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Siembra

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Siembra Siembra Presentation Transcript

  • Cultivo Puro Técnicas de aislamiento Mantenimiento y preservación de cultivos puros Morfología macroscópica Morfología microscópica
  • Definición
    • El cultivo puro representa las condiciones artificiales para el desarrollo de las bacterias y otros microorganismos y las condiciones impuestas a los microorganismos mediante el manejo del laboratorio.
    • Para determinar las características de especies concretas de microorganismos, es imperativo que el organismo se aislé y se desarrollo en el laboratorio como un cultivo libre de otras especies.
  • Método para aislar cultivos puros.
    • Técnica de siembra por estrías en placa
    • Técnica por difusión en placa
    • Técnica de la placa vertida
    • Técnica del enriquecimiento del cultivo
    • Técnica de las diluciones en serie
    • Aislamiento de una sola bacteria
    Técnicas de aislamiento
  • Técnicas de siembra por estrías en placa
    • Con un asa bacteriológica, se pasa una porción de la muestra a la superficie de un medio de cultivo hecho a base de agar y se siembra en el medio por estrías en cuadrantes.
  • Técnicas de siembra por difusión en placa
    • Para sembrar por difusión en placa, por lo común se usa una varilla de cristal estéril para esparcir la muestra.
    • Esta operación hace posible adelgazar la muestra de tal manera que en la superficie del agar quedan las bacterias separadas unas de otras.
  • Técnicas de siembra en placa
    • Una porción de una colonia que se pase a un medio de cultivo en tubo viene a ser un cultivo puro.
    • Después de una incubación apropiada, el desarrollo de cada cultivo se observa al microscopio o mediante cultivo para verificar que es puro.
    • El principio de la técnica de la placa vertida es la dilución (adelgazamiento) de la muestra en tubos.
    • El medio se mantiene al estado líquido a una temperatura de 45 – 52 º C para permitir que el inóculo se distribuya adecuadamente en el medio.
    • Esta técnica se hace en forma cualitativa o cuantitativa.
    Técnica de la placa vertida
  • Técnica de la placa vertida
  • Técnica del enriquecimiento del cultivo.
    • El principio de esta técnica, es procurar un ambiente de cultivo diseñado (medio de composición conocida y condiciones específicas de incubación) que pueda favorecer el desarrollo de cierto tipo concreto de bacterias que necesitemos pero que no sea adecuado para las demás
  • Técnica del enriquecimiento del cultivo.
    • Los medios de enriquecimiento se usan generalmente cuando el tipo de bacteria que queremos aislar se encuentra en muy pequeñas cantidades y se desarrolla con mayor lentitud que muchas de las otras especies presentes en el inóculo.
  • Técnica del enriquecimiento del cultivo.
  • Técnica de las diluciones en serie.
    • Se realiza mediante diluciones seriadas.
    • Se basa en cuando la muestra esté muy diluida contendrá solamente la bacteria que buscamos.
    • O dependiendo de la dilución realizada se aislara el microorganismo adecuado.
  • Técnica de las diluciones en serie.
    • Para el aislamiento de microorganismos se puede aplicar la técnica de aislamiento por estría o por extensión en superficie (se trasfiere de 0.1 a 0.5 ml.)
    Dilución Tipo de microorganismo 10 -1 a 10 -3 Hongos 10 -4 a 10 -6 Levaduras 10 -7 a 10 -10 Bacterias
  • Técnicas de Siembra
    • a) Siembra por inoculación o agitación: Con una asa bacteriológica, esterilizada, se toma cantidad de inóculo, se introduce en el centro del medio líquido, agitándose, no tocar la pared del tubo
    • b) Siembra por estría (en tubos de agar inclinado): Muestra de material en asa de siembra, deslizar en zigzag, empezar por superficie más profunda
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    • c) Siembra por picadura: Asa recta, tomar muestra, sembrar en agar semisólido, forma vertical
    • d) Siembra por dispersión-agotamiento: Asada de la muestra, sembrar en medió sólido, en placa Petri
    • e) Siembra por vertido en placa: Diluciones en varios tubos, pipeta 1cc de muestra o dilución, agregar en placa Petri estéril, se agrega medio licuado, mantener a 55°C, movimientos rotatorios, solidificar
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  • Morfología y crecimiento de las colonias Las colonias son masas visibles de células que se forman por división de una o varias células. El desarrollo de colonias sobre superficies de agar permite al microbiólogo identificar las bacterias porque las especies forman a menudo colonias con una forma y aspecto característico. El tamaño, forma, textura y color de una colonia es propio de cada organismo. La morfología de la colonia de una bacteria puede variar según el medio en que crezca la bacteria.
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  • Colonias de bacterias Serratia marcescens Cultivada en Agar MaConkey Pseudomonas aeruginosa Cultivada en Agar Tripticasa-soja Shigella flexneri Cultivada en Agar MacConkey Colonias de Bacillus subtilis que han crecido en medios con pocos nutrientes
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