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Cytologie bronchique
• Intérêt de plus en plus croissant (↑KBP)
• D’abord représentée par les expectorations
• Regain d’intérêt avec les fibroscopes souples
• Rendement bon
• Qualité des résultats: qualité des prélèvements
• Aucune complication (hémorragie exceptionnelle)
Méthodes de prélèvements
• Brossage
• Aspiration bronchique
• Crachats
Brossage
• Brosse introduite dans le canal du fibroscope
• Abrasion muqueuse par des mouvements de
rotation et de va et vient
• Étalement des sécrétions retirées avec la brosse
d’un seul mouvement
+sans tourner
+sans trop appuyer (écrasement)
+sans repasser 2 fois au même endroit (superposition)
Aspiration
• Canal du fibroscope relié à un système
d’aspiration
• Liquide d’aspiration adressé immédiatement
au laboratoire (sinon fixation)
• Centrifugation
• Cytocentrifugation (sédiment)
Expectoration
• Technique peu performante
• Indications
+expectorations très abondantes
+fibroscopie impossible
• Technique rigoureuse
+crachats profonds
+fixation immédiate
Acheminement au service
d’anapath
• échantillons non fixés: délai<30 mn
• si délai 30mn: fixation par le fibroscopiste
Cytologie inflammatoire
• Bacilles et cocci très fréquents
• Virus à tropisme respiratoire:
*herpes: C infectées à noyaux multiples emboîtés vitreux
*virus syncytial respiratoire: C géantes multinucléées
*CMV: inclusion nucléaire cernée de halo clair
• Mycoses:
*C albicans: filaments et spores
Cytologie inflammatoire
• Aspergillus:
filaments plus épais septés et ramifiés à 45°
• Mucormycose:
filaments septés et ramifiés à 90°
• Pneumocystis carinii (Grocott)
Kystes cernés de noir avec point noir central
Aspergillose
Mucormycose
Pneumocystis Carinii
Anguilulose
Herpes
Cytomégalovirus
Cellules géantes et cellules
épithélioioides
Corps asbestosique
Cristaux de Charcot-Leyden
Spirale de Curshman
Cytologie tumorale maligne
• Carcinome à petites cellules (chimiothérapie)
• Carcinome non à petites cellules (chirurgie)
+carcinome épidermoïde
+adénocarcinome
+carcinome à grandes cellules
Cytologie  typage fiable
• Dg dépend de la méthode de recueil
(cellules tumorales identifiables sont en profondeur)
+expectorations: stt des cellules superficielles
+aspiration: davantage de cellules profondes
+brossage: grande quantité de cellules profondes
• Tumeurs polymorphes et composites
Carcinome épidermoïde
• Placards ou en cellules isolées (+++)
• Limites cytoplasmiques nettes
• Cytoplasme kératinisé ou non
• Limites nucléaires irrégulières
• Cellules de taille et de forme, variées:
(Cellules fibres, têtards, végétales….)
• Atypies cytonucléaires:
+N/P
+nucléoles
+hyperchromatisme
Carcinome épidermoïde
Carcinome épidermoide
Carcinome épidermoïde
Carcinome épidermoïde
Adénocarcinome
• Aspect cytologique monomorphe
( son type histologique et sa nature I ou II)
• Desquamation:
gros amas, papilles, glandes et morules (+++)
• Grandes cellules tumorales
+polygonales
+cylindriques (proche de  ciliée mais sans cils)
Adénocarcinome
• Gros noyaux atypiques
+N/P
+chromatine claire
+nucléoles volumineux parfois multiples
+membrane nucléaire bien dessinée

Aspect de noyau vésiculeux et nucléolé
Adénocarcinome
Adénocarcinome
Adénocarcinome
Adénocarcinome
Carcinome à petites cellules
• Petite taille et grande fragilité des cellules
• Desquamation en amas peu cohésifs,
superposés, moulés les uns contre les autres
• Cytoplasme basophile réduit à peine visible
Carcinome à petites cellules
• Noyaux: superposition et emboîtement
• N/P
• Chromatine granuleuse parfois finement
nucléolée mais jamais de gros nucléole
• Contours nucléaires irréguliers
• Noyaux nus ou écrasés (stries nucléaires)
Carcinome à petites cellules
Carcinome à petites cellules
Carcinome à grandes cellules
• Groupe formé de l’exclusion des 3 autres
types
• Tumeurs indifférenciées à grandes cellules
(donc non à petites cellules )
• sans aucun critère de différenciation
épidermoïde ou adénocarcinomateuse
Carcinome à grandes cellules
Carcinome à grandes cellules
Lavage bronchoalvéolaire
• Méthode simple, sans danger d’exploration
du poumon profond
• Permet le recueil de cellules, d’agents
