la parasitemia en inmunocompetentes (Benavides, 2014©) Rey-Valeiron et al. (2007)
  7. 7. El hemoparasitismo… • Nichos de endemicidad y ciclos silvestres • Supervivencia y persistencia del vector en diversas épocas del año (ecología) • Diferencias en efecto patógeno entre poblaciones residentes en zonas endémicas de continua transmisión y situaciones de reciente introducción o exposición accidental • Exposición inicial – Caso agudo • Situaciones de cronicidad – persistencia, efectos autoinmunes (Benavides, 2014©)
  8. 8. Hemoparásitos de animales domésticos (En Colombia) • Bovinos – Babesiosis (fiebre de garrapatas) – Anaplasmosis (fiebre de garrapatas) – Tripanosomosis bovina • Equinos – Piroplasmosis – Tripanosomosis equina – Ehrlichiosis? • Caninos – Babesiosis – Ehrlichiosis - rickettsiosis? – Micoplasmosis hemotrópica – Hepatozoonosis – Tripanosomosis - leishmaniosis (Benavides, 2014©)
  9. 9. (Benavides, 2014©) Hemoparasitismos de los bovinos Babesiosis Babesia bovis - Babesia bigemina Anaplasmosis Anaplasma marginale Tripanosomosis Trypanosoma vivax Trypanosoma evansi
  10. 10. Lecturas suplementarias hemoparásitos bovinos (Benavides, 2014©) Carta Fedegan (2002) Ciencia Animal (2012)
  11. 11. Babesiosis Vector R. microplus Hemoparasitismos coinciden con su distribución Babesia bigemina Benigna Transmisión fase ninfas y adultos Hemoglobi- nuria Babesia bovis Patógena Transmisión fase larvaria Sígnos nerviosos (Benavides, 2014©)
  12. 12. Ciclo de vida Babesia spp. Fuente: Veterinary Research (Benavides, 2014©)
  13. 13. Anaplasma marginale Rickettsemia persistente • Sistema reticuloendo- telial Transmisión iatrogénica Vector principal la garrapata Rickettsiales: Anaplasmataceae (Benavides, 2014©)
  14. 14. Ciclo de vida de Anaplasma marginale (Benavides, 2014©) Kocan et al., (2003)
  15. 15. (Benavides, 2014©) Anaplasmosis y Babesiosis Bovinas en Colombia • Su distribución coincide con la del principal vector, la garrapata Boophilus microplus, hasta aprox. 2000 msnm. (Aumento en altura en últimas décadas) • En caso de Anaplasmosis, donde factores iatrogénicos y moscas juegan un papel importante en la transmisión, hoy la distribución en zonas frías parece ser más amplia que hace varias decadas (30% en estudio de Zipaquirá) • Brotes de enfermedad hemoparasitaria por movilización de animales y posible desarrollo de cepas patógenas locales
  16. 16. (Benavides, 2014©) Distribución de Hemoparásitos y sus Vectores en Colombia • La garrapata se distribuye en áreas inferiores a 2000 msnm • Zonas medias y Cálidas del país
  17. 17. (Benavides, 2014©) Precipitación Pluvial y Humedad en Colombia
  18. 18. Sin embargo…, • Los brotes de fiebre de garrapata no se dan en las zonas donde las garrapatas son más abundantes, • sino por el contrario… • Donde son menos frecuentes • Las regiones de ladera y climas medios (Benavides, 2014©) Fuente: sian.inia.gob.ve
  19. 19. (Benavides, 2014©) Fiebre de Garrapata y Hemoparásitismos • En clima cálido, generalmente existe estabilidad enzoótica (Babesia y Anaplasma), a no ser que el uso de baños garrapaticidas sea muy intenso (Lechería) • Problema en animales introducidos de otras regiones, en este caso pueden haber casos típicos de fiebre de garrapata • Si existen tábanos puede haber transmisión continua de Trypanosoma vivax, causando un síndrome típico en de debilidad y muerte en terneros y aborto en vacas • Diagnóstico de laboratorio, esencial
  20. 20. (Benavides, 2014©) Epidemiología Estabilidad Enzoótica • Situación epidemiológica en la cual, los terneros se infectan a temprana edad y luego de recuperarse del primer contacto con el hemoparásito, se vuelven portadores sanos. A esa edad, los impactos de la infección son menos severos. • El ganado adulto es portador sano. • Inmunidad co-infecciosa • Introducción de ganado de áreas libres, causa problemas
  21. 21. (Benavides, 2014©) 88% 1% 12% 39% 49% 29% 22% 49% 26% 74% 8% 92% 100% 11% El fenómeno de estabilidad enzoótica para enfermedades hemoparasitarias del ganado Donde existen más garrapatas hay menos muertes !!
