Guía de practicas para Bioquímica Molecular

12,351 views
12,101 views

Published on

descargar en farmabook.uni.me

Guía de practicas para Bioquímica Molecular

  1. 1. ESCUELA PROFESIONAL DEENFERMERIA, TECNOLOGIAMÉDICAY FARMACIA Y BIOQUIMICAGuía de Prácticas de BiologíaDocente:Blgo. GEORGE VASQUEZ BEZADAArequipa – 2013
  2. 2. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 2 -MANUAL DE PRACTICAS DE BIOLOGIACELULAR Y MOLECULARCONCEPTOS Y APLICACIONESAPELLIDOS Y NOMBRES: _______________________________________MATERIA : Biología Celular y Molecular.AÑO : 1eraño SEMESTRE: ISECCION : ________________ TURNO: ________________DIA DE TEORIA: ________________ HORARIO: _______________DIA DE PRACTICAS: _______________ HORARIO: _______________ESCUELA PROFESIONAL : ______________________________________UNIVERSIDAD : Universidad Privada Autónoma del Sur - ArequipaDIRECCION (alumno): __________________________________________TELEFONO (alumno) : __________________________________________E-MAIL (alumno) : __________________________________________FECHAS DE EXAMENES:I° EXAMEN: del 13 al 17 de mayo.II° EXAMEN: del 1 al 5 de junio.III° EXAMEN FINAL: del 19 al 23 de agosto.
  3. 3. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 3 -PRESENTACIÓNEl conocimiento de la Biología constituye una de las bases para una adecuada formaciónen todas las asignaturas relacionadas con las ciencias de la vida, las cuales a su vez sonla base para la preparación académica para los futuros profesionales estomatólogos.La Guía de Prácticas de Laboratorio de Biología y Genética, permitirá a los estudiantes dela Escuela Profesional de Estomatología, orientarlos en la comprobación de losconocimientos teóricos, así como adquirir habilidades, destrezas y actitudes, quefavorezcan su aprendizaje como complemento en el desarrollo de su labor de estudiante.El objetivo de la presente guía, además de complementar la formación teórica, es dar alestudiante todos los elementos para el aprendizaje práctico y que cada estudiante lleguea ser el protagonista de su aprendizaje, haciéndolo responsable de sus resultadosacadémicos, y que tome conciencia de la importancia de su esfuerzo y de susparticipación en el desarrollo de cada una y de todas las partes del trabajo académico. Delinterés, participación y trabajo constante del estudiante, depende que el desarrollo de lasprácticas sea el adecuado.George Richard Vasquez BezadaBiólogo. Mg. Cs.
  4. 4. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 4 -INDICEINTRODUCCIÓNPráctica 1. TRABAJO EN EL LABORATORIO ________________________________ 5Practica 2. EL MATERIAL DE LABORATORIO _______________________________ 13Practica 3. pH ___________________________________________________________ 21METODO CIENTIFICO __________________________________________ 25Práctica 4. IDENTIFICACION DE COMPUESTOS INORGANICOS: ______________ 29Práctica 5. IDENTIFICACION DE COMPUESTOS ORGANICOS:GLUCIDOS ____________________________________________________ 36Práctica 6. IDENTIFICACION DECOMPUESTOS ORGANICOS:LIPIDOS Y PROTEINAS _________________________________________ 43Práctica 7. ENZIMAS Y REACCIONES QUIMICAS ___________________________ 54ACIDOS NUCLEICOS ___________________________________________ 63Práctica 8. EL MICROSCOPIO: PARTES, MANEJO Y CUIDADO ________________ 64Práctica 9. CÉLULA EUCARIONTE: ANIMAL Y VEGETAL ____________________ 76Práctica 10. CÉLULA EUCARIONTE: NUCLEO Y ORGANELOS _________________ 88Práctica 11. TRANSPORTE A TRAVES DE LA MEMBRANA ____________________ 97Práctica 12. RESPIRACION CELULAR _______________________________________ 106FERMENTACION ______________________________________________ 111BIBLIOGRAFIA ____________________________________________________________ 116
  5. 5. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 5 -TRABAJO EN EL LABORATORIOINTRODUCCION.La experimentación, una etapa del método científico, se puede realizar en diferentes lugares (campo olaboratorio, etc.). Su éxito (y la validez de sus resultados) depende de los procedimientos efectuados y delmaterial usado durante la experimentación.Las personas que trabajan en el laboratorio poseen experiencia en el manejo adecuado de losprocedimientos, los aparatos y equipos, así como los materiales biológicos y reactivos, y todo ello hace quelos resultados obtenidos durante su demostración sean correctos.Por lo anterior el personal que trabaja en el laboratorio antes conoce las características y uso de losdistintos materiales que utiliza; la persona descuidada o sin experiencia puede dañar el material y losequipos, así como a las personas o desperdicia los reactivos.El ingreso al laboratorio. La manera como se ingresa al laboratorio es el inicio del trabajo en el mismo. Laspuertas se dejan como se encuentran. Al ingresar piense en el trabajo que va a realizar y no en los olores ola temperatura desagradable. El ingreso es sin producir ruido para evitar distraer a los alumnos y personasque trabajan en el laboratorio, de no ser así resultaría una grosería y desconsideración con los demás.DEFINICION DE BIOSEGURIDAD: La bioseguridad es la aplicación de conocimientos, técnicas yequipamientos para prevenir a personas, laboratorios, áreas hospitalarias y medio ambiente de laexposición a agentes potencialmente infecciosos o considerados de riesgo biológicoPRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD EN LOS LABORATORIOS DE CIENCIAS DE LA SALUD.1. Universalidad: Las medidas deben involucrar a todos los pacientes, trabajadores y profesionales detodos los servicios y estudiantes. Todo el personal debe seguir las precauciones estándaresrutinariamente para prevenir la exposición de la piel y de las membranas mucosas, en todas lassituaciones que puedan dar origen a accidentes, estando o no previsto el contacto con sangre o cualquierotro fluido corporal. Estas precauciones, deben ser aplicadas para todas las personas,independientemente de presentar o no patologías.2. Uso de barreras: Comprende el concepto de evitar la exposición directa a sangre y otros fluidosorgánicos potencialmente contaminantes, mediante la utilización de materiales adecuados que seinterpongan al contacto de los mismos. La utilización de barreras no evitan los accidentes de exposición aestos fluidos, pero disminuyen las consecuencias de dicho accidente.3. Medios de eliminación de material contaminado: Comprende el conjunto de dispositivos yprocedimientos adecuados a través de los cuales los materiales utilizados en la práctica, son depositadosy eliminados sin riesgo.Para bioseguridad hay que tener en cuenta:1. El vestido: La protección, seguridad personal y la limpieza son parte del trabajo en el laboratorio. Para laprotección personal tenemos el mandil de preferencia blanco, amplio, de tela gruesa, de manga larga yde puños ceñidos.2. Seguridad personal: Elimine los fragmentos de vidrio y sustancias del suelo, así como no camine sobrelos pisos húmedos, su presencia puede causar un accidente. Las joyas (aretes, pulseras, collares) y otrosadornos metálicos son retirados de las personas antes de iniciar el trabajo. El cabello suelto es un peligrode incendio. Mantenga las uñas recortadas. Elimine todo cuerpo o adorno inútil o que moleste durante eltrabajo.3. Primeros auxilios: Son de mucha importancia para la conservación de la salud. Es uno de los aspectosque más se descuida. Se contará con un botiquín con los medicamentos y otros materialesindispensables, el personal del laboratorio estará capacitado para usarlo. La atención primaria de unaccidente protege una vida que es complementada con la atención del médico.4. El fuego: Es indispensable saber combatir un incendio, por más pequeño que parezca. Se contaráprincipalmente con un extintor de incendios. A todos los incendios no se les combate con agua. El fuegoinicial se cubrirá con una manta o un trapo. Nunca soplar las llamas; el viento aumentará el fuego. Tam-
  6. 6. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 6 -bién el personal de laboratorio en los casos de incendio se hallará listo para combatirlo mediante unextinguidor u otro medio, y además como evitarlo.Guardapolvo Botiquín ExtintorMEDICIÓN DE SUSTANCIAS: Cualquiera de los cuerpos (sólidos o líquidos) en el laboratorio seusan en cantidades exactas, serán medidos con los instrumentos apropiados. Para medir los líquidos seutiliza una pipeta, bureta, fiola, beaker, del tamaño apropiado; además, se tendrá en cuenta el “menisco”(cóncavo o convexo) formado en la superficie del líquido.LA POSICIÓN DEL CUERPO Y LA SALUD: El cuerpo se mantiene erguido sin forzar su posición,la luz y la ventilación serán adecuadas.LOS RESIDUOS: Los restos sólidos solubles o no solubles en agua, los papeles y los precipitadosinsolubles, se colocan en un recipiente destinado para ellos. Los sulfuros y otros residuos químicos nodeben de echarse en el resumidero. Los líquidos, excepto el mercurio, pueden eliminarse en el resumidero yluego se agrega abundante agua.LOS CUERPOS SÓLIDOS SE MIDEN CON UNA BALANZA: Esta y el lugar donde seencuentren permanecerán limpias antes y después de la medición. Los cuerpos que se pesan están a latemperatura ambiente. Antes de comenzar la pesada, el fiel de la balanza estará en el punto cero(calibrado). Para pesadas mayores a 10 gr. se utilizan pesas. Estas se colocan en el platillo derecho y secogen con pinzas.Finalmente, el procedimiento completo para pesar un objetosería el siguiente:1. Determinar la sensibilidad de la balanza y su reposo.2. Determinar el punto cero de la balanza (calibrado).3. Colocar la pesa respectiva en el platillo o en el lugar correcto.4. Agregue al platillo la sustancia a pesar.LIMPIEZA DEL MATERIAL: El material limpio es muyimportante en los trabajos en el laboratorio. El lavado del material se puede resumir en los siguientes:
  7. 7. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 7 -1. Debe de ser lo más simple y fácil posible. A veces solo se emplea agua.2. Es suficiente lavar dos o tres veces con agua.3. Cuando es necesario se emplea el cepillo y detergente o jabón.4. El lavado es por fuera y por dentro del material, usando agua corriente y enjuaga con agua destilada.5. Finalmente, se deja escurrir el material lavado en un tablero, sobre una tela limpia, o sobre un dispositivoespecial; no es aconsejable el secado con una toalla u otra tela.6. Existen soluciones especiales para una limpieza especial del material de vidrio.ORDEN Y USO DE LOS REACTIVOS:1. Los reactivos se ordenan o agrupan de diferente manera, ytodos tienen un lugar en el laboratorio ya que se encuentranclasificados por el grado de toxicidad, corrosividad,inflamabilidad y de reactividad.2. Cada frasco, llevará una etiqueta con el nombre del reactivo.Limpie el frasco, para eliminar el polvo, antes de usarlo.3. Igualmente, antes de usar un reactivo, leer el nombre delreactivo en la etiqueta del frasco que lo contiene y compararlocon el nombre en las instrucciones, para estar seguro de quees el reactivo que necesita.4. No tocar los reactivos con la mano.5. Evite derramar sustancias. Habrá una tela para la limpieza.6. No oler vapores que provienen de recipientes que contienen sustancias volátiles. Cuando se requierahacerlo, traer vapores con las manos para percibir el olor.7. Cuando se emplean o se producen gases tóxicos o corrosivos en u proceso, este debe llevarse a cabobajo una campana de gases.8. Nunca extraer soluciones con una pipeta haciendo succión con la boca, emplear perillas de succión ocualquier instrumento apropiado.
