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cultivo de microorganismos del ambiente cultivo de microorganismos del ambiente Document Transcript

  • qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqw UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE INGENIERÍA ertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwe E.A.P. INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL rtyuiopasdfghjklzxcvbnmqwert yuiopasdfghjklzxcvbnmqwerty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui CULTIVO DE opasdfghjklzxcvbnmqwertyuio MICROORGANISMOS DEL AMBIENTE pasdfghjklzxcvbnmqwertyuiop asdfghjklzxcvbnmqwertyuiopa CURSO: Laboratorio de Microbiología sdfghjklzxcvbnmqwertyuiopas dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasg DOCENTE: Mblgo. Carlos Azañero Díaz dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasd GRUPO: ¨D¨ fghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfg ALUMNA: Aburto Rodríguez Ruddy hjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmqwertyuiopasdlfghjk lzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklz
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente I. INTRODUCCIÓN El control microbiológico del aire se integra como parte del proceso de aseguramiento de la calidad, que tiene en cuenta un riesgo de naturaleza microbiana, cualquiera sea el campo de actividad. Los higienistas, en demanda de un dominio total del riesgo microbiológico, siempre están consecutivamente interesados: En un producto en riesgo, En su medio ambiente próximo, contaminante potencial por contacto Su medio el ambiente lejano como el ordenamiento y los equipamientos de los locales. En este último caso, el aire ambiente representa el vector principal de contaminación entre una fuente contaminante y un receptor en riesgo. Debido a los avances en el área técnica y científica nos lleva a cada vez más situaciones con alto riesgo microbiológico: caso de un enfermo puesto bajo el efecto de un tratamiento inmunodepresor o sufriendo una intervención quirúrgica larga y arriesgada en el plano infeccioso; caso de una persona que trabaja en un laboratorio con cepas microbianas altamente patógenas; caso de un producto alimenticio ultra fresco donde solamente la preparación y acondicionamiento aséptico garantizan la conservación. Fuera de estos contextos de "alto riesgo microbiano" y de medio ambiente ultra limpio, la medida exacta de la aérobiocontaminación interesa a los epidemiologistas en los temas: El estudio de la posible correlación entre la composición cuantitativa y cualitativa de la flora microbiana (según la localización geográfica, de la urbanización, de la estación, del confinamiento, etc.) y la emergencia de enfermedades respiratorias o alergias. El conocimiento de las causas y los mecanismos de aparición y acción de ciertas enfermedades profesionales, asociadas a la contaminación particular y microbiana del aire respirado. http://pdfcast.org/pdf/4-microorganismos-en-el-ambiente Microbiología General 1
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente II. OBJETIVO Comprobar la ubicuidad de los microorganismos. Para ello se realizaran análisis de diferentes ambientes que tienen que tienen incidencia en el procesado de los alimentos, como son: Superficies de trabajo, aire y manipuladores. III. MATERIALES Material de Laboratorio Placas de agar para recuento en placa (PCA) Placas de agar OGA Placas de agar MacConkey Hisopos estériles Tubos con 10 ml de solución salina estéril Papel de aluminio estéril con una abertura central de 9 cm2 IV. Fundamento teórico: Análisis del Aire Mecanismo de acción:El aire, además de partículas en suspensión es portador de bacterias o sus esporas. Por ello puede ser causa tanto de contaminación de alimentos y superficies como de infecciones en el hombre (patologías respiratorias, etc.). El método de sedimentación en placa es uno de los más sencillos para la determinación de microorganismos en aire. A pesar de ello, los resultados obtenidos son orientativos de las cifras de microorganismos presentes en el aire, ya que estos niveles varían en función de las corrientes de aire y del tamaño de las partículas de suspensión. Microbiología General 2