  22. 22. Explicaciones a la diapositiva anterior • El modelo está basado en un hato cerrado de ganado de carne, en Australia (Queensland) • Los animales están en el hato en diversos grupos desde el nacimiento hasta los 48 meses de edad • Modelo directo (beef herd) que no es enteramente aplicable cuando diversos grupos de edad se manejan en diversas fincas • La dificultad de aplicar estos modelos cuando se trabaja bajo nuestros sistemas de producción tropicales • Requerimos estudios epidemiológicos propios (Benavides, 2014©)
  23. 23. Implicaciones sobre el diagnóstico • En zonas endémicas, a ciertas edades, es factible hallar animales sanos que demuestran parasitemia. • ¿Correlación clínico - patológica? • ¿Cómo interpretar los resultados de laboratorio? (Benavides, 2014©)
  24. 24. (Benavides, 2014©) Porcentaje de gotas gruesas positivas a Babesia en diversos grupos de edad a través de un año en un área endémica Grupo etario (meses) No Obs Incidencia Parasitaria % Bbo Bbig t 0 – 1 15 5,9 0 5 2 – 6 79 21,5 45,6 * 95 6 - 12 63 52,4 33,3 260 13 -24 94 61,7 * 11,7 540 25 – 36 90 43,3 3,3 37 – 48 64 34,4 6,3 > 48 452 11,5 0,8 * = Máxima incidencia de la parasitemia t = edad media en días menos 10
  25. 25. Conclusión sin equa non • En regiones donde las garrapatas son constantes en el ganado, los animales jóvenes son expuestos a infección por hemoparásitos • El efecto clínico depende de la edad y la intensidad del desafío, pero también de la capacidad de adquisición de inmunidad • Es mejor una infección temprana que una tardía • ¿Cómo identificar la situación de un hato en particular? (Benavides, 2014©) Mahoney, 1962
  26. 26. Criterios de Interpretación Diagnóstica para Casos Agudos de Enfermedad Hemoparasitaria en Bovinos Adultos, Regiones Enzoóticas Fuente de la Muestra Hemoparásito Criterio Diagnóstico Observaciones Animales Vivos Anaplasma marginale Parasitemia > 1% Hematocrito < 20% Babesia bigemina Parasitemia > 0,5% Hematocrito < 20% Babesia bovis Presencia del parásito en cualquier frotis sanguíneo Bien puede tratarse de frotis capilar o venoso, recolectado de animales con cuadro febril Animales Muertos Anaplasma marginale Parasitemia > 1% Babesia bigemina Parasitemia > 1% Babesia bovis Presencia del parásito en cualquier frotis sanguíneo Muestra obtenida de sangre capilar en el examen post- mortem. Correlacionar hallazgos de laboratorio con signos clínicos. (Benavides, 2014©)
  27. 27. La situación epidemiológica con Anaplasma marginale es algo distinta • La rickettsemia persistente • La importancia de la competitividad del sistema inmune del animal para poder mantener un estado de inmunidad coinfecciosa • Esto explica la presencia del organismo en los síndromes consuntivos del ganado (secadera, desnutrición proteo- energética), etc. • Diferencias en la forma de transmisión • El rol discutible de dípteros hematófagos (Benavides, 2014©)Kocan et al., (2003)
  28. 28. Hemoparásitos de bovinos en Colombia Babesia bigemina Anaplasma marginale Babesia bovis Trypanosoma vivax Trypanosoma evansi (Benavides, 2014©)
  29. 29. Tripanosomosis Bovina en el Trópico Bajo Colombiano Efraín Benavides Ortiz, DMV, MSc, PhD.