  8. 8. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 8 -9. No calentar líquidos en tubos de ensayo con la boca de los mimos orientada hacia alguna persona.Pueden ocurrir accidentes.10. No vaciar directamente agua a una solución acido o básica concentrada. Cuando fuere necesario hacerdiluciones, llevar a cabo la operación vaciando lentamente al agua la solución concentrada a través de lasparedes interiores del recipiente que lo contiene y con buena agitación.ORDEN Y USO DE LOS APARATOS:Es recomendable que cada aparato este rotulado. Antes de usar un aparato es necesario conocer lascaracterísticas que tiene y que se indican en el manual de instrucciones; entre esas características esimprescindible conocer el voltaje para su funcionamiento, o en caso contrario malogra el aparato.Proporcionar a cada aparato el uso adecuado.MANIPULACION DE MATERIAL BIOLOGICO:1. En muchas ocasiones desconocemos si el material que estamos utilizando es contaminante o no.Manéjalo siempre como si lo fuera. Usa siempre guantes.2. Si puedes correr un potencial riesgo biológico, antes de exponerte debes vacunarte contra el tétanos yhepatitis B. Se debe valorar el tipo de vacunaciones en situaciones de riesgo especifico (trabajar convirus de la rabia, hepatitis A, Salmonella typhi, poliovirus, fiebre amarilla, varicela, meningococo, BCG-tuberculosis). Consulta con tu profesor.3. Procura evitar lesiones accidentales cutáneas, protege adecuadamente cualquier herida o lesión quesufras por pequeña que sea.4. Deshecha cualquier instrumental que no estés seguro que es aséptico. Limpia inmediatamente cualquiervestido de material biológico (sangre, heces, etc.) preferentemente con solución desinfectante como elhipoclorito de sodio (lejía) al 10%.5. El material de punción, como agujas, jeringas u otros, NO deben volver a encapucharse en su fundaoriginal. Los restos de muestras y el material punzante o cortante desechable se depositaran en uncontenedor adecuado y homologado.6. La extracción de sangre ha de llevarse a cabo con guantes. Lávate las manos tras retirar la ropa detrabajo y/o objetos desechables (bata, delantal, gorro, mascarilla, guantes, etc.). Hazlo inmediatamentecon jabón antiséptico si has estado en contacto con líquidos corporales.7. Todo tipo de receptáculo biológico debe estar debidamente señalizado.En las etiquetas de algunos reactivos pueden encontrarse 1 o 2 de los pictogramas mostrados acontinuación. Estos símbolos muestran gráficamente el nivel de peligrosidad de la sustancia etiquetada:a. Corrosivos: Las sustancias y preparados que en contacto con tejidos vivos pueden ejercer unaacción destructiva de los mismos.b. Irritantes: Las sustancias y preparados no corrosivos que por contacto breve prolongado o repetidocon la piel o las mucosas pueden provocar una reacción inflamatoria.
  9. 9. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 9 -c. Tóxicos o nocivos: La sustancia y preparados que por inhalación, ingestión o penetración cutáneaen pequeñas cantidades puedan provocar efectos agudos o crónicos o incluso la muerte.d. Inflamable: Las sustancias y preparados líquidos cuyo punto de ignición sea bajo.e. Comburentes: Las sustancias y preparados que en contacto con otras sustancias en especial consustancias inflamables, produzcan una reacción fuertemente exotérmica.f. Explosivos: Las sustancias y preparados sólidos, líquidos, pastosos o gelatinosos que, incluso enausencia de oxigeno del aire, puedan reaccionar de forma exotérmica con rápida formación de gasesy que en condiciones de ensayo determinadas, detonan, deflagran rápidamente o bajo el efecto delcalor, en caso de confinamiento parcial, explotan.g. Peligrosos para el medio ambiente: Las sustancias o preparados que en caso de contacto con elmedio ambiente, presenten o puedan presentar un peligro inmediato o futuro para uno o mascomponentes del medio ambiente.LOS EQUIPOS DE USO COMÚN EN EL LABORATORIO: Se menciona en una unidad aparte.Pero es necesario agregar que en la mayoría de operaciones o instrucciones de trabajo indican el tamaño ytipo de equipos necesarios. A cada material o equipo se le proporciona el uso correcto; para el cambio deuso, se necesita estar seguro de que no cause problema durante el trabajo. El material de laboratorio sepuede agrupar en material de vidrio, reactivos químicos, soluciones, equipos y otros (aparatos). Con ellos seobtiene reacciones químicas, se preparan soluciones, se hacen filtraciones y análisis, mediciones uobservaciones.Autoclave MicroscopioEL DESARROLLO DEL TRABAJO DURANTE LAS PRÁCTICAS EN EL LABORATORIO.El estudiante debe adoptar una conducta que favorece su aprendizaje. Se sugieren la siguiente conducta.1. El alumno no podrá ingresar al laboratorio mientras el Docente no esté presente.2. El ingreso al laboratorio deberá ser en forma ordenada.3. Está prohibido ingresar al laboratorio:a. SIN mandil.b. CON zapatillas, sandalias, zapatos de taco alto, gorro, shorts, minifalda u otra prenda escotada quedeje la piel descubierta.4. Está prohibido en el laboratorio:a. Consumir alimentos, beber líquidos, fumar.b. Tener celulares, MP3, MP4, audífonos u otros materiales no correspondientes a la práctica.c. Vagabundear o distraer a sus compañeros. Nunca corra, bromee dentro del laboratorio. Uncomportamiento irresponsable puede ser motivo de accidentes no deseados.5. Se ingresará al laboratorio con la información previa de las actividades que se van a realizar indicadas enla Guía o Manual de Prácticas y una información adicional.
  10. 10. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 10 -6. La lectura cuidadosa de las instrucciones del documento o de la guía respectiva, durante la práctica paraevitar errores. Se consulta cuando no esté seguro del procedimiento leído.7. Antes de iniciar el trabajo el Profesor que dirige las prácticas dará las indicaciones y la introducciónreferidas al tema de trabajo.8. En la guía anotar cuidadosamente las observaciones y otra información solicitada. Sea breve y claro ensus anotaciones.9. Una situación anormal que se presenta durante el trabajo, por ejemplo el derrame de una sustancia,accidentes, etc., de inmediato se informará al profesor.10. Nunca trabajar solo siempre estar acompañado al menos por otra persona.11. Es importante esquematizar un procedimiento, el proceso y la morfología de lo que observa.12. Nunca lleve a cabo experiencias no autorizadas.13. La información obtenida en cantidades expresarla preferentemente en valores numéricos, en tablas,gráficas, según los casos.14. No utilizar las hojas sueltas de papel para tomar la información, pueden extraviarse.15. Al presentar el informe del trabajo realizado, añadir hojas adicionales si desea consignar mayor detalle einformación.16. Todos los informes de laboratorio se presentarán en la fecha posterior inmediata a la realización de lasesión de aprendizaje.ANIMALES Y PLANTAS EN EL LABORATORIO: La presencia de animales y plantas en ellaboratorio indica que servirán para el trabajo. Por lo tanto, permanecerán en buenas condiciones. Elestudiante se acostumbrará a cuidarlas. Los animales son alimentados adecuadamente y beben agualimpia; su vivienda se limpia diariamente y se realizan otras acciones según las circunstancias para cuidarlos animales. Las plantas se riegan para mantener húmeda la tierra y proporciona otros cuidados según eltipo de plantas.OBJETIVOS.1. Comentar el comportamiento de las personas que trabajan en el laboratorio.2. Comentar sobre la seguridad en el laboratorio.3. Comentar sobre la conservación del orden y la limpieza en el laboratorio.4. Comentar sobre el cuidado de los animales y las plantas que existen en un laboratorio.MATERIALES. El contenido de la práctica respectiva.PROCEDIMIENTO.1. Formar grupos de alumnos y comentar sobre el trabajo, seguridad, cuidado de cada una de las normas,recomendaciones y precauciones de esta práctica.2. Cada equipo de trabajo nombrara a un encargado de exponer las conclusiones generales de estapráctica.
