1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
MÉDICO CIRUJANO
MÓDULO V
APARATO DIGESTIVO
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICA 19
EXÁMENES COPROPARASITOSCÓPICOS

2. OBJETIVOS
Conocer la importancia del diagnóstico de laboratorio de
las enfermedades parasitarias.
Identificarlas formas parasitarias mediante la observación
al microscopio.
Conocer la clasificación de los exámenes
coproparasitoscópicos

3. Reactivos
1.- Solución de sacarosa
con densidad de 1.180.
- Sacarosa (azúcar 2.- Lugol parasitológico
común). (ver método directo).

5. Método cualitativo de concentración
por flotación simple
Se usa para la búsqueda e
identificación de formas parasitarias
como huevos, quistes y larvas.
La densidad tan elevada de la salmuera
distorsiona las formas parasitarias y se
necesita experiencia para la lectura.

6. Reactivos Solución de
- Cloruro de lugol
sodio comercial. parasitológico
Solución
saturada de
cloruro de sodio.

10. 1.- Se hace una suspensión homogénea con 1 a 2 g de materia
fecal y 10 ml de agua de la llave.
2.- Se pasa a través de gasa colocada en el embudo y colectando
la suspensión directamente en el tubo de ensaye.
3.- Los tubos así preparados, se centrifugan a 2,000 revoluciones
por minuto (r.p.m.) durante un minuto.
4.- Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con
agua, agitando con un aplicador.
5.- Se centrifuga nuevamente y se vuelve a decantar el
sobrenadante.

11. 6.- Se agregan 2 a 3 ml de la solución de sulfato de zinc a los tubos y
se homogeneizan perfectamente, llenando los tubos hasta 0.5 a 1
cm. por abajo de los bordes.
7.- Se centrifuga a 2000 r.p.m. durante un minuto.
8.- Con el asa estéril o flameada, se recoge la muestra de la película
superficial, que se encuentra en el menisco, durante dos o tres
ocasiones sucesivas y se deposita en un porta objetos.
9.- Se agregan dos gotas de lugol parasitológico y se homogeneiza
con el ángulo de un cubreobjetos y se coloca este sobre la
preparación.
10.- Se observa la preparación al microscopio con objetivos 10X y
40X.

12. TÉCNICAS CUALITATIVAS

18. 1.- Suspender 1 a 2 g de materia fecal en 10 ml de " Carles l ",
utilizando la cápsula de porcelana para homogeneizar.
2.- Pasar la suspensión a través de la malla o gasa.
3.- Centrifugar a 1,800 r.p.m. durante 1 minuto.
4.- Decantar y agregar al sedimento " Carles II ", hasta llenar dos
tercios del tubo.
5.- Agitar con fuerza y añadir el éter hasta centímetro y medio del
borde.
6.- Tapar el tubo con el tapón de caucho y agitar violentamente hasta
lograr la homogeneización de las sustancias que contiene.

19. 8.- Con un palillo de dientes, se rompe el tapón de las heces, grasas y otros
restos, agitando ligeramente con el palillo.
9.- Se vuelve a centrifugar durante otros 30 seg. a 1,800 r.p.m.
10- Se rompe nuevamente el tapón superior de restos fecales, desprendiéndolo
de la pared del tubo con cuidado, ayudándose del palillo.
11- Se decanta de una sola vez, procurando que quede una pequeña cantidad
de 2 a 4 gotas líquidas junto al sedimento.
12- Agregar al sedimento una gota de lugol y agitar el tubo ligeramente para
homogeneizar.
13- Con la pipeta Pasteur, se toma una gota de la suspensión coloreada del
fondo del tubo y se coloca en el portaobjetos, colocando sobre este el
cubreobjetos.
14- Se observa en el microscopio con objetivos de 10X y 40X.

21. 1.- Se coloca un fragmento de heces fecales del tamaño de un frijol ( 1 g
aproximadamente) en un vaso que contenga 5 a 10 ml de ácido clorhídrico al 15
%.
2.- Se homogeneiza con el aplicador.
3.- Se pasa la suspensión por dos capas de gasa previamente humedecida,
recibiendo el colado en el tubo de centrífuga cónico de 15 ml.
4.- Se añade éter en cantidades iguales y se coloca un tapón de caucho.
5.- Se agita vigorosamente y se afloja el tapón para disminuir la presión y se
destapa.
6.- Se centrifuga a 1,500 r.p.m. durante un minuto.
7.- Se saca de la centrífuga y se observan 4 capas:
1a.- Eter. 2a.- Tapón de restos fecales.
3a.- Capa de ácido. 4a.- Sedimento inferior que contiene formas parasitarias.

22. 8.- Se mantiene el tubo horizontal y con un aplicador de madera y con
movimientos circulares, se despega el tapón de restos fecales.
9.- Rápidamente, pero con cuidado, se vierten el éter, tapón de restos fecales y
la capa de ácido, de manera que quede el sedimento en el tubo.
10- Se mantiene el tubo en posición horizontal, para evitar que los restos de
extracto graso y de tapón fecal bajen por las paredes del sedimento.
11- Se introduce un aplicador con hiposo de algodón y se limpian las paredes
del tubo.
12- Con el tubo vertical, se toma parte del sedimento con una pipeta Pasteur.
13- Se coloca en un portaobjetos y se pone un cubreobjetos por encima de este.
14- Se examina en el microscopio con objetivo seco débil 10X y seco fuerte 40X.

