Universidad Nacional del Santa
Facultad de Ingeniería
Escuela Académico Profesional de Ingeniería Agroindustrial

MICROBIO...
ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL
PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL

I.

INTRODUCCIÓN

T...
ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL
PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL

II.

FUNDAMENTO TEÓ...
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estancadas; otras b...
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a. Material Biológi...
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Con el asa bacte...
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Observa los tubo...
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4.3.

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Cultivo 1 :

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MICROORGANISMO

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El cambio de color ...
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color rojo.

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VII.

CONCLUSIONES
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degradadas hasta un...
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  1. 1. Universidad Nacional del Santa Facultad de Ingeniería Escuela Académico Profesional de Ingeniería Agroindustrial MICROBIOLOGÍA GENERAL MICROBIOLOGÍA GENERAL Profesor: Blgo. Mblgo. Carlos Azañero Díaz Profesor: Blgo. Mblgo. Carlos Azañero Díaz Integrantes: Integrantes: Cortijo Palacios Kiara. Cortijo Palacios Kiara. Gamboa Cruzado Wagner. Gamboa Cruzado Wagner. Taboada Rosales Yakcy. Taboada Rosales Yakcy. Villaca Terrones Walter. Villaca Terrones Walter.
  2. 2. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL I. INTRODUCCIÓN Todos los seres vivos tienen la capacidad de efectuar una serie de reacciones que les permiten incorporar y transformar diversos compuestos. Estas transformaciones son catalizadas por enzimas y son acompañadas por reacciones energéticas. Aún cuando todas las reacciones biológicas son catalizadas por enzimas el tipo de estas o de los sistemas enzimáticos varía en los diferentes microorganismos. De este modo para estudiar el metabolismo de un microorganismo se utiliza una batería de sustratos y después de incubar se procede a reconocer el tipo de reacciones que se efectuaron mediante la determinación de los productos que se formaron. La suma de las actividades enzimáticas, así como las características nutricionales permiten la identificación de las bacterias. Existen sistemas especializados en la identificación de bacterias. Las bacterias completan varias actividades bioquímicas usando los nutrientes que el ambiente les ofrece. Las transformaciones bioquímicas que ocurren dentro y fuera de la célula y son mediadas por las enzimas. Una vez las bacterias realizan estas actividades de degradación, los organismos liberan productos que pueden ser utilizados para su caracterización o para la confección y producción de materiales y alimentos. I. OBJETIVO • Demostrar e interpretar la acción degradativa de un microorganismo sobre un determinado sustrato contenido en un medio de cultivo específico. Página 2
  3. 3. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL II. FUNDAMENTO TEÓRICO En cualquier ecosistema existen condiciones constantes y dinámicas en las que cada miembro compite con los demás en busca de un nicho favorable. En la mayoría de los casos, los efectos destructores de los microorganismos durante el desarrollo de una enfermedad se deben a la satisfacción de sus necesidades particulares de supervivencia. La enfermedad constituye un subproducto de sus actividades metabólicas, los microorganismo deben competir para asegurar su alimento de manera que deben tratar de ajustar el medio (Temperatura, pH y potenciales de oxidación y reducción a sus condiciones óptimas. En ciertos casos la patogénesis de la enfermedad incluye: 1. El consumo de tejidos efectuado por enzimas extracelulares. 2. El bloqueo físico de capilares debido a un crecimiento limitado. 