Extraccion del ADN

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Extraccion del ADN

  1. 1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y LA SALUD CARRERA DE ENFERMERIA CATEDRA DE BIOQUIMICA EXPERIMENTO: EXTRACCION CASERA DEL ADN ESTUDIANTE: GUERRERO ALLISON DOCENTE: BIOQ. GARCÍA CARLOS MSC CURSO: PRIMER SEMESTRE “A” 2013
  2. 2. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN Practica de Laboratorio N0 1 Tema: Extracción Casera del ADN con el Hígado de Pollo. Objetivo: Observar sin ayuda de ningún instrumento óptico (microscopio) el ADN, utilizando únicamente materiales caseros cuyo costo no es alto. Materiales: Licuadora Sustancias: Cloruro de sodio NaCl, Recipiente de vidrio Hígado de pollo Tubos de ensayo Detergente líquido Cuchillo Jugo de piña Tabla de picar Alcohol 96° Cuchara Agua H2O Colador Sal Gráfico: Materiales
  3. 3. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN Sustancias
  4. 4. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN Procedimiento: 1.-Primeramente cortamos en pequeños trozos el hígado de pollo, luego lo colocamos en la licuadora y agregamos una taza de agua con una pizca de sal y procedemos a licuar durante 15 segundos. 2.- Luego la mezcla obtenida se cierne con ayuda del colador para así eliminar cualquier partícula que pueda interferir. 3.-Ahora vertemos la mezcla en el vaso de precipitación y le agregamos dos cucharitas de detergente líquido (en este caso hemos utilizado suavitel) y revolvemos suavemente para así no formar espuma esto lo hacemos con ayuda de una cuchara o un agitador. 4.-Dejamos reposar durante 5 a 10 minutos. Sería conveniente que probaras con distintos detergentes ya que algunos no funcionarán tan bien como otros. 5.- Colocamos la mezcla en dos tubos de ensayos. 6.- Agregamos unas gotas o cucharada de jugo de piña en cada tuvo de ensayo con su respectiva mezcla y revolvemos con cuidado lentamente por unos 5 minutos. Ya que si mezclamos con demasiada rapidez o mucha fuerza corremos el riesgo de romper el ADN, con lo que no podríamos observarlo. 7.- Inclinamos los tubos de ensayos de la mezcla y vertimos muy lentamente el alcohol en una proporción igual a la que hay en la mezcla, de modo que se forme una capa sobre la misma. 8.- Esperamos unos minutos y podremos observar unos filamentos blancos dentro del alcohol y que se elevan a la interface. Puedes retirarlo con la ayuda de un palillo. En este caso las proteínas y la grasa se quedan en la parte acuosa de la mezcla y el ADN asciende hasta llegar al alcohol.
  5. 5. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN Observaciones: Observamos unos filamentos blancos los cuales fueron los que subieron al alcohol, en este caso representan el ADN.
  6. 6. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN Conclusiones: Al realizar el procedimiento adecuadamente, resulta que las fibrillas de ADN comenzaron a salir, de un color blanco precipitado por sobre el alcohol (mezcla Heterogénea). El agua con una pizca de sal es una mezcla isotónica. Es para lo que se va a sacar el hígado de pollo sufra lo menos posible.En la licuadora se separan las células unas de otras, en esto ayuda también el detergente. El jugo de piña, corta las proteínas y destruye a las células, ya que se trata de romper lo que hay dentro de las mismas, dejando intacto el ADN y al añadir el alcohol se consigue separar el ADN, que tiene más afinidad con el alcohol que con el agua, lo que hace posible ver el ADN. Recomendaciones: - Usar mandil - Manipulación con precaución de objetos corto punzantes como: el - Filtrar la mezcla, para eliminar partículas de gran tamaño - Probar el experimento con varios suavizantes - Revolver suavemente la mezcla sin formar espuma - Mezclar lentamente para evitar que se rompa el ADN
  7. 7. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN Cuestionario: 1. ¿Para qué sirve la pizca de sal que agregamos en la mezcla? La sal en disolución actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que hace que precipiten y se separen más fácilmente del ADN. 2. ¿Para qué utilizamos el detergente? El detergente (O gel o champú) utilizado en el experimento tiene como función destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando; el detergente disuelve las grasas, que es el componente principal de la membrana plasmática y nuclear de las células (es el mismo principio por el que el gel limpia la grasa de nuestra piel). Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior. La licuadora ayuda en la rotura de estas células. 3. ¿Para qué se utiliza el alcohol? El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. 4. ¿Para qué se añaden enzimas o zumo de piña? Las enzimas son unas sustancias que atacan a las proteínas de las células, lo que permite romperlas y separarlas del ADN, que es el material que buscamos. Si no disponemos de enzimas, podemos utilizar zumo de piña (el cual contiene papaína, sustancia que degrada las proteínas).
  8. 8. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN Webgrafía http://platea.pntic.mec.es/~cmarti3/bio/ADN/adn/ppal.htm http://www.cienciasmc.es/web/u6/contenido1.3.3_u6.html Autoría Isabel Jaramillo Cristina Yunga Allison Guerrero Allison Guerrero FIRMA

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