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1.5. Hemograma Automatizado

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1.5. Hemograma Automatizado

  1. 1. Laboratorio de Análisis ClínicosT.L.C. Andrés Valle GutiérrezHemograma Automatizado
  2. 2. introducción«La Sangre es un fluido muy especial»J.W. Goethe en su obra Fausto
  3. 3. Introducción Desorden hematológico Dx de primera instancia es la citometría hemática Prueba mas rutinaria Se buscan maneras mas rápidas, fáciles y sencillas dellevarla acabo. Por ello así hemos evolucionado desde las antiguascámaras de Neubauer y los tediosos conteos manuales,hasta la modernidad de equipos de impedancia eléctricay citometria de flujo.
  4. 4. El estudio del paciente hematológicoAlteraciones enelementos formesAlteraciones a nivelplasmático Citometría Hemática Frotis de sangreperiférica Reticulocitos VSG Tiempos decoagulación Factores delcomplemento Determinación deanticuerpos COOMBS
  5. 5. ALGO DE HISTORIA
  6. 6. Siglo XIX,PrimerosConteosmanuales1952 LosCoulterinventanel CoulterCounterA53, Parker yHost utilizanel principiodeDispersiónÓptica,tiñendo alos G.r. y alos G.b derojo y azul.1960InicialaCMFActualidad, modernosequiposautomatizados,algunos de CMFrealizanINMUNOTIPIFICACION
  7. 7. Los hermanos coulter
  8. 8. Coulter Counter Model ARealizaba los conteos sanguíneos sin diferencial, en 10minutos pero no daba diferencial, por lo que los mejoro paracrear toda la serie Coulter Counter Model .
  9. 9. Beckman coulter LH 750
  10. 10. BHC
  11. 11. Clasificación deHemacitometros1 GENERACION:BH Manual de 5parámetros2 GENERACION:BHsemiautomatizada21 parámetros3 GENERACION:BH Automatizadade 18 parámetroscon 3 histogramas4 GENERACION:BH Automatizadade 18 parámetrosmas 3histogramas ydispersograma5 GENERACION:BHC, 28parámetros, CD4-CD8, Plaquetas,Reticulocitos y HbReticulada
  12. 12. Principio de coulter
  13. 13. Principios de los contadoresautomatizadosLos equipos automatizados para recuentos celulareshan sido elaborados teniendo en cuenta algunaspropiedades de las células:
  14. 14. Principios Son malasconductoras de laelectricidad, por loque aumentan laResistencia Eléctrica. Tienen variedad detamaños. Tienen una densidadcaracterizarle ydiferente para cadauna. Cada una refracta la luzcon una intensidaddiferente. Tienen composicióncitoquímica diferente. La relación núcleo –citoplasma es diferentepara cada célula.
  15. 15. Principio de CoulterSi el orificio es atravesado solamente por líquido diluyente, la resistenciaeléctrica medida por los electrodos es mínima y constante, pero cuando elorificio es atravesado por una célula sanguínea, se produce un aumento de laresistencia eléctrica y un cambio de potencial entre los electrodos.
  16. 16. Principio de coulter
  17. 17. Lectura en el Osciloscopio
  18. 18. Funcionamiento del equipoautomatizado
  19. 19. DILUSION1:300G.B.+>30 fL1: 15,000G.R. +>36fLPQT -<35 fLDILUSIONES
  20. 20. ERRORESEl error decoincidencia sepresenta cuandola aperturacoinciden doscélulas o más yson contadascomo una sola;en este caso sedisminuye elrecuento total yse aumenta elvolumencorpuscular delas células en ladilución.
  21. 21. OXIDACIONEn elHbnometro a520 – 540nmFe (++)Fe (+++)FérricoFerrosoFe enHbFerrocianuroRxLECTURAREACCIONHB
  22. 22. ADEUsada para diagnosticar anisocitosis en los eritrocitos,se observa en el histograma, Su V.R. es de 12 a 15%
  23. 23. C,V,S
  24. 24. Formula blanca Al realizar esta medición en 5.000-10.000leucocitos se determina el diferencial y siexiste la presencia de células anómalas.