3. La inhibición competitiva de las reacciones en la cadena respiratoria que interfiere con el pigmento análogo del huésped. El estudio del metabolismo microbiano es esencial para comprender completamente la relación huésped-parásito. Las numerosas y variadas reacciones bioquímicas que constituyen el metabolismo sintético (ANABOLISMO) y energético (CATABOLISMO) de los microorganismos se realizan y controlan por medio de las enzimas extracelulares e intracelulares. Las bacterias se encuentran en casi todos los ambientes e intervienen en varios procesos biológicos. Por ejemplo, pueden producir luz, como en la fosforescencia de los peces muertos y pueden producir combustión espontánea en almiares, pajares y graneros de lúpulo. Ciertas formas anaerobias desprenden, por descomposición de la celulosa, gas de los pantanos en charcas Página 3
  4. 4. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL estancadas; otras bacterias favorecen la formación de depósitos de hierro ocre y manganeso en los pantanos. Las bacterias también afectan a la naturaleza y composición del suelo. Como resultado de su actividad, los restos de sustancias orgánicas de las plantas y los animales se descomponen en partículas inorgánicas. Este mecanismo es una fuente importante de alimento para las plantas. El proceso fotosintético en que se basan las plantas fue, casi con certeza, desarrollado en primer lugar en las bacterias; el reciente descubrimiento de una bacteria fotosintetizadora denominada Heliobacterium chlorum puede ayudar a la comprensión de este desarrollo fundamental en la evolución de la vida. Todos los seres vivos llevan a cabo el procesamiento de los nutrientes que los mantienen vivos. A este conjunto de procesos, se le conoce como metabolismo y consiste de un gran número de reacciones químicas destinadas a transformar las moléculas nutritivas en elementos que posteriormente serán utilizados para la síntesis de los componentes estructurales; como pueden ser las proteínas. Otra parte importante del metabolismo es la de transformar y conservar la energía que está contenida en una reacción química en algún proceso que requiera de energía, como puede ser el trabajo o el movimiento. Es evidente que los nutrientes son transformados cuando entran en un organismo, ya que en ningún caso el alimento contiene todas las moléculas que una célula requiere. Esto se vio con claridad al observar el crecimiento normal de levaduras en un medio de cultivo que sólo contenía glucosa como única fuente de energía. Así pues, se pensó que la síntesis de todos los componentes celulares se llevaba a cabo en el interior de las levaduras. Hoy sabemos que las transformaciones que sufre la glucosa no ocurren en un solo paso, sino que, por el contrario, se forman varios productos intermedios que en muchas ocasiones no tienen una función específica a no ser la de formar parte de lo que se conoce como vía metabólica. La transformación de los nutrientes en compuestos útiles para la subsistencia de un organismo se lleva a cabo por medio de las reacciones químicas que realizan unas proteínas conocidas como enzimas. III. MATERIALES Página 4
  5. 5. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL a. Material Biológico • Cultivos puros bacteriano: 1) Bacillus subtilis, 2) Escherichia coli, 3) Proteus vulgaris, 4) Pseudomonas fluorescens, 5) Staphylococcus aereus. • Placas petri con agar almidón. • Tubos de ensayo con Caldo glucosa rojo de fenol incluida una campana de Durham. • Tubos de ensayo con agar gelatina. • Tubos de ensayo con caldo urea. • Placas de petri con agar Tributirina. b. Material de laboratorio • Asa Bacteriológica calibrada. • Asa Bacteriológica en punta. • Mechero de alcohol. IV. PROCEDIMIENTO: 4.1. DEGRADACIÓN DE CARBOHIDRATOS HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN: • Dividir una placa de agar almidón en tres sectores. Página 5