  11. 11. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 11 -INTERROGANTES1. ¿Qué es bioseguridad?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________2. Mencione los niveles de Bioseguridad en los laboratorios.________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________3. ¿Qué es un indicador (en reacciones químicas)?. Mencione 3 ejemplos.____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________4. ¿Qué son los reactivos?. Mencione 5 ejemplos.________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________5. ¿Cuáles son las recomendaciones en caso de incendio en el laboratorio?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________6. ¿Por qué es importante la limpieza del material de laboratorio?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________7. ¿Qué medidas de protección guardamos en el trabajo de laboratorio?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________8. ¿Qué es una “barrera de protección”?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  12. 12. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 12 -9. ¿Qué tipos de contaminantes conoces?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________10. ¿Cómo debe lavarse adecuadamente las manos con agua y jabón? DibujeREVISIÓN BIBLIOGRAFICA:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  13. 13. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 13 -MATERIAL DE LABORATORIOINTRODUCCION.En el laboratorio de trabajo biológico se realizan varias actividades, por ejemplo de atención al público,docencia, investigación. Estas dos últimas actividades contribuyen a la comprensión de los conocimientosteóricos biológicos, al desarrollo de habilidades, destrezas y capacidades de los estudiantes, y a laaplicación de los conocimientos teóricos.En esta práctica se conocerán algunos materiales, sus características y uso en el laboratorio de biología.Los materiales de laboratorio se pueden agrupar y ordenar de diferentes maneras y tiene diversos usos.Poseen una diferente composición química (inorgánica u orgánica) y uso (fisiología, análisis, etc). Susvariedades son:1. MATERIALES QUÍMICOS: Son de diferente composición química (inorgánica u orgánica) y su uso en ellaboratorio de biología. Tenemos los siguientes:a. Los productos químicos.b. Los reactivos y las soluciones (disoluciones). Los reactivos mayormente son líquidos puros o se hallanen soluciones para el análisis químico. Tenemos las sales, ácidos y bases, puras y en soluciones dediferente concentración (generalmente acuosas), a veces en soluciones estándar (patrón); y seguardan en frascos cerrados y con etiqueta.c. Los indicadores y colorantes. Los indicadores como la fenoltaleína o el papel indicador de pH, cambiande color al variar el pH del medio. Los colorantes proporciona su color o uno diferente al cuerpo sobreel que actúan, y de mucho uso en microscopía.2. LOS MATERIALES DIVERSOS: Aquí podemos incluir los aparatos y equipos. Son de diversosmateriales, son de metal (hierro, cobre o sus derivados), aprovechando su resistencia y dureza aldesgaste. Tenemos por ejemplos a los aparatos y equipos: micrótomo, microscopio, balanza, destiladorde agua, etc. Otros materiales se fabrican de vidrio, caucho, plástico, porcelana, madera.a. Los materiales de caucho (goma) tienen uso limitado. El plástico por ser flexible y resistente a lacorrosión, se usa para fabricar diversos utensilios (envases, tapones, frascos, etc.) y reemplazan alvidrio, caucho, los metales y a la madera.b. La porcelana es muy resistente al desgaste y al calor, pero es frágil. Su uso se limita, por ejemplo parala fabricación de cápsulas y morteros. El corcho es liviano, aislante e insoluble en el agua ymayormente se usa para fabricar tapones de botellas.c. El vidrio aunque frágil es el más usado en la fabricación de los utensilios de laboratorio, como veremosluego. Un tipo conocido de vidrio, muy difundido por su resistencia al calor: el vidrio de tipo Jena,Pyrex, son unos de los más usados. Los materiales de este vidrio llevan una marca especial (nombredel tipo de vidrio).3. MATERIAL DE VIDRIO: Veamos algunos materiales de mayor uso. Tubo de ensayo: Es un cilindro con un extremo cerrado y redondeado (fondo) y el otro extremoabierto y de borde romo. El de vidrio corriente (sin marca y no se calienta), de plástico, o de vidrioresistente al calor (Pirex, etc.). Sirve para calentar líquidos, realizar mezclas de reactivos o sussoluciones, realizar cultivos de microorganismos o hacer reaccionar pequeñas cantidades desustancias. Tubo de centrífuga: Es una variante del tubo de ensayo, de fondo cónico, con una escala, y se usa enlas centrífugas. Probetas: Es un cilindro graduado, aforado y de volumen variable (10, 100, etc. ml.). Se usa paramediciones de líquidos cuyos volúmenes sean mayores a 1 ml. En la medición se considera el menisco(cóncavo o convexo) del líquido.
  14. 14. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 14 - Matraz Erlenmeyer: Es un recipiente cónico, de base ancha y plana, y con un cuello también ancho ygraduado. Se utiliza para medir, calentar o guardar líquidos. Frascos de coloración (coplin): Es un frasco con tapa rosca, ranuras en su cara interna que llevanlos portaobjetos con las muestras para la coloración. Frasco gotero: Es una botella pequeña, con dos canales longitudinales opuestos en la cara interna delcuello que coinciden con los canales de la tapa, y uno de ellos continúa en el reborde de la tapa, y sucierre es hermético. Lleva soluciones colorantes para las tinciones de muestras o reactivos que sevierten gota a gota. Matraz: Es cónico y guarda líquidos, soluciones, medios de cultivo, o sirve para calentar o hervirlíquidos. Beaker (vaso de precipitados): Es uno delos utensilios de mayor uso. Es un vasoque puede estar graduado (ml.)Generalmente es de vidrio especial (resisteel calor y lleva una marca). Sirve parapreparar soluciones, disolver y calentar ohacer hervir sustancias. Placas Petri: Consta de dos cajas o tapasen forma de disco, de diferente diámetro(mm) Se usan para el cultivo demicroorganismos, para guardarespecímenes. Gotero: Es un tubo delgado, de vidrio oplástico y se usa para agregar líquidos enpequeñas cantidades (gotas). Pipetas Pasteur: Es un gotero con unapunta de mayor longitudinal y más delgada.Se usa para agregar líquidos gota a gota. Mechero de alcohol: Es un frasco de vidrio o de metal, con un tapón de corcho con una mecha depabilo y una tapa sirve para apagar el fuego (no se sopla el fuego), proporciona calor y su variante esel mechero a gas. Su combustible el alcohol o ron de quemar. Portaobjetos: Es una lámina delgada y rectangular, de 26 por 76 mm. de diámetro. En ellos secolocan muestras (líquida o sólidas) para observarlas con el microscopio. Cubreobjetos (laminillas): Sonláminas de vidrio muy delgadassobre las que se colocan lasmuestras antes de su observacióncon el microscopio. Varían degrosor y longitud; pueden medir0.3mm x 22 mm x 22mm, porejemplo. Campana de vidrio: Tiene la formade una campana de diferentestamaños, con una agarraderasuperior. Se le usa por ejemplo paraen anestesiado de animalespequeños, evaporar sustancias. Embudo: Es un cuerpo cónico, conun eje o vástago delgado y huecoque termina en una punta cortadaen bisel. Facilita el filtrado ytrasvasado de líquidos. Pipeta: Es un cuerpo cilíndricodelgado y hueco, con sus extremos
  15. 15. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 15 -abiertos; uno es agudo y se introduce en el líquido y por el otro se succiona el líquido a medir. Tieneuna escala graduada (ml). Mide volúmenes exactos y pequeñas de líquidos (ml.) Actualmente sereemplazan por pipetas automáticas. Bagueta: Es una varilla delgada de vidrio, de extremos romos. Se usa para mezclar sustancias. Frascos: Son botellas de plástico o vidrio ámbar o blanco, con etiqueta, tapa de rosca o esmerilada.De diferentes volúmenes (ml.), sirve para guardar sustancias.4. MATERIALES DE PORCELANA: Tenemos: Mortero con pilón: Se usan para triturar o machacar las muestras pequeñas sólidas (por ejemplo,tejidos). Es un recipiente con un mango (mazo o pistilo), y son de vidrio, porcelana o metálicos y devarios tamaños.5. MATERIALES VARIOS: Algunos de más uso en el laboratorio son: Jeringa hipodérmica: Se utiliza básicamente para inyectar líquidos y veces para trasvasar pequeñascantidades de ellos. Bandeja: Para transportar y guardar material biológico y en la disección de animales pequeños. Mechero de gas (mechero de Bunsen): Sirve para calentar cuerpos o hervir líquidos. Se tienecuidado al regular su llama para obtener la temperatura adecuada y evitar el escape del gas. Despuésde usarlo cerrar la fuente de gas. Escobilla para limpieza (cepillos): Para el lavado de los tubos de ensayo y frascos. Tiene diferentesnúmeros.