infectieux et de particules minérales
présents dans les lumières alvéolaires ainsi
que les milieux biologiques du tractus
respiratoire
Réalisation pratique du LBA
• Réalisé en cours d’endoscopie
• Injection dans un segment pulmonaire de 200-300
ml de sérum physiologique/fractions de 40-60 ml
• Ré aspiration au fur et à mesure afin d’en
récupérer 50-60% (100ml)
• Liquide ré aspiré après la 1ère seringue: étage
bronchique et bronchiolaire (tube 1)
• Les tubes suivants correspondent à l’étage
alvéolaire et seront mélangés et correspondant au
véritable LBA
Réalisation pratique du LBA
• En cas de délai supérieur à 1 heure entre le
LBA et l’examen cellulaire une
conservation à +4 ° est nécessaire afin de ne
pas modifier la morphologie des cellules
Techniques au laboratoire
• Aspect macroscopique
*clair: non fumeur
*brunâtre: fumeur
*laiteux: lipoprotéinose
*hémorragique: syndromes hémorragiques
*jaunâtre : ictérique
Techniques au laboratoire
• Analyse micro biologique: histochimie,
immunohistochimie, hybridation in situ, culture
• Analyse biochimique
*LBA contient des substances chimiques (protéines, lipides
enzymes, mucines, glycoprotéines, composants du
surfactant)
*Quantification difficile vu l’absence d’éléments de référence
• Analyse minéralogique
LBA chez le sujet normal
• Formule cellulaire:
*macrophages: 84%7
*lymphocytes: 15  3%
*polynucléaires neutrophiles : <5%
*polynucléaires éosinophiles : <1%
• Typage lymphocytaire: essentiellement T avec un
rapport CD4/CD8 : 1,2
• cellules de Langerhans (CD1): 0-3%
LBA en pathologie
• Fumeur: hypercellularité par afflux alvéolaire de
macrophages contenant un pigment brunâtre
• Sarcoïdose:
*alvéolite lymphocytaire de phénotype CD4
*CD4/CD8  
• Pneumopathie d’hypersensibilité:
*alvéolite lymphocytaire de phénotype CD8
*CD4/CD8  
LBA en pathologie
• Histiocytose Langerhansienne
*hypercellularité macrophagique
*cellules de Langerhans   (15%)
• Fibrose pulmonaire diffuse:  volume, 
macrophages, polynucléose neutrophile ou éosinophile,
discrète lymphocytose
• Pneumoconioses
• Pathologie infectieuse
• Pathologie tumorale
Histiocytose Langerhansienne
CD1a
Sarcoïdose
CD4
CD8 Alvéolite lymphocytaire
Pneumopathie d’hypersensibilité
Alvéolite lymphocytaire
CD4
CD8
Corps asbestosique
Hémorragie alvéolaire

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Cytologie bronchique et lavage bronchoalvéolaire

  • 1. Cytologie bronchique • Intérêt de plus en plus croissant (↑KBP) • D’abord représentée par les expectorations • Regain d’intérêt avec les fibroscopes souples • Rendement bon • Qualité des résultats: qualité des prélèvements • Aucune complication (hémorragie exceptionnelle)
  • 2. Méthodes de prélèvements • Brossage • Aspiration bronchique • Crachats
  • 3. Brossage • Brosse introduite dans le canal du fibroscope • Abrasion muqueuse par des mouvements de rotation et de va et vient • Étalement des sécrétions retirées avec la brosse d’un seul mouvement +sans tourner +sans trop appuyer (écrasement) +sans repasser 2 fois au même endroit (superposition)
  • 4. Aspiration • Canal du fibroscope relié à un système d’aspiration • Liquide d’aspiration adressé immédiatement au laboratoire (sinon fixation) • Centrifugation • Cytocentrifugation (sédiment)
  • 5. Expectoration • Technique peu performante • Indications +expectorations très abondantes +fibroscopie impossible • Technique rigoureuse +crachats profonds +fixation immédiate
  • 6. Acheminement au service d’anapath • échantillons non fixés: délai<30 mn • si délai 30mn: fixation par le fibroscopiste
  • 7. Cytologie inflammatoire • Bacilles et cocci très fréquents • Virus à tropisme respiratoire: *herpes: C infectées à noyaux multiples emboîtés vitreux *virus syncytial respiratoire: C géantes multinucléées *CMV: inclusion nucléaire cernée de halo clair • Mycoses: *C albicans: filaments et spores
  • 8. Cytologie inflammatoire • Aspergillus: filaments plus épais septés et ramifiés à 45° • Mucormycose: filaments septés et ramifiés à 90° • Pneumocystis carinii (Grocott) Kystes cernés de noir avec point noir central
  • 15. Cellules géantes et cellules épithélioioides