  6. 6. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL • Con el asa bacteriológica en punta previamente esterilizada por flameado coger la muestra del cultivo puro bacteriano 1. • Sembrar en el centro de uno de los sectores por PUNTURA. 1 2 3 • Sembrar los cultivos puro bacteriano 2 y 3 en los otros sectores respectivamente. • Rotular e incubar a 37°C por 24 horas. • Leer la hidrólisis del almidón cubriendo la superficie de la placa con solución de lugol. FERMENTACIÓN DE LA GLUCOSA: • Sembrar por SUSPENSIÓN el cultivo puro bacteriano 1 en un tubo con CALDO GLUCOSADO. • Sembrar de la misma forma anteriormente descrita los cultivos puros bacterianos 2 y 3. • Incubar a 37°C por 24 horas. Página 6
  7. 7. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL • Observa los tubos en cuanto al cambio de color y formación de gas. 4.2. DEGRADACIÓN DE SUSTANCIAS NITROGENADAS: LICUEFACCIÓN DE LA GELATINA • Sembrar por PICADURA PROFUNDA en tubos con agar gelatina los cultivos puros bacterianos 2 y 4 respectivamente. • Incubar por 37°C entre 24 a 48 horas. • Transcurrido el tiempo de incubación colocar ambos tubos en refrigeración por 2 horas. Observar la licuefacción de la gelatina en cada uno de los tubos. HIDRÓLISIS DE LA UREA • Sembrar por MASIVA EN SUPERFICIE en tubos con agar urea inclinado los cultivos puros bacterianos 2, 3 y 4. • Incubar a 37°C por 24 horas. • Observar la formación o no de un color rojo cereza. Página 7
  8. 8. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL 4.3. DEGRADACIÓN DE LIPIDOS HIDRÓLISIS DE TRIBUTIRINA • Dividir una placa de agar Tributirina en tres sectores. • Con el asa bacteriológica en punta previamente esterilizada por flameado coger la muestra del cultivo puro bacteriano 2. • Sembrar en el centro de uno de los sectores por PUNTURA. • Sembrar los cultivos puro bacteriano 3 y 5 en los otros sectores respectivamente. • Rotular e incubar a 37°C por 24 horas. • Leer la hidrólisis de la Tributirina. 2 4 5 Incubamos V. RESULTADOS: 1. HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN Página 8
  9. 9. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Cultivo 1 : Bacillus Cultivo 2 : Escherichia coli Cultivo 3 : Proteus vulgaris Se observaron zonas claras nos coloreadas después de agregar unas cuantas gotas de lugol, este caso fue del Bacillus subtilis, donde se observaron resultados instantáneos, y también de Proteus vulgaris, pero después de cierto tiempo de espera. Pero, en el caso de Escherichia coli, no se observaron zonas claras. La formación de las zonas claras nos indican que el microorganismo, en este caso las bacterias, hidrolizan el almidón, es decir nos indican que el microorganismo es alfa-amilasa (+). 2. FERMENTACIÓN DE LA GLUCOSA Cultivo 1 : Bacillus Cultivo 2 : Escherichia coli Cultivo 3 : Proteus vulgaris Página 9
  10. 10. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL MICROORGANISMO GLUCOSA ÁCIDO/GAS La solución tornó de un color rojo a amarillo, pero en la campana de Durham tenía un color anaranjado claro. No hubo formación de gas (CO2). 1. Bacillus subtilis NEGATIVO La solución tornó al igual que la anterior de color rojo a amarillo, y sí se formó gas dentro de la campana de Durham. 2. Escherichia coli POSITIVO Al igual que los resultados anteriores, la solución final fue de color amarilla, y se observaron pequeñas burbujas de gas. 4. Proteus vulgaris POSITIVO Página 10
  11. 11. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL El cambio de color de la solución después de la incubación, de color rojo a amarillo, nos indica la formación de ácidos a partir de la degradación de la glucosa, lo cual hace virar el indicador pH contenido en el medio; por ende podemos decir que en estos tres resultados hubo la formación de ácidos. Entonces, el viraje a amarillo indica fermentación (+).Ahora, la formación de gas se observa dentro de la campana de Durham en el tubo de ensayo que contenía a la bacteria Escherichia coli y Proteus vulgaris. 3. LICUEFACCIÓN DE GELATINA Cultivo 2 : Escherichia coli Cultivo 4 : Pseudomonas fluorescens Después de llevar a la refrigeradora por un tiempo determinado de 30 min. Se observaron los siguientes resultados: MICROORGANISMO GELATINASA Página 11