23. Se pueden destruir con el
éter a pesar de que hayan
sido previamente fijados y
Se han descrito conservados con el MIF.
trofozoitos
Técnica permite
hacer una buena
concentración de
huevos, quistes y
larvas,

24. REACTIVOS
•Mezclar la muestra fecal con la solución de MIF y
pasarla a través de gasa humedecida en MIF a un
Éter etílico.,
Merthiolate., Yodo de
potasio.
1.- tubo cónico de centrífuga
•Se agregan 5 ml de éter, se tapa y agita
Formaldehído.
Glicerina. Y agua
destilada. •Se retira el tapón con cuidado y se centrifuga a
1,500 r.p.m. durante un minuto.
•Se forman 4 capas:
2.- •1a.- Eter.
•3a.- Solución MIF.
2a.- Restos fecales.
4a.- Sedimento con las
formas parasitarias
•Se desprende el tapón superficial y se decantan
las tres capas superiores,
•Con una pipeta Pasteur se toma la muestra de la
SOLUCIONES
3.- parte superior del sedimento, se coloca en un
portaobjetos y se cubre.
•Se examina en el microscopio con objetivos de
seco débil y seco fuerte.
- Solución de MIF.

25. " EXAMENES COPROPARASITOSCOPICOS
CUANTITATIVOS "

27. MATERIALES
REACTIVOS SOLUCIONES
- Solución 0.1
- Hidróxido de - Agua
N de Hidróxido
sodio Q.P. destilada.
de sodio

29. El equipo y material que se utiliza no se puede conseguir
fácilmente en el comercio.

31. 1.- Se pesa un frasco de boca ancha con un abatelenguas.
2.- Se pone materia fecal ayudándose con el abatelenguas, hasta que sean 4 g
(peso del frasco con el abatelenguas más 4 g de materia fecal).
3.- Se miden 36 ml de solución de formaldehído y se vacían en el frasco.
4.- Se homogeneiza la materia fecal con la solución de formol hasta que quede
una suspensión.
5.- Se pasa la mezcla por malla o gasa previamente colocada en un embudo y
se recibe la suspensión en un tubo colocado en una gradilla.
6.- Se centrifuga durante un minuto a 2,000 r.p.m..
7.- Se decanta el sobrenadante, se suspende el sedimento con agua y se vuelve
a centrifugar bajo las mismas condiciones anteriores.
8.- Se decanta nuevamente el sobrenadante y se agregan 2 a 3 ml. de la
solución de sulfato de zinc, se mezcla hasta hacer una nueva suspensión.

32. 9.- Se introduce la campana de Ferreira, dando un pequeño giro.
10- Se llena el tubo con más solución, procurando que tanto el menisco
interno de la campana, como el externo, vayan subiendo paralelamente.
11- Se centrifuga a 2,000 r.p.m. durante un minuto.
12- Se saca el tubo de la centrífuga y con el pulgar y el índice se comprime
fuertemente el trocito de manguera de caucho del extremo anterior de la
campana y de un golpe se saca ésta del tubo.
13.- Se invierte la campana sobre el portaobjetos y se homogeneiza la
suspensión con el ángulo de un cubreobjetos y se coloca sobre el
portaobjetos.
Se examina la preparación con el microscopio a seco débil y seco fuerte
(10X y 40X respectivamente)

33. CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS
DE HUEVOS DE ALGUNOS PARÁSITOS

39.  Microscopio
 Centrifuga
 Vaso de precipitados
 Tubos con tapón
 Embudo de plástico
 Pipetas Pasteur
 Varilla de vidrio
 Abatelenguas
 Asa bacteriológica
 Gasas

40. METODO DE FAUST Y COLS
Poner con un aplicador 1 g de materia fecal en un vaso de
precipitado, agregar 210 ml de solución salina isotónica
Filtrar la suspensión a través de la gasa colocada en un
embudo
Centrifugar durante 45-60 seg a 2500 rpm
Tirar el líquido sobrenadante y añadir 2-3 ml de agua al
sedimento

41. Repetir la maniobra hasta que el líquido que sobrenada sea
claro
Agregar 8-9 ml de sulfato de zinc ; una vez tirado el
sobrenadante agitar y adicionar solución hasta llenar el tubo
Centrifugar durante 45-60 seg a 2500 rpm
Tomar con el asa la película superficial y colocarlo en el
portaobjetos, añadir una gota de lugol para teñir la mezcla,
cubrir con una laminilla y observar a seco débil y seco fuerte

42. METODO DE RITCHIE
Poner un aplicador 1g de materia fecal en el vaso de
precipitados, agregar 10 ml de solución salina isotónica.
Filtrar la suspensión a través de la gasa colocada en un
embudo recibiendo en el tubo.
Centrifugar durante un minuto a 2000 rpm; desechar el
sobrenadante, repetir hasta que el sedimento este limpio
Agregar 10 ml de formalina al 10% y dejar en reposo 10 min

43. Centrifugar durante 1 min a 1500 rpm; en donde se observarán 4
capas:
Eter
Restos fecales
Formol
Sedimento
Introducir una pipeta Pasteur y extraer el sedimento; colocar una gota
sobre el portaobjetos, agregar 1 gota de lugol y cubrir con una
laminilla
Observar a seco débil y seco fuerte