  30. 30. (Benavides, 2014©) Características del organismo • Protozoario flagelado vive en la sangre y otros fluidos; su hábitat es extracelular. • No sobrevive por fuera del huésped, requiere vectores o transmisión por agujas. • Posible transmisión transplacentaria. • Transmitido por moscas Tse tse en África • Adaptación a otras formas de transmisión en América
  31. 31. (Benavides, 2014©) Las Tripanosomosis Mundialmente no es una única dolencia, sino un grupo de enfermedades que se dan en muy distintas condiciones: • El agente causal varía • La especie vector varía • La especie huésped varía • La intensidad de la infección varía • El curso y la severidad de la enfermedad varía • La susceptibilidad de las razas varía • Los sistemas de producción varían • La sensibilidad de los tripanosomas varía
  32. 32. (Benavides, 2014©) Terminología usada en el caso de Tripanosomas  World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology (WAAVP, 1985).  Sufijo -osis: Presencia de parásito causando enfermedad  Babesiosis, tripanosomosis, anaplasmosis  Sufijo -asis ó -iasis: Presencia de parásito como portadores inaparentes o subclínicos (estabilidad enzoótica)  Babesiasis, tripanosomiasis, etc.
  33. 33. (Benavides, 2014©) La Tripanosomosis en Colombia • En Colombia se han detectado cuatro especies de Trypanosomas en hombre y animales domésticos: Trypanosoma cruzi (Stercoraria); cardiopatías en el hombre, transmitido por Pitos (Triatoma spp.) Trypanosoma vivax vienni (Salivaria); enfermedad aguda y crónica en bovinos y rumiantes, transmitido por tábanos. Reservorios silvestres?, efecto en búfalos? Trypanosoma evansi (Salivaria); enfermedad principalmente en equidos, pero el organismo se multiplica también en bovinos y perros. Reservorio el Chigüiro. Trypanosoma theileri (Stercoraria); grande apatógeno, vector no precisado.
  34. 34. (Benavides, 2014©) Epidemiología (Colombia) • Primer reporte en Sudamérica en 1928 (Plata) posiblemente con ganado Cebú traído de Senegal. • Hoy es endémico en regiones bajas (Valles interandinos, Caribe y Llanos Orientales) • Transmisión por Tábanos Tabanus nebulosus, Tabanus pungens. • Ciclos enzoóticos no evidentes clínicamente.
  35. 35. (Benavides, 2014©) Sintomatología Severidad bastante variable, portadores subclínicos frecuentes (Hipótesis Colombiana). Síndrome “típico” de libros (Nagana) asociado a cursos crónicos (renguera, enflaquecimiento), poco frecuente? Comportamiento peculiar en Sudamérica (poco descrito); Estabilidad Enzoótica?. Síndrome agudo, febril, abortos, caída producción de leche, mortalidad y opacidad de cornea en terneros. ¿Porque ocurren brotes agudos cada 4-5 años?
  36. 36. (Benavides, 2014©) Cambios en las Interfases Epidemiológicas • Luego del brote comprobado de Trypanosoma evansi en bovinos en el Pantanal en Brasil en 1997, se han trastocado las asociaciones epidemiológicas entre especies de mamíferos y Tripanosomas • Antes: – T. evansi = equinos – T. vivax = bovinos – T. theileri =bovinos, apatógeno • Ahora: – Necesidad de diferenciar la especie actuante – Mejorar la comprensión de la epidemiología – Rol de los bufalos?
