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INCIDENCIA<br />Pulmón (25%)<br />Próstata (15%)<br />Colon y recto (10%)<br />Pulmón (26%)<br />Mama (14%)<br />Colon y r...
TRATAMIENTO<br />Radiación <br />Procesosquirúrgicos<br />Novo J., 2005<br />García J., 2003<br />Quimioterapia sistémica<...
Catharanthusroseus<br />AGENTES ANTICANCERIGENOS <br />1. Alcaloides de la Vinca<br />Podophyllumpeltatum<br />2.Epipodofi...
Carrión, 2007<br />
Gynoxis verrucosa <br />Malangón O. 2007<br />
Gynoxis verrucosa <br />El extracto metanólico mostró en CHO-K1<br />Citotóxico a  &lt;100ug/ml <br />Citostático a &lt;10...
Micronúcleos con bloqueo de citocinesis  (CBMN)<br />Micronúcleos evalúa la inestabilidad genética, indica rotura cromosóm...
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MATERIALES Y METODOS <br />
24 Horas<br />24 Horas<br />Tratamiento<br />Siembra<br />Cultivar células D-384<br />24 Horas<br />24 Horas<br />Tinción ...
RESULTADOS Y DISCUSIÓN<br />Figura.3.1.Efecto del extracto G. verrucosa en la proliferación celularT. de DUNETT. *P&lt;0.0...
INDICE DE DIVISION NUCLEAR <br />Figura2.Índice de división nuclear T. de DUNETT. *** P&lt;0.00001; **P&lt; 0.00002; *P&lt...
RESULTADOS Y DISCUSIÓN<br />Estableciendo que el efecto puede variar dependiendo de la naturaleza del estudio .<br />La di...
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RESULTADOS Y DISCUSIÓN<br />Las lactonas sesquiterpénicas afectan la formación del huso mitótico lo que podría indicar el ...
Conclusiones<br />El extracto metanólico de Gynoxis verrucosa a las concentraciones de 10, 20 y 25ug/ml no tiene un efecto...
GRACIAS<br />
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Evaluación de la actividad genotóxica del extracto metanólico de Gynosis verrucosa mediante el ensayo Micronúcleos con bloqueo de Citocinesis en la línea celular Astrocitoma cerebral (D-384)

  1. 1. Universidad Técnica Particular de Loja<br />Evaluación de la actividad genotóxica del extracto metanólico de Gynosis verrucosa mediante el ensayo Micronúcleos con bloqueo de Citocinesis en la línea celular Astrocitoma cerebral (D-384)<br />Diana J. Herrera Torres <br />Director:<br />Dr. Natalia Bailón M. <br />
  2. 2. DEFINICIÓN <br />El cáncer se caracteriza por un crecimiento incontrolado y la propagación de células anormales<br />Macdonald F. et al ,2004<br />La muerte por cáncer en 2007 fueron 7.6 millones personas <br />En el 2008, los diagnósticos de cáncer fueron de 1.4 millones de personas. <br />
  3. 3. INCIDENCIA<br />Pulmón (25%)<br />Próstata (15%)<br />Colon y recto (10%)<br />Pulmón (26%)<br />Mama (14%)<br />Colon y recto (10%)<br />Iriarte, 2008<br />Brown, 2008<br />Mujeres: mama y cérvix <br />Hombres: próstata y estómago.<br />En 1997 al 2002<br />Mujeres: cérvix invasor, mama, piel, estomago<br />Hombres: Estómago, próstata, leucemia <br />Veniecuador, 2005<br />Aracno, 2006<br />
  4. 4. TRATAMIENTO<br />Radiación <br />Procesosquirúrgicos<br />Novo J., 2005<br />García J., 2003<br />Quimioterapia sistémica<br />Navarra, 2007<br />
  5. 5. Catharanthusroseus<br />AGENTES ANTICANCERIGENOS <br />1. Alcaloides de la Vinca<br />Podophyllumpeltatum<br />2.Epipodofilotoxinas<br />3. Taxanos<br />4.Camptotecinas<br />Taxusbrevifolia<br />Desde décadas atrás se han utilizado especies vegetales y microorganismos para obtener principios activos para la fabricación de nuevos medicamentos. <br />Camptotecinacuminata<br />
  6. 6. Carrión, 2007<br />
  7. 7. Gynoxis verrucosa <br />Malangón O. 2007<br />
  8. 8. Gynoxis verrucosa <br />El extracto metanólico mostró en CHO-K1<br />Citotóxico a &lt;100ug/ml <br />Citostático a &lt;10ug/ml<br />DL50 (ug/ml) ENSAYO MTS<br />LÍNEA CELULAR TUMORAL HUMANA<br />El extracto metanólico mostró IC50 = 22,06 ± 10,7ug/ml<br />(Astudillo A., 2006)<br />
  9. 9. Micronúcleos con bloqueo de citocinesis (CBMN)<br />Micronúcleos evalúa la inestabilidad genética, indica rotura cromosómica, en biomonitoreo de exposición a genotóxico y sus efectos en humanos. <br />Posibles destinos a la exposición citotóxicos o agentes genotóxicos<br />Los MN se forman por ruptura directa del ADN<br />
  10. 10. Objetivo General <br />Evaluar la actividad genotóxica del extracto metanólico de Gynoxis verrucosa mediante el ensayo CBMN en la línea celular Astrocitoma cerebral (D384).<br />
  11. 11. ObjetivosEspecíficos<br /><ul><li>Establecer el efecto citostático mediante Índice de División Nuclear en la línea celular Astrocitoma cerebral (D384).
