2. Inseminación Artificial
Es un moderno método de fecundación y se
define como la transferencia de
espermatozoides del macho a la hembra por
medios diferentes a la monta natural.
Puede realizarse con semen fresco, diluido o
congelado.
3. Antecedentes
El primer informe sobre el uso de esta
biotecnología en animales domésticos data de
1778, cuando el fisiólogo italiano Lázaro
Spallanzani obtuvo cachorros después de
inseminar una perra con semen fresco.
En la actualidad y dado que la reproducción y
crianza de perros es una afición de distribución
mundial, la preservación de semen y la
inseminación artificial en la especie canina se ha
constituido en tema de alto interés para los
médicos veterinarios y criadores de muchos
países.
4. Razones por las cuales usar IA
En cruzas difíciles de reproducir, ya sea por la anatomía de las razas o por la diferencia
del peso de los sementales sobre las hembras al momento de la cópula.
Cuando se requiere del uso de un semental que se encuentra a distancia de donde está la
hembra.
El uso de semen importado o cuando es difícil la presencia de alguno de los progenitores.
Para evitar enfermedades de transmisión sexual.
En perros agresivos para mantener la integridad de alguno de los reproductores.
En perros de óptima calidad genética que sean incapaces de montar por edad,
eyaculación precoz o por problemas musculares o locomotores, tanto del semental, como
de la reproductora.
Problemas de tipo conductual, tales como libido deficiente.
En el caso de las hembras, principalmente a anormalidades en la vagina y vulva.
Problemas de conducta como inexperiencia, timidez, apatía o aversión hacia la hembra.
Incapacidad de la hembra a dejarse montar.
En ocasiones, cuando viven juntos, la indiferencia sexual de los reproductores, el macho
no quiere montar a la hembra.
Es más económico el traslado de semen que el de reproductores.
5. Obtención del Semen
El semen se obtiene mediante tres técnicas:
vagina artificial, electroeyaculador y
manipulación digital.
La más frecuente en perros es la
manipulación digital.
6. Material
Vagina artificial de látex o plástico, o un
recipiente estéril de boca ancha y bordes
redondeados.
Tubo graduado.
Lubricante estéril no espermicida.
Guantes.
Microscopio.
Material de limpieza
7. Manipulación Digital
Limpiar la zona prepucial y abdominal.
Para facilitar la eyaculación es útil contar con una hembra en
celo.
El MVZ realiza una estimulación leve del bulbo del pene
mediante masaje suave a través del prepucio, y antes que se
produzca una erección total, procederá a desenvainar el pene
por detrás del bulbo.
Una vez retirado el prepucio se realiza una presión sostenida
en caudal del bulbo. En este momento el pene se gira 180
grados hacia atrás, simulando el abotonamiento en la monta
natural, continuándose con la presión sobre el bulbo peneano
hasta que empiece a eyacular.
8. La primer fracción que el animal eyacula
es la preespermática. Le sigue la fracción
espermática. Luego de la fracción
espermática comienzan movimientos
pulsátiles de la uretra, en este momento
comienza a eyacular la tercera fracción.
Terminando así con la colección del
semen y se procede con la evaluación del
mismo.
10. Técnicas de Inseminación
Inseminación Intravaginal
Inseminación Intrauterina
- Transcervical.
- Mediante cirugía.
11. Inseminación Intravaginal
Semen fresco o refrigerado.
Se deposita en la vagina craneal, cerca del
cuello uterino.
Material:
- Jeringa de 12 ml.
- Catéter urinario flexible o pipeta de
inseminación plástica.
- Guantes quirúrgicos.
12. Inseminación Intrauterina
Semen congelado y descongelado.
Se introduce directamente en el útero.
Transcervical:
- Requiere el empleo de un catéter rígido que se
introduce en forma ciega dentro de
la vagina y cérvix.
- Otro método consiste en el pasaje de un catéter a
través del cérvix, mediante la visualización endoscópica
de la abertura cervical externa.
