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  • 1. Universidad Nacional Autónoma de México Escuela Nacional Preparatoria N° 2 “Erasmo Castellanos Quinto” Práctica N° 2 Determinación de la Velocidad de Reacción de la Catalasa.Materia: Biología VProfesor: Pablo González YovalGrupo: 604Integrantes:  Olivera López Ramses  Reyna González Emmanuel  Sánchez García Nancy Donají  Torres Ramírez Laura Maricela  Vargas López Fernanda Amairani  Zavala Baca Diana Ildegar Fecha de entrega: miércoles 23 de Noviembre de 2011 Ciclo escolar: 2011-2012 1
  • 2. Practica No. 2 Determinación de la Velocidad de Reacción de la CatalasaIntroducciónLa mayoría de las veces, las enzimas pasan inadvertidas cuando se estudia losprocesos metabólicos del organismo, por eso es que, nosotros nos tomamos latarea de demostrar la importancia de las enzimas en el organismo, en este casode la catalasa, y profundizar un poco las reacciones que se llevan a cabomediante cálculos matemáticos.Primero definiremos que es la catalasa y su función. “La catalasa es una enzimaque se encienta en las células de los tejidos animales y vegetales. La función de lacatalasa en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, seforma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H 2O2. La catalasaaumenta la velocidad de la descomposición del peróxido de hidrógenoaproximadamente 1000 millones de veces.” (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 105).Pero, ¿qué es el peróxido de hidrógeno? “Es un líquido transparente e incoloro; esagua con una molécula extra de oxígeno: H2O2.El peróxido de hidrógeno, tambiénllamado, agua oxigenada, es uno de los productos del metabolismo celular endiversos organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguidaen agua y oxígeno por la enzima catalasa.” (Devlin, 1999, p. 140).Ahora, sabiendo esto, la descomposición del peróxido de hidrógeno en agua yoxígeno queda como se muestra en la Figura 1. Figura 1: Reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno. Melo, V. Cuamatzi, O. (2004).“Todas las enzimas son proteínas, por lo tanto, todas las enzimas sufren unadesnaturalización, que son cambios ambientales o los tratamientos químicos quepueden causar una desorganización en la conformación nativa de la proteína, conla pérdida concomitante de la actividad biológica. Como la conformación nativasólo es estable de manera marginal. La energía necesaria para causar ladesnaturalización es con frecuencia pequeña.” (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 98).“La catalasa tiene una Km (Son unidades de concentración que representan lacantidad de sustrato necesaria para fijarse a la mitad de la enzima disponible yproducir la mitad de la velocidad máxima. El subíndice “m” se refiere a Michaeli-Menteln como reconocimiento a sus esfuerzos de investigación. Como unaaproximación puede considerarse que el valor de Km representa la concentración 2
  • 3. del sustrato en una célula viva) alta para el H2O2, por tanto, su efecto es limitado ysólo puede ejercer su función bajo condiciones donde los niveles de H 2O2 estánparticularmente elevados.” (Mamposo, 1998).“La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas porenzimas. Estos estudios proporcionan información directa acerca del mecanismode la reacción catalítica y de la especificidad del enzima. La velocidad de unareacción catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, ya que enmuchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima. La velocidad puededeterminarse bien midiendo la aparición de los productos o la desaparición de losreactivos.” (Devlin, 1999, p. 160)“La relación entre la velocidad y la concentración de los reactivos puedeexpresarse mediante una ecuación muy simple. Para escribir estas reacciones seutilizan constantes de velocidad (simbolizadas por k).Un valor exponencial de 1significa que la velocidad de reacción incrementa en forma lineal con laconcentración del reactivo, doblándose con cada