  16. 16. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 16 - Malla de asbesto (tela de alambre): Es una malla metálica con una capa de asbesto. Sostiene elrecipiente de vidrio que va a calentar. Gradillas: Son soportes de madera o alambre galvanizado para los tubos de ensayo. Trípode de hierro: Consta de un aro sostenido por tres ejes verticales. Sobre el trípode se coloca unamalla de asbesto y el recipiente (matraces, vasos, etc.) para calentar. Centrífuga: Es un aparato formado por uncabezal (movido por un motor eléctrico) endonde se colocan los tubos de centrífugascon la muestra. Tiene un control develocidad de rotación del cabezal (rpm). Estufa: Es un horno eléctrico contermostato, termómetro (hastaaproximadamente 200°C) y un foco piloto.Se usa para desecar y esterilizar material. Equipo de disección (estuche dedisección): Es un estuche con variosobjetos: pinzas, tijeras y bisturí de variosmodelos, estiletes, lupa, etc. Es útil para ladisección de organismos. Lupa: Es una lente con un mango. Existendiferentes modelos (diferente aumento odiámetros). Se usa para observar unespécimen o parte del mismo (2 a 5 diámetros). Frasco lavador: Es una botella de vidrio o de plástico con un tubo delgado y curvado colocado en latapa de ella. Sirve para lavar con agua las muestras. Lápiz graso (lápiz de cera): Su punta es de cera y sirve para marcar las superficies de vidrio. Papel indicador de pH: Es un papel especial ubicado en un estuche que poseen una escala de color ynúmero indicadores del valor del pH).
  17. 17. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 17 - Termómetro: Es un instrumento mayormente de mercurio, y mide la temperatura de los cuerpos(líquidos, etc.). Balanza: Sus pesas se manejan con pinzas. Permite medir la masa de los cuerpos. Espátula: Se usa para retirare cantidades pequeñas de sustancias de un frasco. Consta de un mangocon una lámina metálica. Microscopio: Se verá en una práctica posterior.Autoclave Estufa MicroscopioEl material de trabajo también se le suele dividir de acuerdo al material del que están hechos: material devidrio, de madera, de metal, soluciones, equipos y aparatos; o de acuerdo a la función que realizan:reacciones químicas, preparar soluciones, filtrar sustancias, analizar cuerpos, medir, etc.NOMBRE FUNCIÓN DE ELEMENTOS DE MEDICIÓNBalanza de precisión Medir masas de sustancias sólidas.BuretaMedir el volumen de una solución que reacciona con un volumen conocido de otrasolución.Papel de pH Medir el pH. Conocer la acidez de una soluciónPipeta goteroTrasvasar pequeñas cantidades de líquido, de un recipiente a otro, cuando no esnecesario realizar mediciones. Su función es la misma que la de un gotero.Pipeta graduadaMedir un volumen exacto de líquido, con bastante precisión, y trasvasarlo de unrecipiente a otro.Probeta graduada Medir volúmenes de líquidos.Termómetro Medir temperaturas.NOMBRE FUNCION DE ELEMENTOS DE SOPORTEBroche de madera Sujetar tubos de ensayoDoble Nuez Sujetar aro de bunsen, pinza para balón y otros soportes similares.Gradilla Apoyar tubos de ensayo.Pinza para balón Sujetar el balón.Pinza para crisoles Sujetar crisoles.Soporte universal Se utiliza en el armado de muchos equipos de laboratorio.Triángulo de pipa Sostener un crisol, mientras es sometido a la llama del mechero.Trípode Apoyar la malla de asbesto.
  18. 18. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 18 -NOMBRE FUNCIÓN DE ELEMENTOS DE CALEFACCIÓNBalón Calentar líquidos cuyos vapores no deben estar en contacto con la fuente de calor.Balón de destilaciónPara calentar líquidos, cuyos vapores deben seguir un camino obligado (hacia elrefrigerante), por lo cual cuentan con una salida lateral.Cápsula de porcelana Calentar o fundir sustancias sólidas o evaporar líquidos.Cristalizador Evaporación de sustancias sólidas o evaporar líquidos.Erlenmeyer Calentar o fundir sustancias sólidas o evaporar líquidos.Espátula decombustiónUn extremo se utiliza para retirar pequeñas cantidades de sustancia y depositarlaen otro recipiente; el otro extremo para calentar pequeñas cantidades de sustancia.Estufa eléctricaSe utiliza, para secado de sustancias y esterilización. Alcanza temperaturas entre250 y 300ºC.Mechero de alcohol Fuente de calor.Mechero BUNSEN Fuente de calorRefrigeranteSe utiliza para condensar vapores de el o los líquidos que intervienen en ladestilación.Tubos de ensayo Disolver, calentar o hacer reaccionar pequeñas cantidades de sustancia.Vaso de precipitados Preparar, disolver o calentar sustancias.NOMBRE FUNCIÓN DE ELEMENTOS VARIOSCampana Se utiliza cuando se necesitan evaporar sustancias tóxicas.EmbudoTrasvasar líquidos de un recipiente a otro, evitando que se derrame liquido;también se utiliza mucho en operaciones de filtración.Escobilla Limpiar el material de laboratorio.Mortero con pilón Machacar y/o triturar sustancias sólidas.Papel filtro Filtrar, se usan junto con un embudoPropipeta o bombillade succiónPara evitar succionar con la boca líquidos venenosos, corrosivos o que emitanvapores. Se utiliza junto con una pipeta graduada.Varilla de vidrioMezclar o agitar sustancias; también en ciertas operaciones en que se necesitatrasvasar un líquido, para evitar que éste se derrame.OBJETIVOS.1. Identificar y describir algunos materiales de mayor uso en el laboratorio de biología.2. Manejar correctamente el material descrito.3. Conocer las diversas formas de lavado y esterilización del material de laboratorio.PROCEDIMIENTO.1. Identificar, clasificar y describir los materiales de uso en el laboratorio según el material del que estánhechos.2. Identificar, clasificar y describir los materiales de uso del laboratorio según la función que desempeñan.3. Identificar y describir algunos aparatos y equipos de uso más frecuente en el laboratorio.
  19. 19. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 19 -INTERROGANTES1. ¿Cuál es el material del que está hecho la mayor parte del material de laboratorio de esta práctica ycuáles son sus características?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________2. ¿Cuáles son las diferencias entre pipeta y probeta?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________3. ¿Cuáles son las características de una mezcla?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________4. ¿Cuáles son las características de una combinación?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________5. ¿Cuáles son los colorantes más usados en el laboratorio y cuando se utilizan?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________6. ¿Cuándo un menisco es cóncavo o convexo? Dibuje________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  20. 20. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 20 -7. ¿Qué ventajas ofrece el material de vidrio pírex?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________8. ¿Qué efecto dañino podría provocarnos el uso de asbesto?__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________9. Enumere las formas de lavado y esterilización que se utilizan en un centro hospitalario.__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________10. ¿Qué tratamientos deben recibir los fluidos corporales antes de ser desechados?______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________REVISIÓN BIBLIOGRAFICA:________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  21. 21. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 21 -________________________________________________________________________________________________________________________________________________pH y BUFFERINTRODUCCION.Casi todos los procesos biológicos son dependientes del pH; un pequeño cambio en el pH lleva un grancambio en la velocidad de un proceso. Lo anterior es cierto no solo para aquellas reacciones en donde estáinvolucrado directamente el ion H+, sino también para aquellas en donde aparente no está involucrado.Las enzimas, un tipo particular de proteínas que catalizan las reacciones que se llevan a cabo en los seresvivos y muchas otras biomoléculas, contienen en su estructura grupos con pKas característicos. Los gruposamino y carboxilo protonados de los aminoácidos así como los grupos fosfato de los nucleótidos, porejemplo, funcionan como ácidos débiles y, por tanto, su estado iónico depende del pH de la solución que loscontiene.Las interacciones iónicas juegan, además, un papel fundamental en la estructura y reconocimiento de lasmacromoléculas de los seres vivos.Las células y organismos mantienen un pH específico y constante manteniendo sus biomoléculas en suestado iónico óptimo que generalmente se encuentra alrededor de pH 7.0.En los organismos multicelulares el pH de los fluidos extracelulares esta también fuertemente regulado. Laconstancia en el pH se logra gracias a los amortiguadores biológicos que son mezclas de ácidos débiles ysus bases conjugadas.RELACION DE EXPERIMENTOS.1. Determinación de pH de una solución por colorimetría.2. Acción de buffer, tampones o amortiguadores.MATERIALES.1. De laboratorio: 2. Biológico:Tubos de ensayo. Papel filtro. Limón.Beaker. Pizeta. Naranja.Matraz. Trípode y malla de asbesto. Tomate.Pipetas. Mechero. Saliva.Bureta. Bagueta. Orina.Soportes. Espátula. Sudor.Embudos. Papel pH. Suero sanguíneo.Pinzas de disección. Ácido acético. Suero de leche fresca.Gradillas. Fenolftaleína. Jugo de naranja.Goteros. Anaranjado de metilo. Jugo de limón.Balanza digital. Hidróxido de sodio 0.01N. Jugo de tomate.Tijera. HCl 0.1 N. Bicarbonato de sodio.Sorbetes. Nitrato de plata. Gaseosa y cerveza.Papel pH. Solución de ClNa, Na(OH), NH4(OH). Juegos de fruta comerciales.Potenciómetro. Solución de molibdato de amonio. Lejía, alcohol.Balanza digital. Solución de oxalato de amonio. Agua potable y de rio.PROCEDIMIENTO:EXPERIMENTO 1DETERMINACION DE pH DE UNA SOLUCION POR COLORIMETRIA.Objetivos:1. Determinar el pH en muestras problema.
