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Diagnóstico de infección aguda y crónica por VIH
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Diagnóstico de infección aguda y crónica por VIH

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Repaso y recomendaciones para el diagnóstico de infección aguda y crónica por VIH (virus de la inmunodeficiencia humana).

Repaso y recomendaciones para el diagnóstico de infección aguda y crónica por VIH (virus de la inmunodeficiencia humana).

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  • CDC (center for disseases control and prevention)
  • a sensitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed; this led to an appreciation of the scope and evolution of the HIV epidemic at first in the United States and other developed nations and ultimately among developing nations throughout the world (see “HIV infection and AIDS Worldwide” below). The staggering worldwide evolution of the HIV pandemic has been matched by an explosion of information in the areas of HIV virology, pathogenesis (both immunologic and virologic), treatment of HIV disease, treatment and prophylaxis of the opportunistic diseases associated with HIV infection, prevention of infection, and vaccine developmen
  • lectron microscopy shows that the HIV virion is an icosahedral structure (Fig. 189-2) containing numerous external spikes formed by the two major envelope proteins, the external gp120 and the transmembrane gp41

    B. Structure of HIV-1, including the gp120 envelope, gp41 transmembrane components of the envelope, genomic RNA, enzymereverse transcriptase, p18(17) inner membrane (matrix), and p24 core protein (capsid). (Copyright by George V. Kelvin). (Adapted from RC Gallo: Sci Am 256:46, 1987.)
  • Transcript

