Este documento describe la espectrofotometría y los espectrofotómetros. La espectrofotometría mide la luz absorbida o transmitida por una muestra en comparación con una muestra de referencia. Un espectrofotómetro usa una fuente de luz, un monocromador, una celda de muestra, un detector y un sistema de lectura para medir la absorbancia o transmitancia de una muestra a diferentes longitudes de onda. La ley de Beer-Lambert relaciona la absorbancia con la concentración de la muestra y el espes

1. Física Médica
Ingeniería Biomédica
Presenta
Serrano Pérez César Alexis

2. Espectrofotómetro

3. ¿Qué es Espectrofotometría?
Es el análisis óptico más usado. El
estudio se realiza comparando la
radiación absorbida o transmitida por
una solución que contiene una cantidad
desconocida de soluto, con una que
contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia.

4. Transmitancia
:
La transmitancia óptica que se
define como la fracción
de luz incidente, a una longitud
de onda especificada, que pasa a
través de una muestra.
Absorbancia
:
La absorbancia, es la cantidad de intensidad de luz
que absorbe la muestra.

5. Cubetas para Espectrofotómetro

6. La Ley de Beer-Lambert
Esta ley dice que si el diámetro de la cubeta donde se
encuentra la muestra o, la concentración de la misma
muestra se incrementan, la transmitancia decrece y la
absorbancia se incrementa.
A=aCL
A= Absorbancia.
L= Diámetro de la cubeta.
C= Concentración de la muestra.
a= Absorbitividad de la muestra, relacionada con la
longitud de onda.

7. ¿Qué es el espectrofotómetro?
Instrumento usado en el análisis
químico que sirve para medir, en
función de la longitud de onda la
relación entre valores de una misma
magnitud fotométrica relativos a dos
haces de radiaciones y la concentración
o reacciones químicas que se miden en
una muestra.

8. Diagrama de Bloques
Fuente de luz
Monocromador
Detector
Muestra
Amplificador
Sistema de
lectura

9. Fuente de luz
• Lámpara de tungsteno.
• Lámpara de deuterio/de hidrógeno.
• Lámpara de Nernst/Globar.
Monocromador
•
•
•
•
•
Abertura de entrada.
Colimador.
Medio de dispersión.
Lentes de enfoque.
Abertura de salida.
• Luz visible.
• Luz UV.
• Luz infrarroja.

10. Manejo de la
muestra
• Muestras líquidas o gaseosas.
• Celdas de cuarzo para UV.
• Vidrio común para luz visible.
Detecto
res
• Fototubos.

11. • Tubo fotomultiplicador.
• Fotocelda.
Amplifica
Sistema de
ción
lectura
• Indicador de absorbancia o transmitancia.

12. Instrumentos de doble haz y de haz
sencillo
Instrumento de haz sencillo
• Calibración con el blanco.
• Parámetros iniciales: cero y 100% de transmitancia; o cero a
∞ de absorbancia.
• Más barato.
Instrumento de haz doble
• Haz dividido.
• Incidencia en la referencia y en la muestra.
• Más costoso

13. Diagrama esquemático del espectrofotómetro de
doble haz

14. Circuito del Espectrofotómetro

15. COLORIMETRO: