Biología Molecular aplicada a la         Microbiología          Docente Marcela Jacobi S               17 de agosto
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Dogma central de la Biología molecularLa información genética se almacena en la doble hélice del DNA cuya estructura esidó...
Biología molecularLa Biología Molecular es una rama moderna de la Biología, concerniente a la explicaciónde los fenómenos ...
Biología molecular• Quizás el área médica donde mayor aplicabilidad ha encontrado  la Biología Molecular ha sido en el áre...
Técnicas de estudio del DNANucleasas de restricciónPLFRSecuenciaciónHibridación por sondasPCRDNA chips; microarrays
Fragmentos de Restricción de Longitud Polimórfica (PLFR)Son el resultado de variaciones naturales -mutaciones- que elimina...
ElectroforesisEs una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas enun campo eléctrico.La separació...
Secuenciación de DNA• la Secuenciación de ADN es un conjunto de métodos y técnicas  bioquímicas cuya finalidad es la deter...
Hibridación por sondas• Las sondas (probes) son segmentos de ADN o ARN que han sido marcados  con enzimas, sustratos antig...
ORGANISMOS QUE PUEDEN SER DETECTADOS POR MEDIO DE SONDAS DE ACIDOS              NUCLEICOS DISPONIBLES COMERCIALMENTE
Polymerase Chain Reaction                                PCR• Es un método para amplificar selectivamente un segmento de A...
Ciclos del PCRD) Denaturación (95°C), 30 sec.A) Annealing o hibridación (55–60°C),30 sec.E) Extensión (72°C),Durante la de...
Aplicaciones• Entre muchas de las aplicaciones que la PCR pone a  disposición se encuentran la detección precoz o prenatal...
Biochips o microarrays• Nuevo método que permitan monitorizar elevados volúmenes de  información genética en paralelo y qu...
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  1. 1. Biología Molecular aplicada a la Microbiología Docente Marcela Jacobi S 17 de agosto
  2. 2. ARNLa función del ARN es transcribir el mensaje genéticopresente en el DNA y traducirlo a proteínas.ARN posee Ribosa y URACILOen lugar de TIMIDINALa molécula es monocatenariaExisten tres tipos de ARN• Mensajero,• Transferencia,• Ribosomal
  3. 3. Caracteres DNA RNAPentosa Desoxirribosa RibosaBases nitrogenadas Adenina, Guanina Adenina, Guanina Citosina, Timina Citosina, UraciloNumero de 2 1 polinucleotidos(cadenas)Función Almacena la información Permite la expresión de la biológica de los seres información biológica vivosUbicación Núcleo, mitocondrias, Núcleo, ribosomas cromatina, cloroplastos, cromosomaEstructura Doble hélice Lineal, globular y trébol
  4. 4. Dogma central de la Biología molecularLa información genética se almacena en la doble hélice del DNA cuya estructura esidónea para mantener la integridad de dicha información.Cuando una célula se divide, transcribe su información genética a las células hijas, paraello duplica previamente su DNA mediante la replicación. Crick en 1970 anuncia el dogma central de la Biología Molecular “La información genética contenida en el DNA es transcrita en forma de RNA y traducida a proteínas”
  5. 5. Biología molecularLa Biología Molecular es una rama moderna de la Biología, concerniente a la explicaciónde los fenómenos biológicos en términos moleculares.Las técnicas de Biología Molecular son aquellas que usan métodos y técnicas con ácidosnucleícos recombinantes para un propósito determinado, que puede ser con finesdiagnósticos, de monitoreo o de estimación de riesgos y pronóstico, tanto en patologíasgenéticas y no genéticas, las cuales incluyen a las enfermedades infecciosas.Esta tecnología utiliza el ADN , ARN y proteínas de un agente infeccioso de unamuestra clínica para poder identificarlo.Estas tienen muchas ventajas que radican en su sensibilidad, especificidad y seguridad .
  6. 6. Biología molecular• Quizás el área médica donde mayor aplicabilidad ha encontrado la Biología Molecular ha sido en el área de diagnóstico de enfermedades genéticas.• Sin embargo, el uso de técnicas de Biología Molecular en el diagnóstico de enfermedades infecciosas está siendo aplicado con bastante aceptación por los médicos, en la medida que se conozca mejor la genética de los microorganismos involucrados en la enfermedad.
  7. 7. Técnicas de estudio del DNANucleasas de restricciónPLFRSecuenciaciónHibridación por sondasPCRDNA chips; microarrays
  8. 8. Fragmentos de Restricción de Longitud Polimórfica (PLFR)Son el resultado de variaciones naturales -mutaciones- que eliminan o alteran lasecuencia de reconocimiento para una enzima de restricción.
  9. 9. ElectroforesisEs una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas enun campo eléctrico.La separación se realiza sobre un soporte solido hidratado, que puede ser unpapel o acetato de celulosa o sobre matriz porosa como un gel.
  10. 10. Secuenciación de DNA• la Secuenciación de ADN es un conjunto de métodos y técnicas bioquímicas cuya finalidad es la determinación del orden de los nucleótidos A, C, G y T en un oligonucleótido de ADN.Equipo:Secuenciador ABI PRISM 310 Genetic Analyzer PE Applied Biosystems. Estesecuenciador se basa en un sistema automatizado de electroforesis capilar. Con unacapacidad de lectura de 400-600 bases por corrida, puede analizar cadenas sencillas,cadenas dobles y fragmentos de DNA generados por PCR.
  11. 11. Hibridación por sondas• Las sondas (probes) son segmentos de ADN o ARN que han sido marcados con enzimas, sustratos antigénicos, quimioluminiscencia o radioisótopos, los que se pueden unir con una alta especificidad a una secuencia complementaria de ácido nucleico, estos pueden detectar secuencias especificas en una célula o tejido.
  12. 12. ORGANISMOS QUE PUEDEN SER DETECTADOS POR MEDIO DE SONDAS DE ACIDOS NUCLEICOS DISPONIBLES COMERCIALMENTE
  13. 13. Polymerase Chain Reaction PCR• Es un método para amplificar selectivamente un segmento de ADN.• El segmento puede ser una pequeña parte o una larga y compleja parte de ADN.• Es un método para copiar trozos de ADN• El producto del PCR puede ser digerido, secuenciado o clonado
  14. 14. Ciclos del PCRD) Denaturación (95°C), 30 sec.A) Annealing o hibridación (55–60°C),30 sec.E) Extensión (72°C),Durante la desnaturalización, que se realizapor calentamiento de la mezcla a 95 ºC, seseparan las dos cadenas del DNA molde.Durante la hibridación, la temperatura deincubación se reduce para permitir elapareamiento de las bases de ambos cebadoresen el sitio donde encuentran una secuenciacomplementaria.Durante la fase de elongación, la mezcla secalienta a 72 ºC, temperatura a la cual la DNApolimerasa termoestable extiende la cadenacomplementaria
  15. 15. Aplicaciones• Entre muchas de las aplicaciones que la PCR pone a disposición se encuentran la detección precoz o prenatal de enfermedades genéticas, la detección de infecciones virales latentes o la producción de grandes cantidades de fragmentos de DNA humano a una velocidad muy superior a la posible mediante otros métodos.• Esta técnica también se aplica para estudios de identidad y filiación.
  16. 16. Biochips o microarrays• Nuevo método que permitan monitorizar elevados volúmenes de información genética en paralelo y que reduzcan tanto el tiempo empleado como el coste por análisis.• Los biochips, estas fabricados de láminas de vidrio y lo que se deposita en dichas láminas son cadenas de ADN con distintas secuencias.
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