duplicación en la concentracióndel reactivo. Esta situación se denomina cinética de primer orden” (Bohinsk, 1991,p. 181).ObjetivosDiseño y elaboración de un dispositivo que nos permita calcular la velocidad dereacción de la catalasa con agua oxigenada (H2O2).Determinar la velocidad de reacción de la catalasa con agua oxigenada (H2O2).Metodología.Para realizar esta práctica necesitaremos conocer dos procedimientos.1. Elaboración del dispositivo.2. Procedimientos de la reacción química entre el hígado de pollo y el peróxido dehidrógeno. Comenzaremos con el desarrollo y elaboración del dispositivo: 1. Primero se requiere una manguera de aproximadamente 54 cm. que graduaremos con ayuda de una jeringa, agregando poco a poco un mililitro 3
  • 4. de agua. Dejaremos 3 cm de manguera sin graduar. A partir del tercer centímetro se hace la marca de 0 ml, graduar del cero en adelante. 2. Necesitaremos un recipiente con tapa (recipiente 1), esta última con 2 perforaciones del tamaño de la manguera, en uno de los hoyos se insertarala manguera graduada sólo dejando adentro del recipiente los 3 cm que no se graduaron, dejando la marca de 0 ml a la misma altura de la tapa del contenedor. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor de la manguera con plastilina o silicón. Para sostener el peso de la manguera, se pegará un palito de bandera a la superficie de la tapa del contenedor y con cinta adhesiva transparente pegar el palito a la manguera. 3. En la segunda perforación se insertará una manguera más corta de 12 cm aproximadamente sin graduar, sólo se dejaran dentro del contenedor 1ó 2 cm de la manguera. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor de la manguera con plastilina o silicón. 4. A través de la manguera corta, se introducirá al recipiente, agua con colorante (cualquier color, en este caso rosa) con ayuda de una jeringa, puede ser la misma que se empleó para graduar la manguera de 54 cm. Se debe llenar el contenedor hasta el tope, para que el agua coloreada llegue a la altura de la marca de 0 ml de la otra manguera. 5. Necesitaremos otro recipiente (recipiente 2), igual al primero, con tapa y ésta a su vez con dos perforaciones, una del tamaño de la manguera de 12 cm y otra del tamaño de una tapa de goma de tubo de ensayo. El extremo libre de la manguera corta sin graduar ya conectada al primer contenedor, se conectara a la perforación de la tapa del segundo recipiente, sellando de igual modo, para evitar fugas, con plastilina. El la perforación restante de la tapa del segundo recipiente, se colocara un tapón de goma de tubo de ensayo, sellando con plastilina las posibles salidas de aire. 6. En el segundo recipiente se colocara en su interior el hígado de pollo, y con una jeringa (con aguja), se inyectara el agua oxigenada a través del tapón de goma. Ahora se describirá el proceso a realizar para efectuar la reacción química, pormedio de la cual se obtendrá el volumen de oxígeno que desplazara el mismovolumen de agua, para que pueda ser medido. 4
  • 5. 1. Primero se necesita un hígado de pollo macerado. Con ayuda de una báscula se pesaran 10 gramos de hígado de pollo macerado. 2. Ahora se depositaran los 10 gramos de hígado de pollo macerado en el recipiente 2, (aquel que en su tapa tiene el tapón de goma) y para hacer que los resultados no se vean afectados, se inyectara con una jeringa 10 ml de agua oxigenada, en proporción a los 10 gramos de hígado de pollo. 3. Una vez iniciada la reacción, se comenzara a elevar un volumen de agua en el otro contenedor, subirá por la manguera graduada, este volumen de agua será proporcional al volumen de oxigeno que se desprende de la reacción que se efectuó en el recipiente 2. Una vez que se note la elevación de agua a través de la manguera graduada, es decir, el cambio de volumen, se comenzara a registrar cada dos segundos el volumen que se desplazó de agua a causa del volumen de oxígeno. 4. Anota en una Tabla la cantidad de mililitros que se registraron a los 2,4, ó 6 segundos que se inició la reacción. 5. Repite los cuatro pasos anteriores unas 3 veces más, para hacer la prueba de que tus resultados son precisos. Manguera que transporta el O2 liberadoManguera Frasco con 2 orificios, con Frasco donde se agua coloca el hígado con H2O2 5