  • 19. Cytologie tumorale maligne • Carcinome à petites cellules (chimiothérapie) • Carcinome non à petites cellules (chirurgie) +carcinome épidermoïde +adénocarcinome +carcinome à grandes cellules
  • 20. Cytologie  typage fiable • Dg dépend de la méthode de recueil (cellules tumorales identifiables sont en profondeur) +expectorations: stt des cellules superficielles +aspiration: davantage de cellules profondes +brossage: grande quantité de cellules profondes • Tumeurs polymorphes et composites
  • 21. Carcinome épidermoïde • Placards ou en cellules isolées (+++) • Limites cytoplasmiques nettes • Cytoplasme kératinisé ou non • Limites nucléaires irrégulières • Cellules de taille et de forme, variées: (Cellules fibres, têtards, végétales….) • Atypies cytonucléaires: +N/P +nucléoles +hyperchromatisme
  • 26. Adénocarcinome • Aspect cytologique monomorphe ( son type histologique et sa nature I ou II) • Desquamation: gros amas, papilles, glandes et morules (+++) • Grandes cellules tumorales +polygonales +cylindriques (proche de  ciliée mais sans cils)
  • 27. Adénocarcinome • Gros noyaux atypiques +N/P +chromatine claire +nucléoles volumineux parfois multiples +membrane nucléaire bien dessinée  Aspect de noyau vésiculeux et nucléolé
  • 32. Carcinome à petites cellules • Petite taille et grande fragilité des cellules • Desquamation en amas peu cohésifs, superposés, moulés les uns contre les autres • Cytoplasme basophile réduit à peine visible
  • 33. Carcinome à petites cellules • Noyaux: superposition et emboîtement • N/P • Chromatine granuleuse parfois finement nucléolée mais jamais de gros nucléole • Contours nucléaires irréguliers • Noyaux nus ou écrasés (stries nucléaires)
  • 36. Carcinome à grandes cellules • Groupe formé de l’exclusion des 3 autres types • Tumeurs indifférenciées à grandes cellules (donc non à petites cellules ) • sans aucun critère de différenciation épidermoïde ou adénocarcinomateuse
  • 39. Lavage bronchoalvéolaire • Méthode simple, sans danger d’exploration du poumon profond • Permet le recueil de cellules, d’agents infectieux et de particules minérales présents dans les lumières alvéolaires ainsi que les milieux biologiques du tractus respiratoire
  • 40. Réalisation pratique du LBA • Réalisé en cours d’endoscopie • Injection dans un segment pulmonaire de 200-300 ml de sérum physiologique/fractions de 40-60 ml • Ré aspiration au fur et à mesure afin d’en récupérer 50-60% (100ml) • Liquide ré aspiré après la 1ère seringue: étage bronchique et bronchiolaire (tube 1) • Les tubes suivants correspondent à l’étage alvéolaire et seront mélangés et correspondant au véritable LBA
  • 41. Réalisation pratique du LBA • En cas de délai supérieur à 1 heure entre le LBA et l’examen cellulaire une conservation à +4 ° est nécessaire afin de ne pas modifier la morphologie des cellules
  • 42. Techniques au laboratoire • Aspect macroscopique *clair: non fumeur *brunâtre: fumeur *laiteux: lipoprotéinose *hémorragique: syndromes hémorragiques *jaunâtre : ictérique
  • 43. Techniques au laboratoire • Analyse micro biologique: histochimie, immunohistochimie, hybridation in situ, culture • Analyse biochimique *LBA contient des substances chimiques (protéines, lipides enzymes, mucines, glycoprotéines, composants du surfactant) *Quantification difficile vu l’absence d’éléments de référence • Analyse minéralogique
  • 44. LBA chez le sujet normal • Formule cellulaire: *macrophages: 84%7 *lymphocytes: 15  3% *polynucléaires neutrophiles : <5% *polynucléaires éosinophiles : <1% • Typage lymphocytaire: essentiellement T avec un rapport CD4/CD8 : 1,2 • cellules de Langerhans (CD1): 0-3%
  • 45. LBA en pathologie • Fumeur: hypercellularité par afflux alvéolaire de macrophages contenant un pigment brunâtre • Sarcoïdose: *alvéolite lymphocytaire de phénotype CD4 *CD4/CD8   • Pneumopathie d’hypersensibilité: *alvéolite lymphocytaire de phénotype CD8 *CD4/CD8  
  • 46. LBA en pathologie • Histiocytose Langerhansienne *hypercellularité macrophagique *cellules de Langerhans   (15%) • Fibrose pulmonaire diffuse:  volume,  macrophages, polynucléose neutrophile ou éosinophile, discrète lymphocytose • Pneumoconioses • Pathologie infectieuse • Pathologie tumorale