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Interpretación de pruebas dx circovirus
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Interpretación de pruebas dx circovirus

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  • 1. Circovirus Porcino PCV2 Interpretación de pruebas diagnósticas Diplomado en Medicina y Producción Porcina. FMVZ-UNAM 2013-2014 Juan Manuel Palacios Mc
  • 2. Nomenclatura • PMWS. Denominación de una enfermedad en específico, descrita en Canadá 1996 • PCVD´s Grupo de enfermedades ligadas a PCV2, Europa 2004 • PCVAD. En ocasiones referida a una enfermedad en específico (PMWS) y en ocasiones a infecciones por PCV2 en general.
  • 3. La enfermedad continua siendo multifactorial • Aunque PCV2 continua siendo un factor necesario en la presentación de las infecciones asociadas (PCVAD), no es suficiente en la mayor pate de infecciones experimentales y naturales.
  • 4. 1a semana post-infección El virus inicia su replicación pero es dificil detectarlo en tejidos. Se inicia el desarrollo de la viremia y se alcanza un estado preclínico de tipo subclínico. LA RESPUESTA DE IMNUNIDAD INNATA SE VE AFECTADA 2-3 semanas post-infección La viremia continua e incrementa la cantidad de virus. PCV2 se detecta en tejidos linfoides y otros órganos Continua un estado preclínico/subclínico SE DESARROLLAN RESPUESTAS INMUNES ESPECIFICAS A PCV2 EFICIENTE De 3 semanas en adelante INEFICIENTE La viremia declina y la infección se controla La replicación viral continua con altas cargas virales La cantidad de PCV2 en tejidos es baja Lesiones leves Se encuentran cantidades altas a moderadas de virus en tejidos linfoides Lesiones moderadas a intensas El sistema inmune se afecta ligeramente de manera reversible Cambios significativos en el sistema inmune e inmunosupresión INFECCION SUBCLINICA PCV2 AD
  • 5. Condiciones para realizar un diagnóstico individual de PCV2 • 1.- Presencia de signos compatibles incluyendo retraso en el crecimiento. • 2.- Presencia de lesiones linfoides moderadas a severas • 3.- Detección de cantidades moderadas de PCV2 en tejidos Sorden, 2000; Segalés et al., 2005
  • 6. Hallazgos clínicos • Los cerdos se afectan entre las 7 y 15 semanas de edad con reducción en condición corporal, fiebre, palidez, diarrea y ulcera gástrica. • ( Harding 2004, Segalés y Domingo 2002, Madec 2008)
  • 7. Signología consistente • Depresion, letargia y anorexia Henry S. 2008
  • 8. •Palidez Henry S. 2008
  • 9. • Dermatitis/PDNS – Moderada Henry S. 2008
  • 10. No en todos los casos PDNS es representativo de una infección por PCV2 Síndrome de Dermatitis y Nefropatía Porcina • • • • • Descrito originalmente en Inglaterra en 1993. Su diagnóstico incluye 2 criterios: 1) Lesiones necrotizantes en piel (principalmente en miembros posteriores y región perineal) y/o inflamación renal con petequias generalizadas en el área cortical. 2) Vasculitis sistémica necrotizante y glomerulonefritis fibrinosa. No se incluye la detección de PCV2 Hélie P, Drolet et al 1998
  • 11. Etiología de PDNS • Diversos virus (PRRS, PCV2, SIV, Citomegalivirus) • Bacterias: P.multocida, S.suis, B.bronchiseptica, Arcanob acterium pyogenes, Salmonella sp. E. coli) • Reacción alérgica catalogada con Hipersensibilidad tipo III con deposición de complejos Ag-Ac en diversos sitios.
  • 12. Su asociación con PCV2 es coincidental y no siempre relacionada. • PDNS in PCV2 negative pigs. Miller J. AASV 2010 Procc. Pp 485-488 • Evaluation of induction of PDNS with negative results for PCV2. Krakowa S. et al. 2008 AJVR 69 #12 • • • • Otras causas: Virus de Influenza porcina. Citomegalovirus porcino Toxina Shiga de E. coli cepa O121
  • 13. Hallazgos patológicos • • • • • Pulmones moteados y no colapsados. Incremento de linfonódulos Atrofia de timo. Lesiones multifocales en riñón. Lesiones hepáticas (Incremento en tamaño, decoloración e ictericia) • Ulceración gástrica
  • 14. Incremento en linfonódulos Henry S. 2008
  • 15. Nefritis Henry S. 2008
  • 16. Neumonía con edema interlobular Henry S. 2008
  • 17. Lesiones histológicas • Depleción linfoide. • Atrofia de timo • Neumonía intersticial con infiltración peribronquiolar. • Edema intersticial. • Infiltración linfohistiocítica hepática
  • 18. PCV2AD es una afección del sistema inmune. Ganglio afectado Ganglio normal
  • 19. Nódulo linfático inguinal de cerdo afectado, presencia moderada a severa del ácido nucleico de PCV2 en el citoplasma de macrófagos.Depleción linfocítica e inflamación granulomatosa (J. Segalés 2005)
  • 20. Diagnóstico de hato • 1.- Incremento significativo de mortalidad y desechos post-destete vs periodos pasados. • 2.- Incremento de la mortalidad en un 50% comparado al nivel de las granjas regionales. • 3.- Diagnóstico individual en 1/5 cerdos a la necropsia.
  • 21. Pruebas Serológicas • Las pruebas serológicas se utilizan para determinar niveles de inmunidad pasiva en los lechones, o determinar alguna reacción al antígeno vacunal, sin embargo no son utilizadas con fines diagnósticos ya que no pueden diferenciar antígenos vacunales de infecciosos y la mayor parte de animales siempre presentan títulos positivos.
  • 22. La respuesta serológica varía en cada granja
  • 23. Respuesta humoral a PCV2. Existen métodos para medir la respuesta de IgM ó IgG
  • 24. Respuestas humorales en granjas vacunadas y no vacunadas. Afectada con PCV2AD Subclínica Fraile et al, 2012
  • 25. Detección de antígeno • Una vez que se detectaron los signos clínicos y lesiones específicas se procederá a la detección de antígeno en órganos linfoides y pulmón. • Esto se puede hacer por técnicas de PCR, Inmunohistoquímica o hibridación in situ.
  • 26. Inmunohistoquímica
  • 27. Hibridación In situ
  • 28. PCR a partir de tejidos
  • 29. La prueba de rtPCR cuantitativa indicará el nivel de partículas en los animales afectados a un punto de corte de 1.0 x 104 partículas/ml.
  • 30. Para el caso de PCV2 de tipo subclínico los elementos diagnósticos serán; • Detección y nivel de partículas virales en tejidos. • Grado de lesión en ganglios por histopatología
  • 31. Grados de depleción linfoide. Ganglio Normal Ganglio Afectado-1 Ganglio Afectado-2 Trujano M., 2013
  • 32. Conclusiones • El diagnóstico de las enfermedades asociadas a PCV2 se deberá hacer siempre basados en los tres puntos de diagnóstico; signos, detección del antígeno y grado de lesión histopatológica. • El uso de pruebas de ELISA está limitado como elemento diagnóstico. • Los casos de PCV2 de tipo subclínico se diagnostican por la demostración del antígeno y el grado de lesión en tejidos ( ganglios)