    • 1. Sebastián Tamayo Orozco - 3er año Medicina-CES. DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH)
    • 2.  Paciente masculino, 26 años, natural y residente de Medellín, administrador de empresas, soltero, sin hijos. Consulta por cuadro clínico de 3 días de evolución consistente en fiebre subjetiva, fatiga, mialgias y odinofagia.  Refiere pérdida de 5kg en el último mes.  Refiere haber tenido hace 1 mes relaciones sexuales promiscuas sin preservativos.  Niega antecedentes patológicos, ingesta de medicamentos, viajes recientes y antecedentes familiares. CASO CLÍNICO
    • 3.  Al EF presenta PA: 120/80, FC: 90, FR:17, T:38.5, SaO2: 97%. Adenopatías no dolorosas en cadenas axilar y cervical anterior de ambos lados. Orofaringe eritematosa y múltiples aftas dolorosas en cavidad oral. Cardiovascular y pulmonar sin alteraciones. Abdomen sin visceromegalias o dolor a la palpación.
    • 4.  1981: El CDC notifica neumonía por Pneumocystis jiroveci en 5 hombres homosexuales y sarcoma de Kaposi en 26 hombres homosexuales.  También en usuarios de drogas IV y pacientes que recibían transfusiones.  Aparentemente se transmitía sexualmente y de la madre al hijo. HISTORIA
    • 5.  1983: Se aísla el VIH en un paciente con linfadenopatía.  1984: Se demuestra relación clara entre VIH y SIDA.  1985: Se desarrolla ELISA. HISTORIA
    • 6.  Familia: Retroviridae (VIH-1, VIH-2)  Subfamilia: lentivirus.  El VIH-1 es el más prevalente.  El VIH-2 es endémico en este de África.  M, N, O, P. VIH
    • 7. MORFOLOGÍA p24 p17
    • 8. HUMORAL:  Los anticuerpos contra el VIH aparecen de 6 a 12 semanas después de la infección.  Orden de aparición: 1) Ac contra p41. 2) Ac contra p55, p24 y p17. 3) Ac contra p120, p31 y p66. RESPUESTA INMUNE ANTE EL VIH
    • 9.  ELISA.  Western blot (electroinmunotransferencia)  Directo (p24, RNA) DIAGNÓSTICO
    • 10.  Inmuno ensayo enzimático.  Tasas de sensibilidad y especificidad entre 98 y 100%  Su resultado se reporta como reactivo (positivo) , indeterminado o no reactivo (negativo) ELISA
    • 11.  Pueden haber falsos positivos debido a autoanticuerpos, enfermedad hepática, vacunación reciente contra influenza , infecciones virales agudas, embarazo, transfusión reciente y transplante.  Debido a esto un resultado de ELISA positivo o indeterminado debe ser confirmado con una prueba más específica (Western blot) ELISA
    • 12. WESTERN BLOT O ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA
    • 13.  Detecta anticuerpos contra las proteínas del VIH.  Se usa para confirmar un ELISA positivo o indeterminado.  Sensibilidad: 99.3%  Especificidad: 99.7%  35-50 días : indeterminado.  45-60 días: positivo. WESTERN BLOT
    • 14.  Es negativo cuando hay ausencia total de bandas.  Es positivo cuando:
    • 15.  Cuando los patrones de reactividad no son positivos ni negativos.  2 posibilidades:  1)En un paciente de bajo riesgo es posible que tenga anticuerpos que reaccionen de forma cruzada con una de las proteínas del VIH.  LES, tiroiditis de Hashimoto, muestra con bilirrubina elevada, hemólisis, factor reumatoideo, gammapatía policlonal o hemodiálisis. WESTERN BLOT INDETERMINADO
    • 16. 2) El paciente está montando una respuesta clásica de Ac contra el VIH. En ambos casos:  Western blot se debe repetir en un mes.  Antígeno p24 o carga viral.  Pruebas serológicas específicas para VIH-2 . WESTERN BLOT INDETERMINADO
    • 17. Análisis de captación del antígeno p24/ Carga viral
    • 18.  Si el antígeno p24 y la carga viral son negativos y no hay progresión en el Western blot se descarta la infección por VIH.  Si ambos son negativos se descarta VIH.  Si el western blot es positivo y/o el análisis del antígeno p24 y la carga viral son positivos, se hace el diagnóstico provisional de infección por VIH-1, y se confirma después con un Western blot . WESTERN BLOT INDETERMINADO
    • 19.  Inmunoensayo.  Detecta los antígenos p24 libres en plasma.  Positividad en tiempo estimado de 26 días.  Sensibilidad 89-90%  Útil en el diagnóstico de infección aguda por VIH, en donaciones de sangre y VIH neonatal. ANÁLISIS DE CAPTACIÓN DEL ANTIGENO P24
    • 20.  Positiva 10 a 15 días después de la exposición  Se detecta mediante: 1) PCR RT. 2) PCR DNA ramificada. 3) NABSA (amplificación basada en la secuencia del ácido nucleico) 4) PCR de DNA. DETECCIÓN DEL RNA (CARGA VIRAL)
    • 21.  Diagnósticar la infección.  Pronóstico inical.  Determinar necesidad de tratamiento.  Vigilancia de respuesta al tratamiento. UTILIDADES DE DETECCIÓN DEL RNA
    • 22.  Diagnóstico del infección aguda por VIH.  Tamizaje en donaciones de sangre.  Diagnóstico VIH neonatal.  Diagnóstico del VIH en etapa avanzada. UTILIDADES DE DETECCIÓN DEL RNA
    • 23. DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN AGUDA POR VIH
    • 24.  Carga viral (RNA)  Antígeno p24.  Serológicas. AYUDAS DIAGNÓSTICAS
    • 25.  Positiva 10 a 15 días después de la exposición.  Según estudios los pacientes diagnosticados con infección aguda por VIH tienen una carga viral >100.000 copias/ml y los falsos positivos <2.000 copias/ml. CARGA VIRAL (RNA)
    • 26.  En investigaciones donde la prueba fue con RT-PCR no hubo falsos positivos o el porcentaje fue muy poco (3% vs 5%)  Se debe sospechar un falso positivo en cargas virales <10.000 copias/ml y se debe repetir la prueba en otra muestra de sangre. CARGA VIRAL (RNA)
    • 27.  Cuando se detecta antígeno p24 aproximadamente hay una carga viral de 30.000 – 50.000 copias/ml .  Es positivo de 5 a 7 días después de la detección de carga viral. DETECCIÓN DE ANTÍGENO P24
    • 28. SEROLOGÍA
    • 29.  Hacer el mejor ELISA que esté disponible.  Antígeno p24.  Carga viral (RT-PCR) RECOMENDACIONES
    • 30. ELISA (-), carga viral y p24 (-) •La infección no fue adquirida. •En casos donde hubo una exposición muy reciente se deben repetir las pruebas en 1-2 semanas. ELISA(-), p24 y/o carga viral (+) •Infección por VIH. •El diagnóstico se debe confirmar en varias semanas con carga viral o ELISA.. ELISA(+), p24 y/o carga viral (+) •Infección por VIH. •El diagnóstico se debe confirmar en varias semanas con carga viral o ELISA.
    • 31.  Longo DL, Fauci AS, Kasper DL, Hauser SL, Jameson JL, Loscalzo J. Human inmunodeficiency Virus Disease: AIDS. Anthony S. Fauci, H. Clifford Lane, editors. Harrison’s Principles of Internal Medicine, 18 th Edition; p. 2012. 1506-10588.  Bartlett G John, Hirsch S Martin, Mitty Jennifer. Diagnostic assays for HIV infection. UptoDate. 2013. [consulta el 1 febrero de 2014]. Disponible en www.uptodate.com  Sac E. Paul, Bartlett G John, Bloom allyson. Acute and early HIV infection: Clinical manifestations and diagnosis. UptoDate. 2013. [consulta el 1 febrero de 2014]. Disponible en www.uptodate.com  Caliendo M Angela, Barttlet G John, Mitty Jennifer. Techniques and interpretation of HIV-1 RNA quantitation. 2013. [consulta el 1 febrero de 2014]. Disponible en www.uptodate.com  Ospina O. Sigifredo. Diagnóstico de la infección por el virus de la inmudeficiencia humana. Infectio. 2006; 10(4): 273-278  Pumarola Suñé Tomás. VIH y laboratorio. Determinaciones diagnósticas. Educación continuada en el laboratorio clínico. 2011. BIBLIOGRAFIA

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