  • 6. ResultadosDurante el desarrollo de la práctica se llevaron a cabo 4 muestras para así analizarlos resultados y obtener un promedio de las 4 pruebas.A continuación se presentan los resultados de nuestra primera prueba (VéaseTabla 1 y Figura 1). Tabla 1.-Resultados de la primera prueba. X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 4 5 6 7 8 9 Nota: En esta Tabla se muestra la relación entre los valores independientes (tiempo) y dependientes (mL). O2 (mL) Y [O2] (ml) 10 y=x+1 R² = 1 9 9 Pendiente= X 8 7 7 6 5 5 Y [O2] (ml) 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 3 2 1 0 0 2 4 6 8 10 Tiempo (s) Figura 1.- Gráfica de la prueba 1Como se muestra en la Figura 1, la ecuación de la recta es la siguiente: 6
  • 7. y= x+1Y el valor del coeficiente de determinación es: R2= 1 Como R2= 1 podemos concluir que nuestros resultados no tienen ningún error,puesto que son precisos. Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta primeraprueba es: Velocidad de reacción= 1 mL/sPosteriormente se presentaran de igual forma los resultados obtenidos, pero ahoraen nuestra segunda prueba (véase Tabla 2 y Figura 2) Tabla 2.- Prueba 2 resultados X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 4 5 6 8 8 10 Nota: Se presentan los datos de la prueba 2 de igual forma viendo relación entre tiempo y concentración. 7
  • 8. O2 (mL) Y [O2] (ml) 12 y = 1.2x + 0.5 R² = 0.993 10 10 8 8 6 Y [O2] (ml) 5 Linear (Y [O2] (ml)) 4 3 2 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura 2.- Gráfica de los datos en prueba 2Como podemos ver en la Figura 2 la línea no pasa por el centro de todos losdatos, en este caso nuestra precisión no fue tan exacta, pero al realizar nuestraregresión nos pudimos dar cuenta de esto, también se observa en la ecuación dela recta, puesto que si la comparamos con la ecuación de la Figura 1 podemosdarnos cuenta que es muy distinta.Para obtener la ecuación debemos observar lo datos de en la Figura 2 con estollegando a: y= 1.2x+0.5Y analizamos que: R2= 0.9931,(véase Figura 2) de igual modo el valor es cercanoa 1 por lo tanto no existió una gran diferencia entre la prueba 1.Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en la segunda pruebaes: Velocidad de reacción= 1.2 mL/sA continuación se presentan los resultados de la prueba 3. Tabla 3.- Presentación de datos en la prueba 3 X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 8
  • 9. 2 3 4 5 6 7 8 9 Nota: Datos de la prueba 3 analizando los segundos y los mL de concentración. O2 (mL) Y [O2] (ml) y=x+1 10 R² = 1 9 8 7 6 5 Y [O2] (ml) 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 2 1 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura 3.- Representación grafica de la prueba 3Mediante el análisis correspondiente vemos que los datos de esta prueba engeneral son iguales a los de la prueba uno, por lo consiguiente el razonamiento esel mismo que en el primer caso. Ecuación: y= x+1Y determinamos que R2= 1 Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta terceraprueba es: Velocidad de reacción= 1 mL/s Con esto visualizando que es igual a la velocidad de la prueba 1.Para finalizar se presentan los datos de la ultima prueba. Tabla4.- Datos de la última prueba X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 9