  37. 37. Condiciones de campo que sugieren la ocurrencia de enfermedad hemoparasitaria en bovinos (Benavides, 2014©)
  38. 38. Efraín Benavides Ortiz Médico Veterinario, MSc., PhD Profesor Asociado, Facultad de Ciencias Agropecuarias Director Centro de Investigación en Medicina y Reproducción Animal, CIMRA Universidad de La Salle, Bogotá, COLOMBIA Epidemiologia y control de enfermedades febriles anemizantes en los équidos en Colombia
  39. 39. Enfermedades Febriles Anemizantes • Serie de procesos infecciosos en caballos, asnos y mulas, que son causados por diversos agentes etiológicos, pero que tienen como denominador común la producción de fiebre en los animales afectados • Se asocia con alteraciones del sistema retículo endotelial y de la inmunidad que conducen a anemia • En ocasiones el problema se torna crónico y termina con la muerte del animal (Benavides, 2014©)
  40. 40. Lecturas sugeridas, Febriles anemizantes en équidos… (Benavides, 2014©)
  41. 41. Hemoparásitos de Equinos Piroplasmosis Anemia Infecciosa Equina? Erhlichiosis Tripanosomosis (Surra) (Benavides, 2014©)
  42. 42. Cuatro grupos de organismos • Piroplasmosis equinas, transmitidas por garrapatas • Tripanosomosis equinas, transmitidas por insectos picadores (tábanos) • Anemia Infecciosa equina, Transmitida por insectos picadores y agujas • Rickettsiosis equinas, transmitidas por garrapatas • El curso clínico es muy similar para todos estos organismos que cursan con fiebre y anemia y además producen edemas y debilidad • El diagnóstico de laboratorio es imprescindible para orientar el control (Benavides, 2014©)
  43. 43. Piroplasmosis Equina Fiebre de Garrapata • Dos tipos de parásitos involucrados – Babesia caballi . Babesia grande. Su vector es la garrapata del caballo Anocentor nitens. – Theileria (Babesia) equi. Babesia pequeña, no se sabe con precisión cual es el vector • En Colombia no se conoce cuál especie existe o cuál es la más frecuente. • Estudio de Tenter et al. (1988); • Fiebre, anemia, ictericia, parálisis posterior, y la ocurrencia de edemas ventrales • Mas grave en animales adultos (Benavides, 2014©)
  44. 44. Piroplasmosis Equinas Theileria equi Babesia caballi ocurre en glóbulos blancos El diagnóstico de laboratorio es vital (Benavides, 2014©)
  45. 45. Babesiosis - Epidemiología • Diferencias entre Babesia y Theileria • Esporozoitos en garrapata • Merozoitos en GR • En Theileria Esquizogonia en GB • Garrapatas de uno y varios huéspedes (Benavides, 2014©)
  46. 46. Ciclo de vida de Theileria spp. (Benavides, 2014©)
  47. 47. Garrapatas del caballo en Colombia Amblyomma cajennense La garrapata de Cayena o venadera Anocentor nitens La garrapata común del caballo(Benavides, 2014©)
  48. 48. (Benavides, 2014©) ¿Existe Estabilidad Enzoótica en Hemoparasitosis Equinas? • Situación epidemiológica de contacto benigno temprano y estado de portador del adulto • Gran desconocimiento de la epidemiología de las piroplasmosis equinas en Colombia • Importancia como barrera para el movimiento internacional de caballos participantes en eventos ecuestres
  49. 49. Estudio serología piroplasmosis equinas (Benavides, 2014©)
  50. 50. Tripanosomosis equina (Surra) Trypanosoma evansi (equinum)