  12. 12. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL El resultado fue sólido, es decir, no hubo acción de la proteína de la gelatina, es decir no hubo hidrólisis de gelatina. Escherichia coli El resultado fue una solución licuada, esto indica la acción de la proteína de la gelatina por acción enzimática. Es decir hubo hidrólisis de la gelatina. Pseudomonas fluorescens Datos Bibliográficos: La gelatina es una proteína que se obtiene por hidrólisis parcial del colágeno y proporciona un sustrato útil para determinar la acción de las enzimas proteolíticas de los microorganismos. Proteína + H2O polipéptidos + H2O Página 12 aminoácidos
  13. 13. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL 4. HIDRÓLISIS DE UREA Cultivo 2 : Escherichia coli Cultivo 3 : Proteus vulgaris Cultivo 4 : Pseudomonas fluorescens MICROORGANISMO UREASA El color inicial del tubo fue anaranjado, tornándose de color amarillo, además de la formación de un espacio en la parte inferior del tubo. Escherichia coli NEGATIVO El color inicial anaranjado, no cambió a ningún otro, pues no se observaron cambios en este tubo, el cual contenía a la bacteria Proteus vulgaris Pseudomonas fluorescens NEGATIVO Esta fue una reacción positiva, ya que el color final fue rojo, esto indica que, los gérmenes que forman la enzima ureasa utilizan la urea dando como resultado la formación de amoniaco que alcaliniza el medio y por presencia de un indicador de pH este vira a Proteus vulgaris POSITIVO Página 13
  14. 14. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL color rojo. Entonces, se puede decir según las fuentes consultadas que los cultivos ureasa (+) producen reacción alcalina (color rojo cereza) Página 14
  15. 15. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Datos Bibliográficos: La urea es un compuesto orgánico nitrogenado que se transforma por algunos microorganismos del suelo, los cuales producen la enzima ureasa. Como resultado de esta actividad microbiana el nitrógeno es liberado al suelo en forma inorgánica. Cuando esta reacción ocurre en medio de cultivo se alcaliniza y el indicador permite percibir visualmente el cambio en acidez del medio. Fuente: http://www.monografias.com/trabajos14/bacterias/bacterias.shtml 5. HIDRÓLISIS DE TRIBUTIRINA Página 15
  16. 16. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Cultivo 2: Escherichia coli Cultivo 4: Pseudommonas fluorescens Cultivo 5: Staphylococcus aureus Se observó un halo transparente alrededor de la colonia formada por las Pseudomonas fluorescens, esto, indicando la hidrólisis del sustrato de tributirina. Pero, el Escherichia coli y el Staphylococcus aureus no formaron un halo transparente alrededor de su colonia, pues no hidrolizaron la tributirina. VI. • DISCUSIONES BACTERIOLOGÍA GENERAL: PRINCIPIOS Y PRÁCTICAS DE LABORATORIO. Evelyn Rodriguez Caballin Página 195: Hidrólisis del almidón El almidón es un homopolisacárido de glucosa, cuyos componentes son la amilosa línea y la amilopectina ramificada. Para utilizarlo, algunas bacterias sintetizan una exoenzima llamada amilasa que hidroliza los enlaces glucosídicos alfa1-4, liberan maltosa e isomaltosa, que ingresan a la célula y pueden metabolizarse. Para evidenciar la presencia de amilasa, se recurre a que el almidón forma un complejo de color azul con el yodo. Las cadenas de amilopectina solo dan un color café rojizo y el Página 16
  17. 17. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL almidón hidrolizado no da ninguna coloración. Por lo tanto la ausencia del color azul indica que el almidón ha sido hidrolizado. • MANUAL DE PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA BÁSICA Y MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS. Luis Roberto Alarcón. Página 36 - 37 Hidrólisis de la gelatina La gelatina es una proteína fibrosa que se obtiene al hervir huecos, cartílago y otros tejidos conectivos que al enfriarse forman gel. Ciertos microorganismos tienen habilidad para romper la molécula mediante la exoenzima gelatinasa, liberando aminoácidos que se usan como nutrientes. La gelatina hidrolizada se vuelve líquida. Hidrólisis de la urea La urea o carbamida es una diamida que se degrada por medio de una amidasa llamada ureasa. Se rompe el enlace del nitrógeno con el carbono, con liberación de amoniaco y CO2. El medio con urea es adicionado un indicador de pH (rojo de fenol). El amoniaco libre alcaliniza el pH y el indicador vira a color violeta. • MICROBIOLOGÍA CLÍNICA PRÁCTICA. Pedro García Martos, Fernando Paredes Salido, María Teresa Fernández del Barrio. Página 117: Metabolismo de Lípidos Los lípidos no constituyen cuantitativamente un elemento nutritivo de importancia para las bacterias; sólo unas pocas especies pueden metabolizar algunos de ellos por contener lipasas, lectinasas u otras enzimas. Investigación de lipasas: Se lleva a cabo por cultivo sobre agar enriquecido. La existencia de lipasa se traduce por la aparición de un halo opaco alrededor de las colonias, a causa de la precipitación de los ácidos grasos. Página 17