  22. 22. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 22 -Procedimiento:1. Medir en un tubo de ensayo 2 ml. de solución problema.2. Para la tierra pesar 5 gr de tierra seca y disolverla con 25 ml de agua destilada, agitar bien y decantar,trabajar con el sobrenadante.3. Colocar el papel pH.4. Comparar con los correspondientes a la escala de los colores del patrón utilizado.5. Observar, anotar e interpretar los resultados.MUESTRA PROBLEMA pH ACIDO O BASICO
  23. 23. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 23 -EXPERIMENTO 2DETERMINACION DE pH DE UNA SOLUCION USANDO EL POTENCIOMETRO OpHMETRO.Objetivos:1. Determinar pH en muestras problemas utilizando el potenciómetro.Procedimiento:1. Medir en un tubo de ensayo 2 ml. de solución problema.2. Sumergir el potenciómetro o pHmetro.3. Hacer la lectura de la pantalla digital.4. Observar y anotar e interpretar los resultados.MUESTRA PROBLEMA pH ACIDO O BASICO
  24. 24. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 24 -INTERROGANTES1. ¿Qué diferencia existe entre pH y pOH?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________2. ¿Qué importancia tiene el pH para la flora microbiana oral?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________3. Esquematice la acción tampón de las biomoléculas.4. Ejemplos de algunos trastornos biológicos que pueden producirse por alteraciones del pH y de la acciónde tampones de las biomoléculas.________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________5. ¿Cuáles son las moléculas que son los principales tampones biológicos en la sangre?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________REVISIÓN BIBLIOGRAFICA:________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  25. 25. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 25 -__________________________________________________________________________________________________________________________________________METODO CIENTIFICOEl desarrollo de la ciencia está basado en la experiencia de la observación y el análisis de estasobservaciones en busca de patrones que nos permitan establecer hipótesis y, más adelante, leyes. Elmétodo científico nos permite conocer la realidad a través de la observación. Esas observaciones lepermiten al investigador formulase una interrogante que trate de explicar la variaciones o los patronesobservados. Esta interrogante se le conoce como formulación de hipótesis. La formulación de la hipótesises una explicación tentativa del fenómeno observado. La hipótesis debe estar de acuerdo con lo que sepretende explicar y no debe contraponerse a otras hipótesis generales ya aceptadas y permitirnos realizarpredicciones.Los estudios científicos se basan en la recopilación de datos observados. Utilizando experimentoscontrolados y reproducibles probamos si la explicación de lo observado (la hipótesis) es correcta o no. Losdatos representan cualquier información que se puede observar y que puede ser registrada utilizandocriterios cuantitativos o cualitativos. Cuando utilizamos experimentos para probar la hipótesis generalmentese incluye un grupo control o testigo influenciado por los mismos factores (variables) que inciden sobre elgrupo experimental; pero que no muestra variación en respuesta y el grupo experimental al que se leaplican un tratamiento o un factor adicional para observar la variación en respuesta. Los factores queinciden sobre el grupo control y el grupo experimental pero que no alteran un comportamiento o ejecuciónde los mismos se le conocen como variables controladas. Los factores adicionales que se le aplican algrupo experimental se conocen como variables experimentales. Los datos obtenidos en laexperimentación nunca representan la totalidad de los datos que existen en el universo, sino una muestra.Es por eso que las mediadas estudias son un estimado de la totalidad del universo.El razonamiento de los resultados experimentales requiere un análisis más cuantitativo y es por eso que seutiliza la estadística para establecer inferencias más precisas. Hay cálculos estadísticos descriptivos quedetallan resultados globales de los datos observados; como, por ejemplo: los promedios, la media, la moda,la mediana. Otros cálculos estadísticos son inferenciales ya que analizan los datos y nos permiten razonarsus variaciones: el análisis de variancia la desviación estándar y la correlación.El análisis de los datos A la formulación de La misma puede describir la razón de los patrones observadoso presentar una relación de causa y efecto entre dos hechos que sirva para explicar lo observado.¿Qué es el método científico?En cuantas partes dividirías al método científico?Explica porque es importante una hipótesis en la investigación.
  26. 26. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 26 -En los trabajos científicos se puede hablar de dos tipos de hipótesis, la hipótesis nula y la hipótesisalterna. La hipótesis nula predice que la variable investigada no producirá ningún efecto en el producto finalde la experimentación. La hipótesis alterna predice que si se observará algún efecto una vez concluido elexperimento. Al iniciar una investigación debes postular ambas hipótesis y rechazarás una de ellas alconcluir tu investigación.Antes de trabajar tu caso debes repasar tus notas para así construir la Hipótesis Nula y la Hipótesis Alterna.Ve contestando de manera breve (pero que se entienda) las siguientes partes de tu pequeña investigación.Cuida tu gramática.Observación:Hipótesis Nula:Hipótesis Alterna:Experimentación o Metodología (Materiales y método):Recopilación de datos o Resultados:Análisis de Datos o Discusión:Conclusión: En la biología, la rama de la taxonomía se encarga de clasificar a los organismos. Para poder describiruna especie se utilizan todas las características posibles del organismo. En las plantas se utiliza, entreotras cosas, las medidas de las hojas; como, por ejemplo, el largo de la hoja y el peso. Determina cuál es la variación en las hojas de algunas plantas en el Campus de la Universidad. Este esun trabajo de grupo.Procedimiento: Selecciona una de las especies de árboles presentes en los jardines del Campus de la UAP y colecciona10 hojas similares que estén en el suelo. Numera cada hoja y toma la medida longitudinal de cada hoja, en centímetros. Determina la masa de cada hoja numerada, en gramos Prepara una tabla para que organices todos los datos. Determina el promedio aritmético. Grafica los resultados del largo por peso de las hojas (recuerda que en el eje de X se coloca la variabledependiente y en Y la variable independiente). ¿Cuál sería la hipótesis nula de la experimentación que realizarás con las hojas? ¿Cuál sería la hipótesis alterna de la experimentación que realizarás con las hojas?
  27. 27. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 27 -Llena las siguientes tablas:Tabla1. Largo de la hojaHoja1 Hoja2 Hoja3 Hoja4 Hoja5 Hoja6 Hoja7 Hoja8 Hoja9 Hoja10 promedioTabla2. Peso de la hojaHoja1 Hoja2 Hoja3 Hoja4 Hoja5 Hoja6 Hoja7 Hoja8 Hoja9 Hoja10 promedioPrepara una gráfica con los datos obtenidos. Recuerda explicar tu tabla.Compara tus resultados con los de tus compañeros.Cual crees que ha sido el objetivo de esta práctica?Que ha sido lo más significativo que has aprendido de la práctica de hoy?
  28. 28. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 28 -INTERROGANTES1. ¿Qué es ciencia?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________2. ¿Cuál es la diferencia entre ciencia y tecnología?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________3. Da un ejemplo de teoría y ley.____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________4. ¿Cuáles son las características de la actividad científica?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________5. ¿Cuál cree que es la parte más importante de la investigación?¿Por qué?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________6. ¿Qué es el conocimiento científico?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________REVISIÓN BIBLIOGRAFICA:
  29. 29. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 29 -__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________IDENTIFICACION DE COMPUESTOSINORGANICOSINTRODUCCION.Las biomoléculas son las moléculas constituyentes de los seres vivos formadas por sólo cuatro elementosque son el hidrógeno, oxígeno, carbono, y nitrógeno, representando el 97,6 % de los átomos de los seresvivos. Estos cuatro átomos forman las biomoléculas debido a sus tamaños atómicos y distribuciónelectrónica que:Facilitan la formación de enlaces covalentes entre ellos, compartiendo electrones, debido a su pequeñadiferencia de electronegatividad. Estos enlaces son muy estables, la fuerza de enlace es directamenteproporcional a las masas de los átomos unidos.Facilitan a los átomos de carbono la posibilidad de formar esqueletos tridimensionales –C-C-C- para formarcompuestos con número variable de carbonos.Facilitan la formación de enlaces múltiples (dobles y triples) entre C y C, C y O, C y N, así como estructuraslineales ramificadas cíclicas heterocíclicas, etc.Facilitan la posibilidad de que con pocos elementos se den una variedad de grupos funcionales (alcoholes,aldehídos, cetonas, ácidos, aminas, etc.) con propiedades químicas y físicas diferentes.RELACION DE EXPERIMENTOS.1. Identificación de dióxido de carbono mediante agua de cal.2. Identificación cualitativa de cloruros en una muestra vegetal.3. Identificación cualitativa de cloruros en una muestra animal.4. Identificación cualitativa de calcio en una muestra vegetal.5. Identificación cualitativa de calcio en una muestra animal.6. Identificación cualitativa de fosfatos en una muestra vegetal.7. Identificación cualitativa de fosfatos en una muestra animal.OBJETIVOS GENERALES.1. Identificar algunos componentes inorgánicos de los seres vivos.2. Identificar CO2, cloruros, fosfatos y calcio, en diferentes muestras de materia orgánica.MATERIALES.1. De laboratorio: 2. Biológico:Tubos de ensayo. Agua destilada. Suero de leche fresca.Beaker. Agua de cal. Hojas secas de plantas.Pipetas. Papel filtro. Saliva.Embudos. Ácido acético.Pinzas. Nitrato de plata.Gradillas. Solución de ClNa.Goteros. Solución de NH4(OH).Matraces. Solución de Na(OH).