  • 10. 4 5 6 7 8 10 Nota: Datos correspondientes para la creación de la grafica Concentración (mL) vs Tiempo (s) O2 (mL) Y [O2] (ml) y = 1.15x + 0.5 12 R² = 0.988 10 10 8 7 6 Y [O2] (ml) 5 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 2 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura4.- Representación grafica de la 4ª prueba. Al finalizar esta prueba observamos que de igual forma los datos observados enla Figura 4 no son muy precisos, puesto que la recta de regresión no pasa por elcentro, vemos que R2= 0.988, concluyendo que no fue una gran variación puestoque el valor se acerca a 1. Con el análisis de los datos (véase Figura 4) llegamos a la siguiente ecuación: y= 1.15x+0.5 Siendo esta la ecuación de nuestra recta. Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta últimaprueba es: Velocidad de reacción= 1.15 mL/s Tabla5.-Promedio de los datos de la concentración en las 4 pruebas Prueba 1 Prueba 2 Prueba 3 Prueba 4 Promedio 10
  • 11. Tiempo 2 seg. 3 3 3 3 3Tiempo 4 seg. 5 5 5 5 5Tiempo 6 seg. 7 8 7 7 7.25Tiempo 8 seg. 9 10 9 10 9.5 Nota: Se muestra el promedio de los datos obtenidos durante nuestro experimento.A continuación se muestra la grafica promedio del experimento: O2 (mL) Y [O2] (ml) y = 1.087x + 0.75 10 R² = 0.999 9.5 9 8 7 7.25 6 5 5 Y [O2] (ml) 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 3 2 1 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura5.- Representación grafica del promedio de los datos Con esto se puede concluir que el promedio de la velocidad de reacción es de: Velocidad de reacción promedio = 1.0875 mL/s Obtenida de la ecuación presentada en la Figura5. Y Obteniendo una dispersiónde los datos (R2) cercana a 1, es decir, 0.9992 por lo tanto nuestros datos sonprecisos en cuanto a nuestro experimento. Y observando que la línea de regresiónpasa por el centro en la mayoría de los puntos. Cálculo del valor teórico y comparación con el valor observado:En la prueba 1 se obtuvo la siguiente ecuación: y= x+1Donde: 11
  • 12. 1 es la pendiente de nuestra rectax es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,1 es nuestro punto de intersección en la ordenadaSustituyendo valores obtenemos: Tabla 6.-Calculo de valor teórico X Y valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y=x+1 2 3 3 4 5 5 6 7 7 8 9 9 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. Con el análisis de los resultados (véase Tabla 6) nos damos cuenta quenuestros valores observados son exactos en relación con nuestros valoresteóricos. En la prueba 2 se obtuvo la siguiente ecuación: y= 1.2x+0.5Donde:1.2 es la pendiente de nuestra rectax es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,0.5 es nuestro punto de intersección en la ordenadaSustituyendo los valores obtenemos: Tabla 7.-Prueba 2 (valor teórico) X Y Valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y=1.2x+0.5 2 3 2.9 4 5 5.3 6 8 7.7 8 10 10.1 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. 12
  • 13. Mediante el análisis de la Tabla7, nos dimos cuenta que existe una pequeñadiferencia entre los datos observados y los valores teóricos, pero sin caer en unaexageración puesto que solo son decimas las que varían.En la prueba 3 se obtuvo la siguiente ecuación: y= x+1Donde:1 es la pendiente de nuestra rectax es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,1 es nuestro punto de intersección en la ordenadaSustituyendo valores obtenemos: Tabla 8.-Prueba 3 calculo de valor teórico X Y valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y=x+1 2 3 3 4 5 5 6 7 7 8 9 9 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. Con el análisis de la ecuación y el valor teórico (véase Tabla 8) nos damoscuenta que nuestros valores observados son exactos en relación con nuestrosvalores teóricos. Como lo analizamos en la prueba 1.En la prueba 4 se obtuvo la siguiente ecuación: y= 1.15x+0.5Donde:1.15 es la pendiente de nuestra rectax es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,0.5 es nuestro punto de intersección en la ordenada.Sustituyendo valores obtenemos: Tabla 9.-Calculo de valor teórico ultima prueba 13