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente Aplicaciones:Existen diversos métodos para el análisis de aire: Sedimentación, filtración, choque en líquidos y precipitación electrostática, entre otros. Análisis de Superficies Mecanismo de acción: Para llevar a cabo una correcta manipulación de los alimentos es necesario mantener una limpieza adecuada tanto en las superficies de trabajo como en los utensilios que hay que emplear. A no ser que los alimentos hayan sido esterilizados, todos los productos llevan microorganismos. En la manipulación, el envasado y el almacenaje de los alimentos, estos microorganismos se mantuvieron en todo momento en niveles que aseguren la calidad microbiológica del alimento. Aplicaciones:El objetivo de los análisis microbiológicos de superficies es comprobar el estado higiénico del lugar de trabajo, de modo que evitemos la contaminación cruzada durante el procesado de los alimentos. Existen distintos métodos para el examen microbiológico de las superficies: Método del hisopo, de la placa de contacto, de la jeringa de agar, de la lengüeta (o película pegajosa) Análisis de Manipuladores Mecanismo de acción:Un alimento puede estar contaminado en su origen o bien puede el manipulador quien lo contamine durante el procesado. L persona que va manipular el alimento tiene una abundante carga microbiana en la piel, por ello resulta evidente la necesidad de que el manipulador mantenga unas perfectas condiciones de higiene durante el procesado de los alimentos. Aplicaciones:El objeto del análisis de manipuladores es comprobar que la persona que procesa un alimento no es una fuente de contaminación de éste. Se puede estudiar: manos, uñas, y fosas nasales. Microbiología General 3
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente V. procedimiento: 1. Análisis de aire por sedimentación: Destapamos 2 placas de PCA y 2 placas de OGA en el lugar cuyo nivel de contaminación deseamos examinar durante diferentes intervalos de tiempo: 0,5 y 1,0 horas. Tapamos las placas de PCA e incubamos durante 24-48 horas a 370 C. las placas de OGA se incubaron a temperatura ambiente durante 4 días En las placas de PCA se determinaron las bacterias aerobias mesófilas viables totales ambientales y en OGA se determinaron los hongos (mohos y levaduras) totales ambientales 2. Análisis de Superficies Planas y no Planas: Método del Hisopo. Delimitamos la superficie que analizamos mediante una plantilla de papel de aluminio estéril con una abertura de dimensiones conocidas (Ej. 9 cm2). Humedecimos el hisopo estéril en una solución de 5 a 10 ml de solución salina estéril y restregamos varias veces sobre la superficie delimitada por la plantilla. Introducimos el hisopo en el tubo con solución salina estéril y dejar durante 15 a 30 minutos de manera que los microorganismos se liberen del algodón al caldo. Sembramos 0.1 ml de dicho caldo en una placa de PCA y Agar MacConkey (medio selectivo y diferencial para Entereobacterias). Incubamos durante 24 a 48 horas a 370C (Recuento expresado como UFP/9cm2). 3. Análisis de Manipuladores: El alumno no se lavó las manos, ya que la técnica consistía en pasar la mano por la superficie de placas con PCA y MacConkey. Incubamos las placas 24-48 horas a 370C. Observamos el crecimiento de colonias características en cada medio de cultivo. Microbiología General 4
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente VI. RESULTADOS: 1. Análisis de aire por sedimentación: Muestras dePlaca PCA: Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó dentro del Laboratorio de Microbiología durante 15 minutos. Cantidad de colonias: 1 UHF Descripción: Aspergillus blanquecina. Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó en las Terrazas de Agroindustria durante 15 minutos. Cantidad de colonias: 2UHF Descripción: Aspergillus, transporte circular ondulatorio. Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó en un Kiosco de la UNS durante 15 minutos. Cantidad de colonias: 0 Descripción: ---- Microbiología General 5
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente Muestras de Placa OGA: Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó dentro del Laboratorio de Microbiología durante 30 minutos. Cantidad de colonias: 1 UHF Descripción: pequeñas y blanquecinas; moho. Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó en las Terrazas de Agroindustria durante 30 minutos. Cantidad de colonias: 20 UHF Descripción: hay presencia de estos organismos en abundancia, provenientes de árboles y los hongos, próximos al jardín. Bacterias Aspergillus, Penicillium. Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó en un Kiosco durante 15 minutos. Cantidad de colonias: 6 UHF Descripción: colonias de distintos tamaños entre grandes y pequeñas color blancas. Bacterias Aspergillus, Penicillium. Microbiología General 6