  51. 51. Epidemiología • Importado de África. • Se multiplica en una variedad de especies animales, bovinos, ovinos, perros. Los chigüiros se consideran portadores • Endémico en regiones bajas (Valles interandinos, Caribe y Llanos Orientales) • Transmisión por Tábanos y moscas picadoras (Benavides, 2014©)
  52. 52. Transmisión mecánica (Benavides, 2014©)
  53. 53. El cuadro clínico de Surra (T. evansi) • Principal efecto en équidos, pero también son susceptibles, bovinos búfalo, ovejas, cerdos y perros • Capibaras, portadores sanos • Casos varían desde agudos hasta crónicos, dependiendo de especie y susceptibilidad individual • Pérdida de peso, letargo, anemia, linfadenitis, petequias, edemas, urticarias, fiebres recurrentes • Parálisis ascendente (Benavides, 2014©)
  54. 54. Trypanosoma evansi Fotos: Morales et al. (1986) (Benavides, 2014©)
  55. 55. (Benavides, 2014©) Durina (Enfermedad Coital Maligna) • Causada por el protozoario Trypanosoma equiperdum • Transmitido por el coito en équidos; los caballos son muy susceptibles y los asnales son portadores • Se desconoce situación en Colombia • Diagnóstico parasitológico: Directo • Tratamiento: Basado en drogas tripanocidas específicas
  56. 56. Efraín Benavides Ortiz Médico Veterinario, MSc., PhD Profesor Asociado, Facultad de Ciencias Agropecuarias Director Centro de Investigación en Medicina y Reproducción Animal, CIMRA Universidad de La Salle, Bogotá, COLOMBIA Manejo Integral de ectoparásitos y hemoparásitos en Caninos
  57. 57. Hemoparásitos de los caninos Babesiosis Erhlichiosis - Anaplasmosis Tripanosomosis Americana y africana (Benavides, 2014©) Mycoplasmosis hemotrópicas
  58. 58. Lecturas sugeridas, hemoparásitos caninos (Benavides, 2014©) Biomédica 2011;31(Supl):11-73
  59. 59. Regiones zoogeográficas reconocidas Newton & Dale (2001) . http://people.eku.edu/ritchisong/birdbiogeography1.htm). (Benavides, 2014©)
  60. 60. Babesiosis canina • Babesia canis. tres genotipos: – Babesia canis canis – Babesia canis vogeli – Babesia canis rossi • Babesia gibsoni • Rhipicephalus sanguineus transmite la subespecie vogeli y posiblemente B. gibsoni. • Trofozoítos piriformes en glóbulos rojos (Benavides, 2014©)
  61. 61. Babesias pequeñas y grandes (Benavides, 2014©) (Homer et al., 2000)
  62. 62. Las babesiosis caninas (Benavides, 2014©)
  63. 63. Babesia canis. Cruz de Malta (Benavides, 2014©)
  64. 64. Babesia, morfología (Benavides, 2014©)
  65. 65. Rangelia vitalii (Benavides, 2014©)
  66. 66. R. vitalii (Benavides, 2014©)
  67. 67. Ehrlichiosis • Enfermedad de moda • Son bacterias, parásitos intracelulares obligados, transmitidas por vectores. • Reciente reorganización de la familia (2001) • Estos organismos tienen importantes implicaciones para la Salud Pública • Clasificación previa: género Ehrlichia (Orden Rickettsiales, familia Rickettsiaceae, tribu Ehrlichieae) el cual es un pariente cercano del género Anaplasma que afecta los bovinos (Orden Rickettsiales, familia Anaplasmataceae). (Benavides, 2014©)
  68. 68. EGE, morfología (Benavides, 2014©)
  69. 69. EME, Morfología (Benavides, 2014©)
  70. 70. (Benavides, 2014©) Reorganización Familia Anaplasmataceae Dumler et al. Int J Syst Evol Microbiol. (2001) 51:2145-65