  • 14. X Y Valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y= 1.15x+0.5 2 3 2.8 4 5 5.1 6 7 7.4 8 10 9.7 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. Mediante los datos presentados en la Tabla 9, nos dimos cuenta que existe unapequeña diferencia entre los datos observados y los valores teóricos, pero sin caeren una exageración puesto que solo son decimas las que varían. Con la presentación de los datos y las graficas se finalizan los resultados.DiscusionesEn el caso de lo mencionado por Melo y Cuamatzi (2004, p. 105) estamos deacuerdo ya que pudimos comprobar que el peróxido de hidrógeno efectivamentees descompuesto por la catalasa liberando oxígeno ya que al hacer nuestroexperimento con nuestro catalímetro pudimos observar la reacción por medio deburbujas (demostrándonos el oxígeno liberado).De acuerdo con Devlin (1999, p.140) él nos dice que la enzima catalasatransforma rápidamente el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Estamos deacuerdo en lo que él nos menciona ya que al momento de macerar el hígado eintroducirlo a nuestro catalímetro y al suministrarle el agua oxígenada (H2O2)pudimos observar en cuestión de segundos que esto es efectivamente verídico yaque, como habíamos mencionado anteriormente, se observan burbujasindicándonos la presencia de agua y la liberación de oxígeno.Lo que mencionaremos posteriormente habla de lo que hicimos previamente anuestra práctica (hecha en casa), todo esto con el fin de explicar ladesnaturalización de las proteínas. De acuerdo a Melo y Cuamatzi (2004, p.98)nos hablan de la desnaturalización de las proteínas que no es otra cosa quequitarle las propiedades a las enzimas, en este caso siendo proteínas del hígado,esta desnaturalización se lleva a cabo por cambios ambientales, en este caso, almomento de la cocción del hígado dando lugar a la descomposición de lasenzimas. Esto lo pudimos comprobar al momento de poner el pedazo de hígadoen el recipiente con agua oxigenada ya que no observamos ningún cambio en éste 14
  • 15. porque no había presencia de enzimas. Por lo tanto estamos de acuerdo con ellospor lo ya mencionado. Todo lo anterior lo podemos explicar más amenamente de esta manera, connuestras palabras: 1. De descomposición: 2H2O2 2H2O + O2 Esto es porque el peróxido de hidrógeno da lugar a la formación de agua y la liberación de oxígeno en estado gaseoso. La liberación del Oxígeno, es notable a la vista cuando se comienza a producir un burbujeo al contacto del agua oxigenada con el hígado de pollo. 2. Irreversible: 2H2O2 2H2O + O2 La reacción es irreversible porque los productos que se obtienen, al pertenecer a las reacciones del metabolismo, son utilizadas prácticamente al instante, como productos de nuevas reacciones. En nuestro dispositivo, el oxígeno liberado, se desplazaba por completo hacia el otro recipiente, evitando así que volviera a formarse peróxido de hidrógeno una vez más. De acuerdo a Mamposo (1998) él nos dice que Km son unidades deconcentración que representan la cantidad de sustrato de una célula viva,tomando al peróxido de hidrógeno como el sustrato y la enzima catalasa que seencuentra en el hígado. La enzima catalasa entonces produce una velocidadmáxima con el peróxido de hidrógeno haciendo que la reacción se acelere.Estamos de acuerdo con él ya que las condiciones del hígado fueron favorablespor la reacción que se hizo en cuestión de segundos, comprobando que fue unareacción rápida y viendo de esta forma que Km fue alta. Según Devlin (1999. P. 160) la cinética enzimática estudia la velocidad de lasreacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios proporcionan informacióndirecta acerca del mecanismo de la reacción catalítica y de la especificidad delenzima; estamos de acuerdo con esta idea ya que la enzima catalasa tiene unaespecificidad que actúa sólo en la descomposición del peróxido de hidrógeno enagua y oxígeno, es decir, la enzima solamente tiene esa función. La velocidad deuna reacción catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, yaque en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima; esto lo pudimosverificar ya que el hígado a pesar de tener microorganismos u otras sustanciasmás la enzima catalasa actuó para la descomposición de peróxido de hidrógeno.La velocidad puede determinarse bien midiendo la aparición de los productos o ladesaparición de los reactivos; los observamos al momento de introducir el aguaoxigenada en el hígado de pollo ya que aparecieron los productos (el agua y eloxígeno) y gracias al oxígeno liberado pudimos ver el desplazamiento del agua 15