  12. 12. Establecer el efecto genotóxico mediante la evaluación de Micronúcleos en la línea celular Astrocitoma cerebral (D384).</li></li></ul><li>24 Horas<br />24 Horas<br />Tratamiento<br />Siembra<br />Cultivar células D-384<br />24 Horas<br />24 Horas<br />Tinción <br />Cosecha<br />Evaluación<br />MATERIALES Y METODOS <br />
  13. 13. MATERIALES Y METODOS <br />
  14. 14. 24 Horas<br />24 Horas<br />Tratamiento<br />Siembra<br />Cultivar células D-384<br />24 Horas<br />24 Horas<br />Tinción <br />Cosecha<br />Evaluación<br />MATERIALES Y METODOS <br />
  15. 15. RESULTADOS Y DISCUSIÓN<br />Figura.3.1.Efecto del extracto G. verrucosa en la proliferación celularT. de DUNETT. *P&lt;0.00001, **P&lt;0.008.<br />Provoca daño puntual que interactúan directamente al ADN, indicando toxicidad. <br />
  16. 16. INDICE DE DIVISION NUCLEAR <br />Figura2.Índice de división nuclear T. de DUNETT. *** P&lt;0.00001; **P&lt; 0.00002; *P&lt;0.00003<br />El IDN hace referencia a la velocidad de la división celular siendo un indicativo del grado de toxicidad. <br />Se sabe que extracto en células CHO-K1, 10ug/ml es citostático medido por curva crecimiento clonal (Astudillo, 2006)<br />
  17. 17. RESULTADOS Y DISCUSIÓN<br />Estableciendo que el efecto puede variar dependiendo de la naturaleza del estudio .<br />La diferencia del modelo, la diversa sensibilidad de cada técnica <br />
  18. 18. FRECUENCIA DE MICRONUCLEOS <br />Figura 3. Efecto genotóxico, en las células D384, T. de DUNETT. *P&gt; 0,00001.<br />Hay un incremento en la frecuencia de MN conforme incrementa la concentración del extracto , por lo que creemos que los datos obtenidos se debe a la presencia de lactonas sesquiterpénicas. <br />
  19. 19. RESULTADOS Y DISCUSIÓN<br />Las lactonas sesquiterpénicas afectan la formación del huso mitótico lo que podría indicar el incremento de micronúcleos. <br />Se observa una actividad genotóxica por el incremento de la frecuencia de MN a partir de 1ug/ml en linfocitos humanos CBN (Toledo Z., 2007)<br />Medido por el ensayo cometa se puede evidenciar un incremento en eldaño al ADN a partir de 0.01ug/ml. (Vintimilla A., 2007) <br />
  20. 20. Conclusiones<br />El extracto metanólico de Gynoxis verrucosa a las concentraciones de 10, 20 y 25ug/ml no tiene un efecto citostático en la línea celular de Astrocitoma cerebral D-384 evaluadas mediante el índice de división nuclear.<br />El extracto metanólico de Gynoxis verrucosa tiene un efecto genotóxico produciendo un daño significativo en la línea celular de Astrocitoma cerebral D-384 evaluadas mediante la frecuencia de MN a las concentraciones probadas de 10, 20, 25ug/ml en células binucleadas. <br />
  21. 21. GRACIAS<br />
  22. 22. GRACIAS<br />

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