  25. 25. DISPERSIÓN ÓPTICACada célula posee diferente volumen,morfología e índice de refracciónCélulaLáserDetector de ángulo amplioDetector deángulo cerradoAngulo 0
  26. 26. Cámara de Neubauer vs Analizador
  27. 27. ventajasRECUENTOS MANUALES RECUENTOS AUTOMATIZADOS75 a 85% de fiabilidad 95 A 98% de fiabilidad, repite la prueba 3veces para comprobarTécnicas ya conocidas RapidezReactivo más barato Menos gasto de reactivoFrotis y evaluación citomorfológicasanguíneaHistograma
  28. 28. desventajasRECUENTO MANUAL RECUENTO AUTOMATIZADOMuy comunes los errores humanos Ciertos parámetros se calculan a partir deldespeje matemático de fórmulas, lo queocasiona que algunos datos sean erradosAproximadamente el proceso dura entre45 minutos a 1 hora y mediaDiferencial poco confiable, tanto deplaquetas como de leucocitos, en sumorfologíaLaborioso proceso Costos
  29. 29. Histogramas hemáticos
  30. 30. HistogramaSon gráficas de frecuencias devolúmenes celulares.Eje X representa el volumencelular en fL.El eje Y; por ser relativo, no tieneun equivalente numérico real.
  31. 31. Histogramas eritrocitariosLa curva normal de glóbulos rojos es cónica, modal y se encuentrarepresentada en Tamaños de 60 a 110 FL, con un pico o curvasecundaria modal de plana a ligeramente cóncava con muy pocaaltura que llega a 200 FL.
  32. 32. HISTOGRAMA DE ERITROCITOSRBCRELNIoDISTRIBUCIÓN NORMALRBC 6.09HGB 17.5HCT 50.6MCV 83.1MCH 28.7MCHC 34.6RDW 13.010050 200 300130DEDOCUERPOArtefactosglóbulos rojosaglutinadosVCM x ADEfL
  33. 33. Desviaciones Curva desplazada a la izquierda Células con un registro menor a 60 fL Se observa en microcitosis, poiquilocìtosis,esquistocitos, leptocitos, dacriocitos,drepanocitos. Curva desplazada a la derecha Células con mas de 95 fL Se observa en macrocitosis, ovalocitos,eliptocitos, normoblastos y parásitos hemáticos
  34. 34. Micro y Macro
  35. 35. CURVA BIMODALSe presenta cuando existen dos poblaciones celulares, cadauna hace su media y se interceptan en las coincidencias detamaños.
  36. 36. ADE AUMENTADOSe observan en diferentes casos de anisocitosis e implican unregistro de pulsos con una dispersión en tamaños muy grandes,en algunos casos incluyendo pulsos menores de 30 fL que noquedan registrados en el histograma de rojos sino en el de
  37. 37. Arranque extenso en Y El recuento de plaquetas y de glóbulos rojos serealiza en la misma dilución y que luego los pulsosregistrados son discriminados únicamente portamaño, dejando para el histograma y recuento derojos los pulsos de tamaño superior a 30 FL, y los detamaño inferior quedan registrados como plaquetas. Se presenta cuando hay microcitosis, oesquistocitos, drepanocitos y leptocitos, soncontados como plaquetas aumentando su recuentoy disminuyendo el de rojos.
  38. 38. Arranque extenso en YSe presenta en trombocitosis omacrotrombocitosis o hay presencia de
  39. 39. ReticulocitosEl equipo los tiñe supra vitalmente y así creando un precipitadode azul nuevo de metileno y la maquina lo detecta por mediode sus detectores ópticos.
  40. 40. Histogramas plaquetariosEs una curva cónica sin distribución normal cuya distribuciónen tamaños está de2 a 20 FL.
  41. 41. HISTOGRAMA DE PLAQUETASDISTRIBUCIÓN NORMALNOMOGRAMA NORMALPLT 319PCT .239MPV 7.5PDW 16.3RELNIo:PLT FEMTOLITROS2 10 20
  42. 42. No hay arranque en xTrombocitopenia
  43. 43. Extendida 25-30 FLArranque extenso en leucocitos
  44. 44. PLAQUETAS EN TOPETrombocitosis
  45. 45. HISTOGRAMA LEUCOCITARIOLos glóbulos blancos se agrupan en tres curvas claramente definidas y estas configuranla arquitectura normal.• Curva de linfocitos cóncava 50-100 fL• Curva de mononucleares plana a cóncava 100- 150 fL.• Curva de granulocitos cóncava 150-380 fl
  46. 46. HISTOGRAMA DE LEUCOCITOSRecuento total de Leucocitos90 160LinfocitosMO – MID = Eosinófilo, Basófilo, MonocitoMO o MIDGranulocitosNeutrófilosEJEMPLO DE ANALISISDISTRIBUCIÓN NORMALWBC 8.3LY # 2.5MO # .8GR # 5.150 100 300200 400WBCRELNIo.
  47. 47. Agranulocitos
  48. 48. LINFOCITOPENIALinfocitopenia y Granulocitosis
  49. 49. INTERFERENCIA CELULARConteo de precursores celulares, parásitos,etc.