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente 2. Análisis de Superficies Planas y no Planas: Muestras de Placa PCA: Método del Hisopo: El análisis se realizó dentro del Laboratorio de Microbiología. Cantidad de colonias: ninguna. Descripción: --- Técnica del Hisopo: El análisis se realizó en las Terrazas de Agroindustria. Cantidad de colonias: ninguna. Descripción: --- Técnica del Hisopo:El análisis se realizó a kiosco de venta de alimentos envasados. Cantidad de colonias: ninguna. Descripción: --- Microbiología General 7
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente 3. Análisis de Manipuladores: Muestra Placa PCA: Técnica del Hisopo: El análisis se realizó a una compañera del aula, Nadia Mendoza. Cantidad de colonias: 7 Descripción: Se observó el crecimiento de colonias pequeñas, blancas, uniformes algunas esféricas y en forma ondulatoria. Bacterias mesófilas. Muestra Placa MacConkey: Técnicadel Hisopo:El análisis se realizó a una compañera del aula, Nadia Mendoza. Cantidad de colonias: 2 Descripción: Se observó el crecimiento de colonias transparentes. Microbiología General 8
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente VII. DISCUSIÓN: Según Morris 2000, JHI Estandarizar la medición deesporas de Aspergillus en el aire. Se requieren sistemas de altovolumen de medición; los niveles de esporas varíandurante el día. El aire además de partículas en suspensión, es portador de bacterias en forma vegetativa o esporulados, esporos de hongos y virus. Por ello puede ser causa tanto de contaminación de alimentos como de infecciones en el hombre (patologías respiratorias, etc.).Los microorganismos se encuentran presentes en todos los ambientes: en el aire, en el agua, en la superficie de los objetos e incluso sobre nuestra piel. Un alimento puede estar contaminado en su origen o bien puede ser el manipulador quien lo contamine durante el procesado. La persona que va a manipular un alimento tiene una abundante carga microbiana en la piel, pero nunca deberán aislarse de ellas bacterias patógenas. Por lo tanto resulta evidente la necesidad de que el manipulador mantenga una perfecta condición de higiene durante el procesado de los alimentos. Cuando se trabaja en Microbiología de los alimentos es importante determinar el grado de contaminación ambiental, ya que de las condiciones higiénicas del lugar de trabajo (utensilios, superficies, etc.) y del propio manipulador van a depender en parte el número y tipo de microorganismos en el alimento. El agar MacConkey se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. En este medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la Microbiología General 9
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. Agar selectivo según Mossel y Col. (1970), este agar permite la demostración y numeración de mohos y levaduras en todo tipo de material de investigación (alimentos, material clínico, etc.).El agar-oxitetraciclina-glucosa-extracto de levadura ha sido recomendado como medio de rutina para la investigación de mantequilla.En la investigación de muestras de heces procedentes de pacientes tratados con Tetraciclina, las Enterobacteriáceas sólo son inhibidas de manera insuficiente. En tales casos, es preferible el empleo de Gentamicina en vez de la Oxitetraciclina. Microbiología General 10
  • Cultivo de Microorganismos del Ambiente VIII. CONCLUSIÓN: Se comprobó la ubicuidad de los microorganismos, como por ejemplo: en las Terrazas que están cerca de la Planta Piloto o el Kiosco que está en la UNS, hay presencia de hongos, ya que al realizar el Análisis de Aire, se obtuvo crecimiento en el agar OGA. También se determinó la presencia de bacterias aerobias viables mediante al Análisis de Aire realizado en el Laboratorio, esto debido a que como siempre se trabaja con cultivos de microorganismos estos se van al aire lo cual se puede evitar teniendo una correcta ventilación del ambiente ya mencionado. El Análisis de Superficies indica presencia de bacterias, esto comprueba que tan importante es el saneamiento en todos los ambientes habitables por las personas. En el Análisis de Manipuladoresse comprueba que todo las personas presentan bacterias como es el caso de nuestra compañera solo que en pequeñas cantidades, lo cual demuestra que la asepsia es indispensable para conservar las salud. IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: MIDIGAN/ PARKERA/ MARTINKO, Broock – Biología de los Microorganismos, Editorial Mc Graw Hill,10ma Edición, Impreso en España 1998. Capítulo 20, pág.: 689-691,692. http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20MAC%20CONKEY.pdf http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm http://pdfcast.org/pdf/4-microorganismos-en-el-ambiente Microbiología General 11