Bacteroides, fusobacterium, porphyromonas y prevotella
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Bacteroides, fusobacterium, porphyromonas y prevotella Bacteroides, fusobacterium, porphyromonas y prevotella Presentation Transcript

  • Bacteroides Prevotella Fusobacterium Porphyromonas Claudia Rocío Castañeda Ramírez, Esp, MSc . Bacteriología Médica Universidad del VALLE
  • Coloración de Gram en Bacterias Anaerobias Gramnegativo Grampositivo Coco Coco Peptococcus Bacilo Bacilo Veillonella Peptoestreptococcus Actinomyces Bacteroides Bifidobacterium Fusobacterium Eubactererium Porphyromonas Lactomacillus Prevotella Propionibaccterium Clostridium
  • Bacteriodaceae Clasificación • Familia Bacteroidaceae: – – – – – Bacteroides Fusobacterium Leptotrichia (raro en enfermedades humanas) Prevotella Porphyromomas • Anaerobios no esporulados
  • Bacteriodaceae – Pueden ser FN de Orofaringe, tracto urogenital y colon. – Patógenos oportunistas Morfología: – Bacilos gram negativos – Pleomórfico – Tinción irregular o bipolar: • Fusobacterium nucleatum: largos y delgados con extremos puntiagudos
  • Bacilos anaerobios
  • Bacteriodaceae   Cada tipo de Colonia que crece debe ser confirmado con coloración de Gram y subcultivado bajo condiciones aerobias y anaerobias para confirmar que es un anaerobio. Bioquímica:    Tolerancia de la bilis Producción de pigmentos Sensibilidad a los antibióticos:    Vancomicina (V) Kanamicina (K) Colistina (C).
  • Bacteriodaceae Bacteroides fragilis Prevotella Porphyromonas   V R R S K C Bilis Pigmento R R R R S S +/R R S + B. fragilis: catalasa positivo GLC – diferenciar Fusobacterium   Fusobacterium es productor de ácido butírico mientras que los demás producen ácidos mixtos. F. nucleatum y F. necrophorum (lipasa+) son los principales patógenos.
  • GLC: Gas liquid chromatography
  • Bacteroides sp
  • Bacteroides sp • Son los más frecuentemente aislados de infecciones por anaerobios en el ser humano*. • Gran cantidad de factores de virulencia y mayores tasas de resistencia contra los antimicrobianos. • 1898: Bacillus fragilis • 1919: Bacteroides fragilis. • Grupo heterogéneo: bacilos Gramnegativos, anaerobios obligados, pleomórficos, asociados al hospedero y que no podían ser asignados a ningún otro género. • Nuevas técnicas de análisis filogenético redefine: – Bacteroides, Prevotella y Porphyromonas
  • Bacteroides sp • • • • • Gram negativos resistentes a la bilis Contenido de guanina-citosina: 40 y 48% Sacarolíticos Se incluyen más de veinte especies Grupo Bacteroides fragilis (características bioquímicas, morfológicas e implicaciones clínicas similares): – B. fragilis, B. caccae, B. distasonis, B. eggerthii, B. ovatus, B. merdae, B. stercoris, B. thetaiotaomicron, B. uniformis y B. vulgatus – 2006: B. distasonis y B. merdae reclasificadas en el género Parabacteroides • Implicaciones terapéuticas en las infecciones iguales.
  • Bacteroides sp Flora Normal Patógeno oportunista • Colon: 1011 bacterias/mL • Anaerobios vs aerobios : proporción de 1000:1 • Fermentación de carbohidratos produce un conjunto de ácidos grasos volátiles (reabsorbidos en intestino grueso) y constituyen una proporción importante de los requerimientos energéticos diarios del hospedero • Infecciones importantes por su morbilidad y mortalidad • Adquisición de genes que codifican para factores de virulencia. • La mayoría de estos factores pueden encontrarse en diferentes especies del género. • B. fragilis : más factores de virulencia*
  • Bacteroides sp: Importancia en la respuesta inmune del hospedero Polisacáridos de la cápsula de B. fragilis : – Activación de los linfocitos T CD4+ – Desarrollo de la respuesta inmune T dependiente
  • Bacteroides sp: Factores de virulencia • Adhesión: primer paso para la colonización o la infección. • Unión de B. fragilis y B. ovatus a las células intestinales: – Estructuras tipo pili. – Fimbrias peritricas – Adhesinas tipo lectina (algunas cepas de B. fragilis) • Evasión del sistema inmune: • B. fragilis (producción de ácidos grasos de cadena corta): – Pueden inhibir la actividad bactericida de los neutrófilos – Capacidad de interactuar con macrófagos peritoneales: • Actividad procoagulante • Depósitos de fibrina
  • Bacteroides sp: Factores de virulencia • Polisacáridos capsulares de B. fragilis: – Factor de virulencia más importante. – Directamente relacionados con la formación de abscesos intraabdominales. • Capacidad de producir enzimas – Hialuronidasa y la condroitin sulfatasa: degradación de la matriz extracelular del hospedero – Neuroaminidasa, colagenasa, fibrinolisina y heparinasa – Hemolisinas • Cepas enterotoxigénicas de B. fragilis producen una metaloproteinasa termosensible dependiente de zinc (fragilisina): – Enfermedad diarreica en animales, niños pequeños y adultos – Puede tener importancia en infecciones extraintestinales .