  • 16. con nuestro dispositivo como ayuda para medir la velocidad de la reacción de lacatalasa presente en el hígado. De acuerdo a Bohinsk (1991. P.181) el valor exponencial de 1 significa que lavelocidad de la reacción incrementa en forma lineal con la concentración delreactivo; esto es verídico ya que en la primera Tabla de resultados podemoscomprobar que el valor de R es exactitud de los resultados (esto viene explicadodetalladamente en la parte de los “resultados”) por lo tanto el incremento es enforma lineal con la concentración del reactivo. Esto lo pusimos a prueba con laconcentración de reactivo (peróxido de hidrógeno) con una proporcionalidad de10ml de peróxido de hidrógeno a 10gr de hígado de pollo, pudiendo tener comoresultado valores exactos y precisos como se pudo verificar en la Tabla 1,teniendo un resultado de una línea recta. Al finalizar nuestro trabajo y obteniendo los resultados ya mostrados, nos dimoscuenta que el funcionamiento del dispositivo fue el correcto, puesto que los datostienen un rango de diferencia muy pequeño. Los datos en las 4 pruebas se mantienen de cierto modo constantes, ya queinician en los primeros segundos con la misma liberación de oxigeno, poco a pocomientras el tiempo avanza, en algunas de las pruebas hay una diferencia, pero notan grande para encontrar un problema en el dispositivo. Los resultados obtenidos creemos que fueron los correctos en cuanto al uso yobjetivos del equipo, ya que quizá al hacer una comparación con otros equiposexista una diferencia entre los resultados, pero esto implicara analizar diferentescosas, como puede ser, la cantidad usada de los reactivos, el funcionamiento desu dispositivo, el tiempo medido, entre otras cosas. El uso y funcionamiento del dispositivo fue el correcto, así como los resultadosobtenidos, el equipo se siente satisfecho con los datos generados al finalizar lapractica, y por lo tanto se concluye que los datos son correctos en cuanto a losfactores utilizados.ConclusionesEn la unidad número 2: “Metabolismo” del curso de Biología V, el principal objetivoes analizar todas aquellas reacciones químicas que el cuerpo necesita realizarpara poder funcionar correctamente y evitar el aumento en su grado de entropía.El Metabolismo puede dividirse en anabolismo y catabolismo, y la reacción que sellevó a cabo en esta práctica, es un claro ejemplo del catabolismo ya que se 16
  • 17. descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Esta reacción esexergónica pues libera más energía de la que se absorbe. En el experimentopuede comprobarse porque, en el frasco donde se pone el hígado y el aguaoxigenada puede percibirse un aumento de temperatura.Finalmente, gracias a este experimento, podemos comprobar que, de acuerdo a loque hemos tratado en clase sobre las enzimas, según lo que nos dice Bohinski,C., 1991, son éstas las que se encargan de acelerar vertiginosamente la velocidadde una reacción y además tienen la característica de poseer una estrictaespecificidad, pues la catalasa reacciona exclusivamente con el peróxido dehidrógeno.Bibliografías:Bohinsk, C. (1991) a. Bioquímica. México: Addison Wesley. pp. 174-181.Bohinsk, C (1991) b. “Capitulo 5: Enzimas” en Bioquímica (5ta, ed) México: Addison Wesley LongmanDevlin, T. (1999). Bioquímica. España: Reverté. pp. 140-160.Mamposo, M. (1998). Centro de Investigaciones y Evaluaciones Biológicas (CIEB) en sitios Web. bvs.sld.cu. Recuperado el 18 de Noviembre de 2011, de http://bvs.sld.cu/revistas/end/vol10_1_99/end02199.htmMelo, V., Cuamatzi, O. (2004), Bioquímica de los procesos Metabólicos. México: Reverté. pp. 98-105. 17