  71. 71. Ehrlichia o Anaplasma? (Benavides, 2014©) Nombre actual Nombre previo Enfermedad asociada Huéspedes naturales Vector primario Célula afectada Distribución Anaplasma phagocytophilum Ehrlichia equi Ehrlichia phagocytophilum Ehrlichiosis granulocitica humana Ehrlichiosis equina Humano, ciervo, roedores silvestres, alce, equino, bovino, ovino Ixodes scapularis Ixodes pacificus Granulocitos USA, Europa, Gran Bretaña Neorickettsia risticii Ehrlichia risticii Fiebre del Potomac Ehrlichiosis Monocítica Equina Equino Tremátodo en Caracoles acuáticos Mononucleares USA, Valle del Potomac Neorickettsia sennetsu Ehrlichia sennetsu Fiebrre glándular Fiebre sennetsu Humano Tremátodo en pescados Mononucleares Japón, Malasia
  72. 72. (Benavides, 2014©)
  73. 73. Ehrlichia canis (Benavides, 2014©)
  74. 74. (Benavides, 2014©)
  75. 75. Las Ex Ehrlichias Nombre actual Nombre previo Enfermedad asociada Huéspedes naturales Vector primario Célula afectada Distribución Ehrlichia chaffeensis Ehrlichia chaffeensis Ehrlichiosis Monocítica humana Humano, perro, ciervo Amblyomma americanum Mono- nucleares USA, Europa, África, Centro américa Ehrlichia canis Ehrlichia canis Ehrlichiosis canina Perros, zorros, chacales Rhipicephalus sanguineus Mono- nucleares Mundial Ehrlichia ewingii Ehrlichia ewingii Ehrlichiosis granulocítica canina y humana Humanos y perro Amblyomma americanum Granulocitos USA Anaplasma platys Ehrlichia platys Trombocitopenia cíclica canina Perros Rhipicephalus sanguineus Plaquetas USA, Taiwan, Venezuela, Grecia, Israel, Tailandia, Neorickettsia helminthoeca Neorickettsia helminthoeca Intoxicación del Salmón Perros Nanophyetus salmonicola Tremátodo en pescados Mononuclea res California, Oregon, Idaho, Washington (Benavides, 2014©)
  76. 76. Ehrlichiosis monocíticas (Benavides, 2014©) E. canis http://www.capcvet.org/ E. chaffeensis http://www.lookfordiagnosis.com
  77. 77. Ehrlichia canis (Benavides, 2014©)
  78. 78. Ehrlichia granulocítica E. ewingii http://www.vet.uga.edu (Benavides, 2014©) E. ewingii http://www.cvbd.org
  79. 79. Pero en las condiciones colombianas…. • Posiblemente es más frecuente e importante la infección por Rickettsia rickettsii • La enfermedad de Tobia o Fiebre macular • Zoonosis importante en Colombia, imprescindible diagnóstico diferencial del síndrome febril • Rol de los perros en las fincas en la epidemiología? (Benavides, 2014©)
  80. 80. (Benavides, 2014©) Efecto Rickettsia en células endoteliales
  81. 81. La enfermedad de Tobia • Los perros afectados en los focos peridomésticos sufren una enfermedad macular muy similar a la de humanos • Se puede observar: fiebre, dolor abdominal, depresión, anorexia, síntomas neurológicos, petequias. (Benavides, 2014©) Victoria Belligotti, MV
  82. 82. Babesia canis vogeli y Ehrlichia canis en Colombia (Benavides, 2014©)
  83. 83. Rol de la fauna silvestre en la transmisión (Benavides, 2014©) Ehrlichia chaffeensis Anaplasma phagocytophilum
  84. 84. Garrapatas que afectan al canino que no existen en Colombia Amblyomma americanum, la garrapata de la estrella solitaria Dermacentor variabilis, la garrapata americana del perro Ixodes scapularis, la garrapata del venado o garrapata de patas negras (deer tick) Ixodes pacificus, la garrapata occidental de patas negras Estas son garrapatas del Neártico (Benavides, 2014©)
  85. 85. Amblyomma americanum (Benavides, 2014©)
  86. 86. Dermacentor variabilis • La garrapata americana del perro • Vector de la Fiebre Moteada de las Montañas Rocosas (Rocky Mountain spotted fever) (Benavides, 2014©)
  87. 87. Garrapatas exóticas…… (Benavides, 2014©)