  • Bacteroides sp: Principales infecciones • Polimicrobianas. • Infecciones intraabdominales: – Abscesos intraperitoneales y viscerales – Peritonitis causados por la alteración de la integridad de la mucosa intestinal (Cirugías, ruptura de un divertículo, apendicitis o cáncer de colon. • Infecciones en tracto genital femenino – Ocasionalmente en cultivos vaginales – Abscesos en la glándula de Bartolino y en las trompas de Falopio – Aborto espontáneo a mitad de gestación • Infección de heridas, tejido subcutáneo y abscesos del área rectal (úlceras de decúbito y abscesos perisacrales).
  • Bacteroides sp: Principales infecciones • Osteomielitis: – Huesos largos pos trauma o fractura o relacionada con enfermedad vascular periférica, úlceras de decúbito – Huesos craneales y faciales – Pélvica después de cirugía • Bacteriemias por anaerobios son poco frecuentes – Asociadas con cirugías y enfermedades intestinales • Pericarditis: diseminación vía sanguínea a partir de lesiones del tracto gastrointestinal. • Abscesos cerebrales • Diarrea acuosa autolimitada (niños), diarrea asociada a antibióticos y enfermedades inflamatorias del intestino.
  • Bacteroides sp: Diagnóstico Microbiológico Coloración de Gram a partir de Hemocultivo positivo a las 28 horas de incubación
  • Bacteroides sp: Diagnóstico Microbiológico Cultivo en agar sangre en anaerobiosis de B. fragilis.: • 48 horas de incubación • Colonias : 1 a 3 mm de ancho, de color gris brillante. • Aspecto macroscópico de las colonias: grises o blancas, enteras, convexas, traslúcidas u opacas y no hemolíticas.
  • B. fragilis
  • Bacteroides fragilis
  • Bacteroides sp: Diagnóstico Microbiológico Tinción de Gram Microscopía óptica. Aumento 1000x: • Bacilos gramnegativos ovoides con extremos redondeados. Se disponen en forma aislada o en pares.
  • Fusobacterium nucleatum
  • Fusobacterium sp El género Fusobacterium tiene tres especies de importancia clínica:  F. nucleatum  F. alocis  F. sulci Son bacilos gramnegativos que forma parte de la microbiota del surco gingival.  F. nucleatum: está muy relacionado con la angina de Vincent.
  • Fusobacterium sp  Inmóviles  Respiracion: anaerobios estrictos.  Factores de virulencia:        Compuestos volátiles para nuestras células. Proteínas de superficie (adhesinas). Fimbrias Libera lipopolisacáridos-> inhiben la quimiotaxis de neutrófilos. Leucotoxina Metabolitos tóxicos-> ácidos grasos de cadena corta Sustancias volátiles: ácido butírico, NH3, SH2, metil captano y el indol (halitosis)
  • Fusobacterium sp  Morfología:   Metabolismo:   Gingivitis y periodontitis. Habitat:    No fermentativas, no utilizan azúcares. Clínica:   Pleomórficas, con forma de huso con extremos puntiagudos. Placa subgingival. Equivalente: Prevotella intermedia. Especies:  F. nucleatum, F. periodonticum, F. aloci, F. sulci
  • Fusobacterium nucleatum Angina de vincent:  Combinación de especies de Fusobacterium y espiroquetas  Sobrecrecimiento: faringitis anaeróbica  Membrana gris  Mal olor
  • Microbial ecology of subgingival plaque as a pathogenic biofilm Nishihara Tatsuji and Koseki Takeyoshi, Periodontology 2000:2004;36:14
  • Porphyromonas sp  Bacilos Gram negativos. Inmóviles.  Respiración: anaerobios estrictos.  Factores de virulencia:        Fimbrias para agregarse a otras bacterias. Forman vesículas de superficies:  Señuelos para consumir factores defensivos (complemento, péptidos antimicrobianos, anticuerpos, etc). Colagenasas: destruyen colágeno sostén de los tejidos. Secretan diversas enzimas: desoxirribonucleasas, fosfolipidasas. Pueden degradar fibrinógeno. Gingipaínas: proteasas inespecíficas, hemolíticas (obtienen Fe). Destruyen proteínas defensivas (ej.: lactoferrina y transferrina).