  18. 18. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL VII. CONCLUSIONES • Se evidencio el desarrollo de diferentes microorganismos en diferentes sustratos. • Los microorganismos pueden degradar a casi todo tipo de sustancias orgánicas o inorgánicas, también en su manera de actuar y bajo qué condiciones estrictas (aerobias, anaerobias, etc.). • Se llego a entender cómo actúan los mecanismos de estos microorganismos que se valen de enzimas para degradar el sustrato presente en el exterior para así poder absorberlos y realizar sus distintas vías metabólicas necesarias para su supervivencia. VIII. CUESTIONARIO 1. ¿Qué importancia tiene la acción degradativa de un determinado sustrato por parte de un determinado microorganismo? Las bacterias actúan sobre las proteínas, glúcidos y lípidos (moléculas voluminosas) para convertirlas en fragmentos más pequeños y así puedan penetrar a través de la membrana citoplasmática, mediante la participación de exoenzimas. Por ejemplo: • Los microorganismos disponen de carbohidratos en forma de polímeros, la celulosa y el almidón, siendo sus enzimas de tipo extracelular la celulasa y amilasa respectivamente, las que son secretadas a través de la pared celular para ser Página 18
  19. 19. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL degradadas hasta unidades (maltosa, glucosa) que puedan penetrar a la célula con facilidad. • La acción degradativa de un organismo sobre una proteína, por ejemplo la gelatina es debido a la enzima gelatinasa quien logra producir unidades de aminoácidos. • Por otro lado, muchos microorganismos degradan grasa y aceites (lipólisis) y obtener un acetato para el metabolismo de carbohidratos y la síntesis de aminoácidos. “Los tres procesos metabólicos que parecen independientes, relacionados con los carbohidratos, proteínas y lípidos, en realidad están muy relacionados entre sí. Los tres pueden suplir compuestos activos dentro del ciclo de Krebs, proporcionando energía para la síntesis y proveyendo unidades estructurales para componentes celulares” 2. Mencione cual es la razón de añadir indicadores acido – base a algunos medios de cultivo. Ejemplos. Indicadores ácido-base se añaden a menudo a los medios de cultivo con objeto de detectar variaciones de pH. Por ejemplo: Fermentación de la glucosa: el cambio de color de rojo a amarillo indica formación de ácidos a partir de la degradación de la glucosa, lo cual hace virar el indicador de ph contenido en el medio. La formación de gas se observa dentro de la campana de Dirham en el tubo de ensayo. Hidrólisis de la urea: Los gérmenes que forman la enzima ureasa utiliza la urea dando como resultado la formación de amoniaco que alcaliniza el medio y por presencia de un indicador de ph este vira a un color rojo. Este es un resultado positivo. Página 19
  20. 20. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL También, la adición de algunas sustancias indicadoras al medio, los convierte en medios diferenciales debido a que permiten el desarrollo de las bacterias con una apariencia colonial distintiva, según la especie. En virtud de la composición química de estos medios, se pueden caracterizar ciertos géneros bacterianos por la apariencia colonial distintiva en el medio, por ejemplo el medio agar-eosina-azul de metileno (EMB) y el agar-MacConkey contienen Lactosa y un colorante o un indicador de pH. Las colonias fermentadoras de lactosa y productoras de aldehído, producen colonias de un color especial. 3. Mencione las diferentes formas de siembras realizadas en cada uno del los procedimientos y en qué se diferencian. Siembra por puntura: Se realiza sobre un medio solido preparado en una placa petri, generalmente usado para transportar una cantidad mínima de microorganismos y ver su crecimiento. Se realiza con la aza en codo. Siembra por suspensión en caldo: Se realiza en tubos ya sean inclinados o no inclinados y tiene como finalidad transportar y disolver la muestra de microorganismos para determinar la turbidez de dicho caldo luego de ser inoculado. Para este procedimiento se usa la aza de siembra o aza calibrada (0,1ml). Siembra por picadura profunda: Página 20