  50. 50. Nk linfocitosis
  51. 51. GRANULOCITOPENIAUNION DE LA CURVA MONO CON LA GRANULOCITICA
  52. 52. Aumento cónico sin perdida de arquitecturaLeucocitosis, Linfocitos atipicos, monocitos activados.
  53. 53. Presencia de blastos
  54. 54. Granulocitos
  55. 55. GRANULO-MONOCITOSISUN AUMENTO EN ALGUNA DE ESTAS 2 LINEAS PUEDEOCACIONAR LA UNION ENTRE AMBAS CURVAS.
  56. 56. Granulocitopenia
  57. 57. NeutrofiliaHAL REVISAR EL FSP :Neutrofilia, aumento de BANDASHIpersegmentados
  58. 58. Neutrofilia-MonocitopenicaNEUTROFILIA ESPECIALMENTE BANDAS
  59. 59. Procesos malignos Medula oseaAlteración hemática completa
  60. 60. BloquesLos bloques en la distribución del histograma se presenta cuando el númerodecélulas está disminuido (-1000) y se hace necesario aumentar los intervalos
  61. 61. leucocitosisValores sobrepasan a los que la maquina puedecontarEntre 2000 – 100 000
  62. 62. INTRODUCCION A LOSDISPERSOGRAMAS
  63. 63. dispersogramaGráfico que representa la distribución de dos variables en una población de muestra.Una variable se representa gráficamente en el eje vertical; la otra en el horizontal.Un dispersograma demuestra el grado o tendencia de presentación de las variables enrelación mutua.
  64. 64. DISPERSOGRAMACuadrante 1 BlastosCuadrante 2LinfocitosCuadrante 3MonocitosCuadrante 2LinfocitosCuadrante 4NeutrofilosCuadrante 6EosinófilosCuadrante 5Cel. Dañadas
  65. 65. cuadrantes Cuadrante 1: Tenemos en este grupo núcleos denormoblastos, agregados plaquetarios,macroplaquetas, forma adultas de plasmodium,sombras nucleares y células de difícil hemólisis comodrepanocitos. Cuadrante 2: Normalmente se ubican los linfocitos enla región central derecha, la aparición de células en laregión superior e inferior derecha hacen sospecharlapresencia de linfocitos atípicos. En la zona superiorcentral se sospecha la presencia de blastos. Cuadrante 3: Encontramos el registro de monocitoshacia la región central derecha, la presencia decélulas en la región central superior hace sospecharla presencia de blastos.
  66. 66. cuadrantes Cuadrante 4: Se ubican en la zona central el registro normal deneutrófilos; la aparición de células inmaduras de esta línea celular seregistra en la región superior de dicho cuadrante; la presencia deneutrófilos de registro pequeños y los macropolicitos, se da en laparte inferior del mismo cuadrante. Cuadrante 5: normalmente no presenta células, cuando allí poralguna razón se encuentran células estas pueden relacionarse concélulas dañadas de sangre envejecida. Cuadrante 6: En la región central de este cuadrante podemosencintrar el registro deeosinòfilos, así mismo por la densidad de lospuntos registrados podemos sospechar el aumento de este tipo decélulas
  67. 67. ANORMALIDADES
  68. 68. DISPERSOGRAMA ANORMAL41. Blastos2. Granulocitosinmaduros3. Neutrófilosenvejecidosy lesionados4. Plaquetasgigantes5. Eritrocitosnucleados6. LinfocitosVariantes7. Blastos8. LinfocitosVariantes9. Blastos59278361
  69. 69. NEUTROPENIA LINFOCITOSISVOLUMENWBCDF1
  70. 70. GRANULOCITOS INMADUROSVOLUMENDF1WBC
  71. 71. LINFOCITOS ATÍPICOSVOLUMENDF1WBC
  72. 72. NEUTROPENIA LINFOCITOSIS(ATÍPICOS)VOLUMENDF1WBC
  73. 73. EOSINOFILIAVOLUMENDF1WBC
  74. 74. GRANULOCITOS INMADUROSVOLUMENDF1WBC
  75. 75. ¿Dudas?
  76. 76. Bibliografía Fundamentos de Hematología, Dr. Guillermo Ruiz Arguelles. Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, JohnBernard Henry. Hematología: La sangre y sus enfermedades, Dr. José CarlosJaime Pérez. Hemograma, Como hacer e interpretar, Dr. Raimundo AntonioGomes Oliveira. Hematología, Guía práctica para el diagnóstico microscópico, Dr.Mathias Freund. Artículo de revisión, Semiología de la Citometría hemática,Revista de la facultad de medicina UNAM, Dr. Rafael HurtadoMonroy.

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