  • Porphyromonas sp  Metabolismo: Utilizan principalmente aminoácidos y no fermentan hidratos de carbono.  Obtienen menos moléculas de ATP que los microorganismos con cadena respiratoria.  Liberan metabolitos tóxicos para las células del hospedador, algunos son volátiles (halitosis). 
  • Porphyromonas sp Porphyromonas gingivalis  Clínica: Asociada a las periodontitis crónicas.  Importante relación con la gingivitis:    Permite a la Porphyromonas gingivalis infectar el área más cercana a la raíz de los dientes causando caries e infecciones. La gingivitis toma una forma nueva, llamada gingivitis ulcerativa necrotizante aguda (GUNA).
  • Porphyromonas sp Porphyromonas gingivalis  Clínica: GUNA: destrucción acelerada de los tejidos afectados y diseminación local o sistémica de la infección.  Propagación más allá de la gingiva (encías) e invade los tejidos locales de la boca y la cara: el síndrome se llama el NOMA.  También se producen abcesos periapicales. 
  • Porphyromonas sp Porphyromonas gingivalis  Habitat:  Surco gingival: formando parte de la placa subgingival.   Ambiente anaeróbio : bolsas periodontales. Cultivo:    Agar-sangre con suplementos (vitamina K y hemina) incubando en anaerobiosis. Las colonias crecen muy lentamente (7-15 días). Importante-> colonias pigmentadas --> marrón ->negro (brillantes).
  • Porphyromonas sp Porphyromonas gingivalis  Tratamiento: Realizando raspado y alisado radicular  No se consigue una erradicación definitiva, ya que esta bacteria suele localizarse en áreas de difícil acceso como las furcas o la base de las bolsas periodontales.  Cirugía resectiva también es más predecible que la cirugía de acceso. 
  • Porphyromonas sp Porphyromonas gingivalis  Tratamiento:  El tratamiento antimicrobiano sistémico es eficaz si se combina con raspado y alisado radicular y cirugía resectiva.
  • Determinantes patogénicos de Porphyromonas gingivalis en la enfermedad periodontal Porphyromonas gingivalis Teixeira S et al. J Clin Periodontol 2009
  • Porphyromonas sp Porphyromonas endodontalis  Es menos patógena por poseer menos factores de virulencia. P. assacharolytica  Se aisla en heces y está en un bajo número en la cavidad oral.
  • Porphyromonas gingivalis (Pg) Determinantes patogénicos de Porphyromonas gingivalis en la enfermedad periodontal Socransky S, Haffajee A. Periodontology 2000, 2005 Cortesia: Dra. Sonia Gutierrez.
  • Género Prevotella    Bacilos Gram negativos. Inmóviles. Respiración: anaerobios estrictos. Factores de virulencia:    Proteasas que degradan inmunoglobulinas. Fimbrias que participan en la agregación y coagregación bacterianas. Metabolitos tóxicos-> muerte de células del hospedador por contacto.
  • Género Prevotella  Clínica:   Periodontitis, gingivitis, abscesos periodontales y periapicales. Gingivitis en embarazadas: éstas bacterias degradan hormonas que se sintetizan en el embarazo.  Ejemplo de Disbiosis de un ecosistema oral: Las hormonas del embarazo inducen el crecimiento excesivo de una/s especies del ecosistema del surco gingival. La acción nociva de esas bacterias induce, a su vez, una respuesta inflamatoria (gingivitis de la embarazada) reversible cuando desaparece la causa (las hormonas del embarazo).
  • Género Prevotella  Habitat:   Surco gingival, forma parte de la placa subgingival. Coloniza ese habitat debido a que existe anaerobiosis. Medios de cultivo:     Muestra: surco gingival, donde no hay O2. Agar-sangre. Utilizar en los medios de cultivo vitamina K y hemina como suplementos. La mayoria de las especies de Prevotella que se aislan en la especie humana son pigmentadas. Si se exponen las placas con colonias crecidas (aprox 10 días) a la luz ultravioleta (UV) se observan que las colonias poseen un color rojizo. Esto permite diferenciarlas de las colonias de Porphyromonas gingivalis que tambien son pigmentadas (negras) pero que no fluorescen bajo luz UV.
  • Género Prevotella Especies de mayor interés del género:  Sin pigmento:     Pigmento variable:   P. bivia P. buccae P. buccalis. P. denticola Con pigmento:      P. intermedia P.melaningenica P. corporis P. nigrescens P. loescheii.
  • Cabina de anaerobiosis