  30. 30. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 30 -Morteros. Solución de HCl.Mecheros. Molibdato de amonio.Baguetas. Oxalato de amonio.Trípodes. Ácido nítrico.Mallas de asbesto.PROCEDIMIENTO.EXPERIMENTO 1IDENTIFICACION DE DIOXIDO DE CARBONO.Objetivos:1. Identificar el CO2 mediante la formación de carbonato de calcio.2. Comprobar la presencia de CO2 como producto de la respiración celular de los seres vivos.Procedimiento:1. Coger 2 vasos de precipitados limpios. A uno de ellos echar 100 ml. de agua destilada y al otro 100 ml.de agua de cal.2. Con la ayuda de una pipeta graduada burbujear el aire exhalado de los pulmones en cada uno de losvasos de precipitados.3. Realizar esta operación por 2 a 3 minutos y observe.Resultados:Medir el pH del agua: _____________________________________________________________________Anote si el agua destilada cambia o no con el aire exhalado de los pulmones _________________________¿Qué observa en el vaso de precipitados que contiene el agua de cal?____________________________________________________________________________________________________________________¿Por qué? ¿Qué ha ocurrido?______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________Escriba la reacción química que demuestra la presencia de CO2.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  31. 31. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 31 -EXPERIMENTO 2IDENTIFICACION CUALITATIVA DE CLORUROS.Objetivos:1. Identificar la presencia de biomoléculas inorgánicas en una muestra vegetal.2. Destacar la importancia que tienen las sales minerales en la constitución y en el funcionamiento de losseres vivos.Procedimiento:1. Prueba control:a. Colocar en un tubo de ensayo 2 ml. de ClNa al 1%.2. Muestra biológica vegetal:a. En un vaso de precipitados de 200 ml. carbonizar una hoja de una planta.b. Las cenizas trituradas mezclarlas con 5 ml. de agua destilada.c. Filtrar la mezcla anterior en un tubo de ensayo con la ayuda de un embudo y papel filtro.d. Colocar el filtrado en 3 tubos de ensayo (tubo 1: cloruros, tubo 2: calcio y tubo 3: fosfatos)3. Muestra biológica animal:a. En un vaso de precipitados coagular unos 10 ml. de leche fresca utilizando 2 ml de ácido acético.b. Filtrar el contenido del vaso en un tubo de ensayo y agregarle 5 ml. de agua destilada.c. Colocar el filtrado (suero de leche) en 3 tubos de ensayo (tubo 1: cloruros, tubo 2: calcio y tubo 3:fosfatos)A los tubos obtenidos en los procedimientos agregar 2 a 3 gotas de solución de NO3Ag al 2%Resultados:¿Qué coloración observa en la muestra? _____________________________________________________¿Por qué? _____________________________________________________________________________Escriba la reacción química que demuestra la presencia de Cloruros.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  32. 32. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 32 -EXPERIMENTO 3IDENTIFICACION CUALITATIVA DE CALCIO.Objetivos:1. Identificar la presencia de calcio en una muestra vegetal.2. Destacar la importancia que tienen el calcio en la constitución y en el funcionamiento de los vegetales.Procedimiento:1. Prueba control:Colocar en un tubo de ensayo 2 ml. de agua de cal.2. Muestra biológica vegetal:a. En un vaso de precipitados de 200 ml. carbonizar una hoja de una planta.b. Las cenizas trituradas mezclarlas con 5 ml. de agua destilada.c. Filtrar la mezcla anterior en un tubo de ensayo con la ayuda de un embudo y papel filtro.d. Colocar el filtrado en 3 tubos de ensayo (tubo 1: cloruros, tubo 2: calcio y tubo 3: fosfatos)3. Muestra biológica animal:a. En un vaso de precipitados coagular unos 10 ml. de leche fresca utilizando 2 ml de ácido acético.b. Filtrar el contenido del vaso en un tubo de ensayo y agregarle 5 ml. de agua destilada.c. Colocar el filtrado (suero de leche) en 3 tubos de ensayo (tubo 1: cloruros, tubo 2: calcio y tubo 3:fosfatos)A los tubos obtenidos en los procedimientos agregar 2 a 3 gotas de solución de oxalato de amonio al 1%Resultados:¿Qué coloración obtuvo en la muestra? ______________________________________________________¿Por qué?¿Que ha sucedido? ______________________________________________________________Escriba la reacción química que demuestra la presencia de Calcio.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  33. 33. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 33 -EXPERIMENTO 4IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE FOSFATOS.Objetivos:1. Identificar la presencia de fosfatos en una muestra vegetal.2. Destacar la importancia que tienen el fosfato en la constitución y en el funcionamiento de los vegetales.Procedimiento:1. Prueba control:Colocar en un tubo de ensayo 2 ml. de fosfato de sodio al 5%.2. Muestra biológica vegetal:a. En un vaso de precipitados de 200 ml. carbonizar una hoja de una planta.b. Las cenizas trituradas mezclarlas con 5 ml. de agua destilada.c. Filtrar la mezcla anterior en un tubo de ensayo con la ayuda de un embudo y papel filtro.d. Colocar el filtrado en 3 tubos de ensayo (tubo 1: cloruros, tubo 2: calcio y tubo 3: fosfatos)3. Muestra biológica animal:a. En un vaso de precipitados coagular unos 10 ml. de leche fresca utilizando 2 ml de ácido acético.b. Filtrar el contenido del vaso en un tubo de ensayo y agregarle 5 ml. de agua destilada.c. Colocar el filtrado (suero de leche) en 3 tubos de ensayo (tubo 1: cloruros, tubo 2: calcio y tubo 3:fosfatos)A los tubos obtenidos en los procedimientos 2 ml. de solución de molibdato de amonio tratado con ácidonítrico concentrado en cantidad suficiente para que el ácido molíbdico que se forman, se redisuelva.Calentar el tubo a baño maría.Resultados:¿Qué coloración obtuvo en la muestra? ______________________________________________________¿Por qué?¿Que ha sucedido? ______________________________________________________________Escriba la reacción química que demuestra la presencia de fosfatos.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  34. 34. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 34 -INTERROGANTES1. Definir oligoelementos.____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________2. ¿Qué son enfermedades carenciales?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________3. Enumerar y describir en forma concreta algunas enfermedades relacionadas a la deficiencia de Fe, Mg,Ca, P, I, Na, Cl y K.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________4. ¿Cuál es el principal amortiguador en el equilibrio ácido-básico de la sangre?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________5. Si se realiza la prueba de nitrato de plata al agua destilada ¿Qué resultados obtenemos y porque?__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________6. Menciones algunas de las funciones de los cloruros, fosfatos, calcio y CO2 en los seres vivos.____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________7. Qué diferencia existe entre bioelementos y biomoléculas. Ponga 10 ejemplos de Biomoléculas orgánicase inorgánicas.________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  35. 35. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 35 -______________________________________________________________________________________________8. En donde existe mayor cantidad de cloruros, en la muestra vegetal o en la muestra animal.____________________________________________________________________________________9. Escriba todas las reacciones químicas de los resultados de la práctica.REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  36. 36. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 36 -IDENTIFICACION DE COMPUESTOSORGANICOSIDENTIFICACIÓN DE HIDRATOS DE CARBONOSDEFINICION.Son las sustancias orgánicas más extendidas en la naturaleza. Son la principal fuente de energía de losseres vivos. Los hidratos de carbono están compuestos de C, H, O, y éstos últimos van en la proporción delagua, de ahí que se llamen hidratos.Cuando se combinan dos azúcares simples se forma un azúcar doble (disacárido), como por ejemplo lasacarosa, maltosa y lactosa. También podemos encontrar oligosacáridos, que están formados por 3 a 10monosacáridos. Entre los polisacáridos los hay digeribles para el hombre (almidón y glucógeno) y nodigeribles, que constituyen lo que llamamos fibra alimentaria o fibra dietética (celulosa, hemicelulosa,pectina, agar-agar, gomas y mucílagos).Todos los monosacáridos y los disacáridos con enlace monocarbonilo, cuando se encuentran en solución apH alcalino, tienen la capacidad de reducir otros compuestos. Esta capacidad reside en las característicasdel grupo carbonilo (C anomérico en formas cicladas) libre.CLASIFICACIÓN.Los hidratos de carbono se clasifican en simples y complejos:1. Los simples, son azucares de rápida absorción y son energía rápida. Estos generan la inmediatasecreción de insulina. Se encuentran en los productos hechos o, con azucares refinados azúcar, miel,mermeladas, jaleas, golosinas, leche, hortalizas y frutas etc. Algo para tener en cuenta es que losproductos elaborados con azucares refinados aportan calorías y poco valor nutritivo, por lo que suconsumo debe ser moderado.2. Los complejos, son de absorción más lenta, y actúan más como energía de reserva por la anteriorrazón. Se encuentra en cereales, legumbres, harinas, pan, pastas.Según el número de moléculas que tengan los glúcidos se pueden dividir en cuatro grandes grupos:1. MonosacáridosLAS PENTOSASXilosa Se encuentra como componente en la maderaRibosa Es un constituyente de los ácidos nucleícosRibulosa:Encargada de captar el CO2 atmosférico durante el ciclo de Calvin de la fotosíntesis(fase oscura), donde es activada por el ATP, también es un intermediario de las vías delas pentosas fosfatoArabinosaForma parte de las gomas, mucilagos y pectinas (de este grupo, estas son las únicasque normalmente ingerimos dentro de mermeladas y dulces)LAS HEXOSASD-glucosaAparece en los frutos maduros, sangre y tejidos animales. Esta constituye el azúcar delorganismo, es muy soluble en agua, y es el carbohidrato que transporta la sangre y elque principalmente utilizan los tejidos.D-manosaSiempre aparece combinado en la naturaleza. Nunca libre por tanto preferimos noenunciar ningún componente.D-galactosaAldohexosa formada por las glándulas mamarias a partir de la glucosa. Forma grasasespeciales como los cerebrósidos, también permite la glucosilación de las proteínas ylípidos y finalmente forma el condroitín sulfato en los tejidos conjuntivos, cartilaginoso y