  21. 21. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Esta técnica se puede realizar en tubos con medios inclinados o no inclinados y suele usarse para determinar la movilidad de los microorganismos. Se hace regularmente con el asa de siembra en punta. Siembra por estría en superficie masiva: Realizada mayormente en tubos inclinados con pico de flauta extendiendo a los microorganismos sobre toda la superficie para ver su efecto de degradación sobre el sustrato utilizado. 4. Describa el fundamento de cada uno de los resultados obtenidos en cada uno de los procedimientos por medio de un cuadro sinóptico o mapa conceptual HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN Los polisacáridos, como el almidón son demasiado largos para ser transportados al interior de la célula. Los microorganismos excretan amilasas que hidrolizan esos polímeros hasta oligosacáridos o monosacáridos que pueden usarse como sustratos para crecer. La hidrólisis de almidón es analizada en HYPERLINK "http://www.monografias.com/trabajos14/medios-comunicacion/medios-co conteniendo almidón en placa. Después de incubar se inundan las placas con lugol que al unirse con el almidón intacto forma un complejo púrpura. Página 21
  22. 22. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL FERMENTACIÓN DE LA GLUCOSA Las bacterias anaerobias o anaeróbicas facultativas a menudo fermentan carbohidratos a ácidos orgánicos y gas (H2 o CO2). Estos pueden detectarse incluyendo en el medio un indicador de pH y una campana Durham. Se pueden ensayar diferentes azúcares como sustrato para diferenciar especies sobre todo bacterias entéricas. LICUEFACCIÓN DE LA GELATINA La mayoría de los polímeros son demasiado grandes para ser transportados dentro de las células. Las bacterias excretan enzimas extracelulares que hidrolizan esos polímeros transportando al interior de la célula en monómeros que les sirven para crecer. La producción de proteasas es evaluada por incorporación de una proteína (gelatina o caseína) en un medio sólido en placa. La placa se inunda con ácido que precipita la proteína no hidrolizada. HIDRÓLISIS DE LA UREA Este enzima hidroliza la urea (H2N-CO-NH2) y origina amonio lo que producirá un incremento del pH que puede detectarse con un indicador. Página 22 Las bacterias se inoculan en un medio con glucosa-peptona y urea al 2%. Como indicador de pH se utiliza rojo fenol.
  23. 23. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL HIDRÓLISIS DE LÍPIDOS En la hidrólisis de lípidos (en este caso tributirina), se debe a la rotura de los enlaces ésteres que unen los ácidos grasos a alcoholes como la glicerina o glicerol. Esto gracias a la segregación de una enzima llamada lipasa. IX. BIBLIOGRAFÍA • http://www.slideshare.net/breid/pruebas-bioqumicas-y-medios-de-cultivo-en-bacterias • http://www.monografias.com/trabajos15/microorganismos/microorganismos.shtml • http://www.monografias.com/trabajos14/bacterias/bacterias.shtml • http://edicion-micro.usal.es/web/identificacion/AyudaPruebas.html • BACTERIOLOGÍA GENERAL: PRINCIPIOS Y PRÁCTICAS DE LABORATORIO. Evelyn Rodriguez Caballin Página 195: • MANUAL DE PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA BÁSICA Y MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS. Luis Roberto Alarcón. Página 36 – 37 • MICROBIOLOGÍA CLÍNICA PRÁCTICA. Pedro García Martos, Fernando Paredes Salido, María Teresa Fernández del Barrio. Página 117: Página 23
  24. 24. ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Página 24

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