  88. 88. Ixodes scapularis • Garrapata de patas negras del venado • Vector de enfermedad de Lyme - Borrelia (Benavides, 2014©)
  89. 89. Ixodes scapularis (Benavides, 2014©) http://www.oes.org/html/how_2_identify_different_ticks.html
  90. 90. Ixodes pacificus • Garrapata occidental de patas negras • Vector enfermedad de Lyme (Benavides, 2014©)
  91. 91. Ixodes ricinus • La garrapata europea (Benavides, 2014©) http://www.isw-tbe.info
  92. 92. Distribución geográfica aproximada de cuatro garrapatas de importancia médica del complejo Ixodes ricinus. Fuente: Swanson et al., (2006). (Benavides, 2014©)
  93. 93. Las garrapatas en Colombia (Benavides, 2014©)
  94. 94. Otras fuentes….. (Benavides, 2014©)
  95. 95. Algunas garrapatas que sí existen en Colombia • Ixodes pararicinus • Límites de Antioquia y Chocó • Posiblemente clasificada erróneamente en el pasado como Ixodes ricinus • Ixodes boliviensis (Benavides, 2014©)
  96. 96. Ixodes pararicinus (Benavides, 2014©)
  97. 97. Diagnóstico de hemoparásitos • Directo: Parasitológico – Capacidad de reconocer las diferentes formas parasitarias – Preparación adecuada de frotis sanguíneos – Coloración de Giemsa estandarizada – Gotas Gruesas y frotis capilar (Benavides, 2014©)
  98. 98. Porqué se requiere una Buena Coloración?  La visualización microscópica y la diferenciación celular en extendidos de sangre o médula ósea ha sido y será de gran importancia en el diagnóstico y pronóstico de muchas enfermedades  El reconocimiento de hemoparásitos requiere de un adecuado contraste, para facilitar su identificación  Para algunos hemoparásitos, la presencia de precipitados, puede entorpecer el diagnóstico (Benavides, 2014©)
  99. 99. La Selección del Tipo de Coloración • La coloración de Giemsa es la más sensitiva de las técnicas para la identificación de parásitos eritrocitarios, incluyendo las especies de Plasmodium y Babesia. • Lo importante es estandarizar la técnica para dar lugar a la diferenciación de los tonos del colorante; esta diferenciación requiere de tiempo en reposo (Benavides, 2014©)
  100. 100. La Coloración Hemacolor –Diff quick Ventajas del Kit de Hemacolor El Kit Hemacolor contiene: Resultados comparables con la tinción de Pappenheim Manipulación simple y rápida Excelente reproductibilidad Alto rendimiento PERO: Podrían no diferenciarse adecuadamente las estructuras parasitarias 7 (Benavides, 2014©)
  101. 101. Recomendación Final • Evalue cuidadosamente de forma rutinaria, la calidad de sus coloraciones • Escoja la coloración que le brinde una mayor reproducibilidad en sus resultados, acorde a los objetivos de su actividad Wright, Giemsa, Hemacolor? • En lo posible utilice láminas positivas reconocidas (Como?) 10 (Benavides, 2014©)
  102. 102. Metodos de Cuantificación en Lámina para Hemoparásitos (1) Identificación •El extendido de sangre debe ocupar las 2/3 partes de la lámina •El frotis debe extenderse con una pequeña gota de sangre permitiendo que este sea delgado •La coloración de elección es Giemsa •Ubicar el mejor lugar para el recuento (GR separados), evitando los bordes de la lámina (Benavides, 2014©)
  103. 103. Metodos de Cuantificación en Lámina para Hemoparásitos (2) Anaplasma marginale, Babesia bovis y Babesia bigemina: •Recuento de 20 campos microscopicos así: Campo GR Totales GR Parasitados 1 ... 20 Totales (Benavides, 2014©)