  37. 37. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 37 -óseo.Aparece en lípidos complejos. El hígado puede convertirla en glucosa y después enenergía.D-fructosaSe lo denomina azúcar de frutas. Aparece libre en la miel y en los jugos de frutas. Tieneun sabor muy dulce. Tiene el mismo poder alimenticio que la glucosa porque el hígado loconvierte en glucosa.2. DisacáridosMaltosa: Aparece en la malta o cebada germinada y es muy soluble en agua.Lactosa: Es el azúcar de la leche y es poco soluble en agua.Sacarosa:Es el azúcar de mesa. Se obtiene de la caña de azúcar y de la remolacha, y como todossaben, es muy soluble en agua.3. Oligosacáridos:Trisacáridos: La rafinosa se encuentra en las legumbres. La melicitosa que se encuentra en la miel.Tetrasacáridos: La esteaquiosa, el más estudiado, se encuentra en las semillas de soja.4. Polisacáridos:Almidón:Este se encuentra en los vegetales en forma de granos, ya que son la reservanutritiva de ellos. Aparecen en la papa, arroz, maíz, y demás cereales.Glucógeno:Se encuentra en los tejidos animales, donde desempeña la función de reservanutritiva. Aparece en el hígado y en los músculos.Celulosa: Cumple funciones estructurales en los vegetales.Quitina:Forma parte del exoesqueleto de los insectos, crustáceos, arácnidos y miriápodos,también se encuentra en las paredes celulares de los hongos;Inulina: Aparece en los tubérculos de dalia, yacón, alcachofa, en alcauciles, ajos y cebollas.Liquenina: Aparece en los musgos y líquenes.Mucopolisacáridos: Cumplen función de sostén, nutrición y comunicación intercelular.RELACION DE EXPERIMENTOS.1. Identificación cualitativa de glucosa.2. Identificación cualitativa de glucosa en una muestra biológica.3. Identificación cualitativa de almidón.4. Identificación cualitativa de almidón en una muestra biológica.MATERIALES.1. De laboratorio: 2. Biológico:Tubos de ensayo. Papel filtro. Papa.Matraz. Lugol. Jugo de manzana.Embudos. Pipetas. Jugo de naranja.Goteros. Glucosa 50%. Jugo de uva, limón y tomate.Trípode. Almidón 50%. Jugos lightMalla de asbesto. Fructosa 30%. Orina.Bagueta. Sacarosa 30%. SalivaBenedict. Pinzas para tubo. Maicena.Beaker. Pan, galletas diversas..Pipetas. Papel cartón, madera.Gradillas. Jamonada, salchichasPizeta. MielMechero.
  38. 38. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 38 -PROCEDIMIENTO.EXPERIMENTO 1IDENTIFICACION CUALITATIVA DE GLUCOSA (PRUEBA CONTROL).Objetivos:1. Identificar la glucosa con el uso del reactivo de Benedict.2. Determinar la importancia de la glucosa en las funciones metabólicas y estructurales dentro de la célula.Procedimiento:1. En un tubo de ensayo mezclar 2 ml de solución al 1% de glucosa con 2 ó 3 gotas de Reactivo deBenedict.2. Calentar el tubo, con la ayuda del mechero, por 2 a 3 minutos (o hasta que aparezca en la mezcla lacoloración amarillo-verdosa que vira a anaranjada hasta rojo-ladrillo). También puede calentarse a bañomaría por 5 minutos.Resultados:¿Qué color observa finalmente en la mezcla y qué nos indica? __________________________________________________________________________________________________________________________¿Qué indica la intensidad del color? _______________________________________________________________________________________________________________________________________________¿Componentes químicos del reactivo de Benedict? ___________________________________________________________________________________________________________________________________Escriba la reacción química que demuestra la presencia de glúcidos.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  39. 39. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 39 -EXPERIMENTO 2IDENTIFICACION CUALITATIVA DE GLUCOSA EN UNA MUESTRA BIOLÓGICA.Objetivos:1. Identificar la presencia de glucosa en una muestra biológica.2. Destacar la importancia que tienen las frutas y otros alimentos como fuentes de energía ricas en glucosa.Procedimiento:1. Triturar un trozo de fruta en un mortero bien limpio.2. Agregar al triturado 5 ml. de agua destilada.3. Filtrar a un tubo de ensayo y utilizar 2 ml. del filtrado.4. Con el filtrado realizar la Prueba de Benedict.5. Calentar el tubo.Repetir el procedimiento con cada una de las muestras biológicas (jugos, miel, azúcar, y diversas frutas).Resultados:¿Qué coloración observa en la muestra? _____________________________________________________¿Por qué? _____________________________________________________________________________Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  40. 40. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 40 -EXPERIMENTO 3IDENTIFICACION CUALITATIVA DEL ALMIDÓN (PRUEBA CONTROL).Objetivos:1. Identificar la presencia de almidón, y almidón en una muestra biológica mediante el uso del lugol.2. Destacar la importancia que tienen los almidones como fuente de reserva vegetal.Procedimiento:1. En un tubo de ensayo echar 2 ml. de solución de almidón.2. Agregar 1 a 2 gotas de solución de lugol.Resultados:¿Qué color observa finalmente en la mezcla? _________________________________________________¿Por qué? _____________________________________________________________________________IDENTIFICACION DE ALMIDÓN EN UNA MUESTRA BIOLÓGICA.Procedimiento:1. Triturar un trozo de papa en un mortero bien limpio.2. Mezclar en un tubo de ensayo con 2 ml. de agua destilada.3. Decantar en un tubo de ensayo.4. Agregar 1 a 2 gotas de solución de lugol.Resultados:¿Componentes químicos del lugol? _______________________________________________________________________________________________________________________________________________¿Qué coloración observa en la muestra?______________________________________________________¿Por qué? ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  41. 41. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 41 -INTERROGANTES1. Definir compuestos orgánicos____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________2. ¿Qué enfermedad o enfermedades se producen por deficiencia de algunos carbohidratos en elorganismo?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________3. ¿Qué enfermedad se produce por deficiencias en el metabolismo de los azúcares? Describir________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________4. ¿Cuáles son los valores normales de glucosa en suero sanguíneo?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________5. ¿Qué pruebas de laboratorio conoce usted para diagnosticar la diabetes mellitus? ¿En qué consisten?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________6. Explique sus resultados obtenidos en la identificación de la glucosa teniendo en cuenta como interviene laestructura química de la glucosa y los componentes del reactivo de Benedict en la aparición de losresultados?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________7. Explique sus resultados obtenidos en la identificación del Almidón, teniendo en cuenta como interviene laestructura química del almidón y los componentes del lugol en la aparición de los resultados?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  42. 42. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 42 -8. ¿Por qué el Lugol aparece como un compuesto de inclusión?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________9. Si se realiza la prueba de Benedict sobre sacarosa que reacción obtendría. ¿Por qué?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________10. Explica a qué se debe que el almidón con Lugol pierda el color al calentar, y que vuelva a recuperar sucolor azul-violeta después de enfriarse.________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________11. ¿Qué les ocurre a las moléculas de almidón al ser calentadas en presencia de ácido clorhídrico?¿Quémoléculas se obtienen?. Explica qué ensayos químicos utilizarías para demostrarlo.________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________12. ¿Cuáles son los grupos funcionales de los azucares o glúcidos?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________13. ¿Qué diferencia existe entre una aldosa y una cetosa?________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
  43. 43. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 43 -IDENTIFICACION DE COMPUESTOSORGANICOSIDENTIFICACIÓN DE LIPIDOS Y PROTEINASDEFINICION.Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e hidrógeno y generalmentetambién oxígeno; pero en porcentajes mucho más bajos. Además pueden contener también fósforo,nitrógeno y azufre. Es un grupo de sustancias muy heterogéneas que sólo tienen en común estas doscaracterísticas: Son insolubles en agua y solubles en disolventes orgánicos, como éter, cloroformo,benceno, etc.FUNDAMENTO:El Sudán III es un método utilizado fundamentalmente para demostrar triglicéridos, aunque también tiñeotros lípidos.Pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que son aquellos que no tienen afinidad por estructurasácidas o básicas. Son insolubles en el agua y tiñen a aquellas sustancias que tienen un poder de disoluciónsuperior al del líquido empleado para preparar la solución colorante.Los colorantes para grasas son más solubles en las propias grasas que en el medio en el que van disueltos.Así, al bañar la grasa con la solución del colorante éste tiende a disolverse en la grasa que se va cargandodel colorante. Por regla general estos colorantes siempre van en solución alcohólica o bien en una mezclade alcohol/acetona o alcohol/agua.Las proteínas son compuestos químicos muy complejos que se encuentran en todas las células vivas: en lasangre, en la leche, en los huevos y en toda clase de semillas y pólenes. Hay ciertos elementos químicosque todas ellas poseen, pero los diversos tipos de proteínas los contienen en diferentes cantidades. Entodas se encuentran un alto porcentaje de nitrógeno, así como de oxígeno, hidrógeno y carbono. En lamayor parte de ellas existe azufre, y en algunas fósforo y hierro.Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación,destaca la reacción del Biuret.Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a lapresencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, secoordina con los enlaces peptídico formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de colordepende de la concentración de proteínas.FUNDAMENTO:Las proteínas y los péptidos en presencia de ión cúprico, en medio básico, dan complejos coloreados devioleta, color que depende de la presencia de enlaces peptídicos en la molécula proteica.Se denomina Biuret a esta prueba de la cupro-proteína, por analogía entre su coloración resultante y lacoloración obtenida cuando el biuret (compuesto que se obtiene al calentar urea por encima de su punto defusión) reacciona en presencia de Cu++en medio básico.RELACION DE EXPERIMENTOS.1. Solubilidad de lípidos.2. Solubilidad del sudán en prueba control y biológica.3. Identificación de proteínas mediante la Reacción de Biuret.4. Identificación de proteínas en una muestra biológica en leche o huevo y carnes.5. Desnaturalización de proteínas por agentes físicos y químicos.MATERIALES.
