1. 自宅実験用DIY培養液
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2. 背景１：DIY(食品グレード)培養液について
過去の実験で、基礎培地(DMEM)はｸﾞﾘｰﾝﾀﾞｶﾗで6割までの置換
が可能だった。
しかし一般家庭での細胞培養には、培地をすべて市販の原料で
調製できる必要がある。
※研究用試薬 = 一般人は買えない。できた物を食べるのもNG
一般人も買える = 食品添加物か食品。用量を守れば食べてもOK (*ﾟ∀ﾟ)=3
そこで、基礎培地として一般的なDMEMおよびL15培地を、すべ
て市販の材料で調製し、細胞培養をしてみる。

3. 背景２：DMEMとL15の組成
ブドウ糖、アミノ酸、ビタミンB類はDMEMとL15で共通だが、ミネラル
分は異なる。
DMEM⇒https://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/learning-center/media-formulations/dme.html
L15⇒ https://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/learning-center/media-formulations/l-15.html
DMEM
L15
アミノ酸
20種類
アミノ酸
20種類
水溶性
ビタミン
(B類)
水溶性
ビタミン
(B類)
グルコース
(ぶどう糖)
グルコース
(ぶどう糖)
CaCl2, MgSO4, KCl, NaCl,
NaHCO3, NaH2PO4, 硝酸鉄
CaCl2, MgCl2, MgSO4, KCl,
NaCl, KH2PO4, Na2HPO4

4. 材料1（糖分・アミノ酸・ビタミンB類)
1粒0.32g、アミノ
酸0.22g、残りは糖
質や繊維
1粒0.2g=1個で
DMEM 2L分に。
シェラックの殻
グルコース(パ
ン焼き
用)4.5g/Lが必
要https://item.rakuten.co.jp/fancl-shop/5272/?i
asid=07rpp_10095___e4-jpeuuk00-aev-615
07def-77bf-41df-8809-18631a826757
https://item.rakuten.co.jp/
kenkocom/x252760h/
https://item.rakuten.co.jp/a
uc-garlic/budoutou-3000/

5. 材料2（ミネラル分・DMEM)
https://item.rakuten.co.jp/m
amoru/4571474270191/
https://item.rakuten.co.jp/m
atsubayakuhin/10000000/
CaCl2 (塩化
カルシウム)
NaCl(食塩)
https://item.rakuten.co.jp/
jyugo/t-4987306019126/
KCl(減塩食塩)
NaClとKClが1:1で混
ざっている
MgSO4 (硫酸
マグネシウム)
1:1モル量混合により
NaH2PO4を生成する
※硝酸鉄は省いた
・要求量がごく微量
・硝酸鉄は食品添加物ではないので一般に買えない。
・一般入手が可能な塩化鉄での代替は検討可能
重曹
https://www.amazon.co.jp/%E
3%82%AA%E3%83%AB%E3
%83%88%E3%83%AA%E3%
83%B3%E9%85%B8-%E3%8
3%AA%E3%83%B3%E9%85
%B8%EF%BC%98%EF%BC
%95%EF%BC%85%E3%80%
8C%E9%A3%9F%E5%93%81
%E6%B7%BB%E5%8A%A0%
E7%89%A9%E3%80%8D%E
F%BC%95%EF%BC%90%EF
%BC%90%EF%BD%87/dp/B0
062HL4PU
リン酸

6. 材料2（ミネラル分・L15)
https://item.rakuten.co.jp/
mamoru/4571474270177/
MgCl2 (塩化
マグネシウム)
https://item.rakuten.co.jp/
kurimoto/100001011/
NaCl(食塩)
https://item.rakuten.co.jp/
jyugo/t-4987306019126/
KCl(減塩食塩)
NaClとKClが1:1で混
ざっている
重曹
https://www.amazon.co.jp/%E
3%82%AA%E3%83%AB%E3
%83%88%E3%83%AA%E3%
83%B3%E9%85%B8-%E3%8
3%AA%E3%83%B3%E9%85
%B8%EF%BC%98%EF%BC
%95%EF%BC%85%E3%80%
8C%E9%A3%9F%E5%93%81
%E6%B7%BB%E5%8A%A0%
E7%89%A9%E3%80%8D%E
F%BC%95%EF%BC%90%EF
%BC%90%EF%BD%87/dp/B0
062HL4PU
リン酸
1:1モル量混合により
NaH2PO4を生成する
https://item.rakuten.co.jp/m
amoru/4571474270191/
MgSO4 (硫酸
マグネシウム) 炭酸カリウム
1:2モル量混合により
KH2PO4を生成する

7. 等倍溶液 20倍溶液
合成手順
DMEMの場合:
食塩 0.58g
重曹 0.37g
減塩食塩 0.13g
L15の場合:
NaCl 0.95g
減塩食塩 0.10g
水125ml
アミノ酸
サプリ1錠
+
水99ml
ビタミンB
サプリ1錠
合成にあたっての基本方針
・食塩、グルコース、アミノ酸など、量を要する材料は等倍溶液を作る。
・ビタミンB類、他ミネラルなどの微量成分は、 20倍溶液を作り、これを 20倍希釈する。
・リン酸化合物は、リン酸とミネラルから合成する
DMEMの場合:
CaCl2 0.50g
MgSO4 0.25g
重曹 0.19g
10倍希釈したリ
ン酸 1.4ml
L15の場合:
CaCl2 0.28g
MgSO4 0.20g
MgCl2 0.19g
K2CO3 0.06g
10倍希釈したリ
ン酸 1.4ml
等倍溶液と20倍溶液を19:1で混ぜ、ぶどう糖4.5g/Lを追加して完成

8. 実験の様子
・サプリメントの賦形剤(固め剤)で濁るので、濾過が必要。
・液が落ち着いてから濾過しないと濾紙が詰まるので注意
皮むきで支
えている
濾過済み
等倍溶液

9. 細胞培養実験（参考）
DIY-DMEMで初代培養した鶏胚の心
臓細胞：
細胞の接着と増殖を確認した。
(培養実験 by twitter @thesow41)
https://www.nicovideo.jp/watch/sm33104702
※L15での細胞培養は実験中

10. このマニュアルは編集できます
https://docs.google.com/presentation/d/1yMiVtb4FKSDWILUBrjY
_IfBOyjEkKe3WUeXFh8GVpFA/edit#slide=id.g7d38f645b5_0_0
編集可能な
公開ファイル⇒
CookPadでも公開
https://cookpad.com/recipe/5765268