13. Mediante Cirugía:
El cuerpo del útero es expuesto a través de
una incisión caudoventral sobre la línea
media, dentro de la cavidad abdominal.
Se vierte el semen lentamente dentro de la
cavidad uterina y se permite que progrese
hacia proximal dentro de los cuernos.
14. Dosis Inseminante
Se recomienda hacer 3 inseminaciones:
1) A las 24 horas iniciando el ciclo estral.
2) A las 48 horas.
3) A las 72 horas.
- Mínimo 150 millones de espermatozoides
por dosis inseminante.
15. Diluyentes
Perro: tris-acido cítrico-glucosa-glicerol,triladyl
Se conserva congelado a -196 C°
Dosis de 1/6 millones de espermarmatozoides
Semen se descongela a baño maria a 37°C
18. Antecedentes
La recolección del semen y la inseminación
artificial en gatos fue descrita por primera
vez hace más de 30 años.
Los procedimientos todavía no son
utilizados rutinariamente.
Y tampoco están tan bien desarrollados
como en otras especies.
19. Obtención del Semen
El método más utilizado es la electroeyaculación.
Se puede utilizar la vagina artificial, pero no es muy
recomendada debido a temperamento y
comportamiento de esta especie.
Los espermatozoides también se pueden colectar de
los epidídimos luego de la castración quirúrgica,
pos-mortem, o por lavado vaginal después del
servicio natural.
20. Electroeyaculación
Se necesita un estimulador eléctrico y
una sonda rectal.
El gato macho tiene que ser anestesiado
durante el procedimiento. Para anestesiar
a los gatos se utiliza medetomidina
(Domitor® vet.) 80 mg/Kg de peso
corporal subcutáneo, en combinación con
clorhidrato de ketamina (Ketalar®) 5
mg/Kg de peso corporal intramuscular.
21. La sonda rectal tiene tres electrodos longitudinales.
Esta es lubricada e introducida 7 - 9 cm en el recto con
los electrodos dirigidos ventralmente. Debe tenerse la
precaución de evacuar las heces del recto. Una
corriente eléctrica débil estimula los nervios que
inervan los órganos reproductivos. Los estímulos
eléctricos se aplican intermitentemente y son de
frecuencia baja. un total de 80 estímulos eléctricos a
partir de 2 - 5 voltios aplicados en tres series (30, 30 y
20 estímulos).
En cada estimulación el gato responde con la extensión
rígida de las patas traseras. Si esta reacción no se
observa a 2 V o con un estímulo más fuerte, esto indica
que los electrodos no están en la posición correcta en
el recto, o que hay interferencia por heces.
22. Para colectar el semen, el pene del gato es
extraído aplicando una presión suave en su
base, y el eyaculado se recoge en el tubo de
ensayo precalentado que se ha colocado
sobre el glande del pene.
23. Vagina Artificial
Se permite al gato montar a una hembra
en estro y la vagina artificial se desliza
sobre el glande del pene del macho
mientras este empuja buscando la
abertura de la vulva.
24. Otros Métodos
Epidídimo: La cola del epidídimo es
separada de los testículos y colocada en un
buffer apropiado (por ejemplo, Ham’s F-10 ó
PBS) a 37ºC y los espermatozoides son
liberados cortando la cola del epidídimo en
rebanadas finas.
Lavado Vaginal: con solución fisiológica
usando una jeringuilla con un extremo
redondeado, puede utilizarse después del
servicio para descubrir si el gato macho
produce espermatozoides.
25. Efecto del Método de
Recolección
El eyaculado recolectado por
electroeyaculación tiene generalmente un
volumen mayor, una concentración y un
número total de espermatozoides más
bajos, y un pH más alto que las muestras
recogidas por vagina artificial.
26. Evaluación del Semen
Volumen
Motilidad Espermática
Color
Concentración y número total de
espermatozoides
Morfología Espermática
Fosfatasa alcalina
27.
28. Diluyentes para
Conservación de Semen
Tris-yema de huevo
Trealosa-glicerol-yema de huevo
- Refrigerado a 4°C
- Congelado a -196°C