  44. 44. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 44 -2. De laboratorio: 2. Biológico:Tubos de ensayo. ClNa. Leche fresca entera de vaca.Matraz. NaOH al 30% Huevo de gallina.Embudos. Sudan alcohólico. Mantequilla animal y vegetalGoteros. Biuret. Aceite y manteca.Trípode. HCl al 50%. Huevo de codorniz.Malla de asbesto. Alcohol etílico. Diversas carnes.Bagueta. Gasolina. Jamonada, mortadela de pollo,Beaker. Éter. Chancho, pavo.Pizeta. Hidróxido de sodio al 30%. Salchichas diversas.Pipetas. Formol. Un cubo de caldo de polloPapel filtro. Acetona. Leche descremada de tarro.Mechero Cloroformo. Leche de soyaGradillas. NH4 (OH) al 30%. Un sobre de colapiz en polvoPROCEDIMIENTO.EXPERIMENTO1IDENTIFICACION DE LIPIDOS: SOLUBILIDAD.Objetivos:1. Determinar la solubilidad de los lípidos en distintos medios orgánicos e Inorgánicos.Procedimiento:1. Agregar a 5 tubos de ensayo A, B, C, D y E 2 ml de aceite.2. Añadir 2 ml de alcohol en el tubo A, 2 ml de gasolina al tubo B, 2 ml de cloroformo al tubo C, 2ml deacetona al tubo D y 2ml de agua al tubo E3. Agitar todos los tubos y observar.Resultados:¿En qué tubo la mezcla es más soluble y esto qué nos indica? __________________________________________________________________________________________________________________________¿En qué tubo la mezcla es menos soluble? ___________________________________________________¿Por qué? _____________________________________________________________________________Escriba la reacción química que demuestra la presencia de lípidos.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  45. 45. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 45 -EXPERIMENTO 2SOLUBILIDAD DEL SUDAN (prueba control).Objetivo:1. Demostrar que el sudán alcohólico se disuelve en las grasas.Procedimiento:1. Mezclar unas gotas de aceite comestible con unas gotas de Sudán alcohólico.2. Agitar el tubo.Resultados:¿Qué coloración observa en la muestra? _____________________________________________________¿Por qué? _____________________________________________________________________________Conclusiones:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  46. 46. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 46 -EXPERIMENTO 3SOLUBILIDAD DEL SUDAN (muestra biológica).Objetivo:1. Demostrar que el sudán alcohólico se disuelve en las grasas.Procedimiento:1. En un tubo de ensayo, mezclar 3 ml de leche con 10 ml de agua destilada y 1 ml de Sudan III.2. Añadir 2 ml de HCl al 50%.3. Llevar a baño María. Se observara la aparición de 3 fases.4. Observar y anotar los resultados. Dibuje.Resultados:¿Qué coloración observa en la muestra? _____________________________________________________¿Por qué? _____________________________________________________________________________Conclusiones:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATIZE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  47. 47. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 47 -EXPERIMENTO4IDENTIFICACION DE PROTEÍNAS: REACCIÓN DE BIURET (prueba control).Objetivos:1. Demostrar la presencia de proteínas mediante el reactivo de Biuret.2. Destacar la importancia de las proteínas como constituyente de los seres vivos.Procedimiento:1. En un tubo de ensayo mezclar 5ml de clara de huevo con 3ml de agua destilada.2. Agregar 2 ml. de solución de hidróxido de sodio al 30%.3. Agregar 1 ml. de solución de Biuret.4. Agitar y observar.Resultados:¿Qué color observa finalmente agitando la mezcla? _____________________________________________¿Cuál es la composición química del Biuret? ________________________________________________________________________________________________________________________________________¿Qué indica la intensidad del color? _________________________________________________________¿Quién es el responsable del color resultante? ¿Qué reacción química ocurre? ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________¿Qué proteína se ha identificado? ___________________________________________________________Escriba la reacción química con biuret que demuestra la presencia de proteínas.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  48. 48. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 48 -EXPERIMENTO 5IDENTIFICACION DE PROTEÍNAS EN UNA MUESTRA BIOLÓGICA (leche).Objetivos:1. Demostrar la presencia de proteínas en una muestra biológica.2. Identificar ciertas proteínas presentes en las muestras biológicas.Procedimiento:1. En un tubo de ensayo mezclar 2ml de leche con 1ml de agua destilada.2. Agregar 2 ml. de solución de hidróxido de sodio al 30%.3. Agregar 1 ml. de solución de Biuret.Resultados:¿Qué color observa finalmente agitando la mezcla? ___________________________________________________________________________________________________________________________________¿Por qué?______________________________________________________________________________¿Qué proteína se ha identificado? ___________________________________________________________Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  49. 49. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 49 -EXPERIMENTO 6IDENTIFICACION DE PROTEÍNAS EN UNA MUESTRA BIOLÓGICA (carnes diversas).Objetivos:1. Demostrar la presencia de proteínas en una muestra biológica.2. Identificar ciertas proteínas presentes en las muestras biológicas.Procedimiento:1. Con la ayuda de un mortero triturar por separado un pequeño trozo de carne de res, cordero, pollo ypescado, mezclar con 2 ml de agua destilada.2. Decantar en tubos de ensayo en cantidades iguales: tubo A (res); tubo B (cordero); tubo C (pollo) y tuboD (pescado).3. Agregar 2 ml. de solución de hidróxido de sodio al 30%.4. Agregar 1 ml. de solución de Biuret.Resultados:¿Qué color observa finalmente agitando la mezcla? ___________________________________________________________________________________________________________________________________¿Por qué?______________________________________________________________________________¿Qué proteína se ha identificado? ___________________________________________________________Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  50. 50. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 50 -EXPERIMENTO 7DESNATURALIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS.Objetivos:1. Demostrar la desnaturalización de las proteínas mediante agentes químicos y físicos.Procedimiento:1. Colocar en 4 tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse con un poco deagua) también realizar con 2 – 3 ml de leche.2. Calentar uno de los tubos en el mechero, al segundo añadir al otro 2ml. de HCl, al tercer tubo 2 ml. deNaOH al 4% y al cuarto tubo 2 ml de NaOH al 20 %3. Observar los resultados.Resultados:¿Qué observa en cada tubo? ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________¿Cuál de los tres agentes tiene mayor poder de desnaturalización? ______________________________________________________________________________________________________________________Escriba la reacción química que demuestra la desnaturalización de las proteínas.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:
  51. 51. Blgo. Mcs. George Vasquez Bezada.GUIA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR - 51 -EXPERIMENTO 8REACCION XANTOPROTEICA.Procedimiento:1. Preparar un tubo de ensayo con 5 ml de clara de huevo,2. Mezclar 1 ml de ácido nítrico concentrado.3. Calentar a baño María por unos minutos, dejar enfriar los tubos a temperatura de 10 °C.4. Agregar a cada tubo (OH) NH4 al 30 % en exceso.5. Observar.Resultados:¿Qué observa en cada tubo? ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________¿A qué se debe la coloración?____________________________________________________________________________________________________________________________________________________Escriba la reacción química xantoproteíca de las proteínas.Conclusiones:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ESQUEMATICE LO REALIZADO Y OBSERVADO:

×