  104. 104. Metodos de Cuantificación en Lámina para Hemoparásitos (3) Trypanosoma vivax: •En 100 Glóbulos blancos se establece el total de Trypanosomas observados •Teniendo en cuenta el Recuento Total de Glóbulos Bancos obtenidos en el animal, se determina la parasitemia (Benavides, 2014©)
  105. 105. (Benavides, 2014©)
  106. 106. Uso del metanol (Benavides, 2014©)
  107. 107. (Benavides, 2014©)
  108. 108. Haematocrit centrifugation technique (HCT), o Prueba de Woo • Tomar la muestra de sangre periférica; Punta de la cola o un corte en la oreja. • Recolectar directamente en un capilar heparinizado. • Tapar un extremo y centrifugar durante 10 minutos. • Examinar motilidad a 10X o 40X. • Cortar el tubo justo por encima de las células incluyendo el "buffy coat”. • Expandir el buffy coat en un portaobjetos y examinar a x400 aumentos. • Diferenciar T. vivax por comportamiento. (Benavides, 2014©)
  109. 109. (Benavides, 2014©) Morfología diferencial de T. vivax y de T. evansi
  110. 110. (Benavides, 2014©) Motilidad Trips (videos) Trypanosoma vivax Trypanosoma theileri
  111. 111. (Benavides, 2014©) Gota Gruesa •Gota de sangre mediana •Extendida en forma circular con portaobjetos •Fijación al calor moderado 10 minutos •Deshemoglobinización con Agua corriente •Fijación con Metanol •Coloración con Giemsa Gºota
  112. 112. (Benavides, 2014©) Diagnóstico de Babesiosis • Diagnóstico indirecto: Serológico • Prueba Inmunofluorescencia Indirecta – Antígeno Caracterizado – Preparación de láminas de referencia – Dispendiosa • Prueba Inmunoenzimática Competitiva (ELISA) – Anticuerpos monoclonales específicos – Proteína Recombinante – Kits específicos para B. caballi y T. equi – Antígenos recombinantes para bovinos, equinos y caninos
  113. 113. (Benavides, 2014©) Trypanosomosis, Diagnóstico • Directo, Parasitológico – Prueba de Woo (diferenciación de especies) – Gota gruesa y frotis sanguíneos – Gota pendiente o gota fresca – Inoculación en ratón – Prueba PCR vivax, evansi
  114. 114. PCR específico, B. canis; E. canis (Benavides, 2014©)
  115. 115. La prueba Snap 4D (Benavides, 2014©) • Lyme Disease • Canine Anaplasmosis • Canine Ehrlichiosis • Hearthworm
  116. 116. Kit Snap 4Dx® Dirofilaria immitis, Anaplasma phagocytophilum , Anaplasma platys, Borrelia burgdorferi Ehrlichia canis y Ehrlichia ewingii Suero, plasma o sangre total canina Idexx Laboratories, 2013(Benavides, 2014©)
  117. 117. Kit de prueba Antigen Rapid E. canis Ab • Es un inmunoensayo cromatográfico • Detección cualitativa de anticuerpos de Ehrlichia canis – Suero – Plasma o – Sangre total canina. Bionote, Inc, 2009 (Benavides, 2014©)
  118. 118. Pruebas para el diagnóstico de Ehrlichiosis en caninos (Benavides, 2014©)
  119. 119. Otras pruebas de diagnóstico • Buffy coat • Naranja de acridina (Benavides, 2014©)
  120. 120. Pruebas moleculares (Benavides, 2014©)
  121. 121. Las pruebas de diagnóstico rápido (Benavides, 2014©)
  122. 122. Pruebas inmunocromatograficas (Benavides, 2014©)
  123. 123. Licencia Creative Commons Esta presentación está disponible para su consulta en SLIDEshare: http://www.slideshare.net/ EVBenavides/edit_my_u ploads O los textos en SCRIBD: http://es.scribd.com/efrain _benavides (Benavides, 2014©)
  124. 124. (Benavides, 2014©) Agradezco sinceramente su Amable Atención y estaré complacido de atender sus inquietudes.

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