Secuenciacion del ADN

1. INTEGRANTES
Karen Ramos Díaz
Orlando Vargas

2. ¿Qué es secuenciación?
Secuenciación enzimática
Método Sanger
Secuenciación automática
Reactivos y aparatos en la
secuenciación

3. •¿Que es la secuenciación?
•Significado
•La determinación de la secuencia de
nucleótidos de una molécula especifica.
•Es fundamental para hacer predicciones sobre su
función. Facilitando su manipulación.
•Existen dos métodos:

4. •TERMINACIÓN DE CADENA
•Diseñado por Sanger, 1980
•Fundamento
Replicación del ADN
Complementariedad de bases
Síntesis de una nueva hebra de ADN, inicia en el sitio de
un primer y finaliza con la incorporación de un nucleótido
terminador.

5. SE NECESITAN LOS SIGUIENTES
COMPUESTOS:
El ADN molde o segmento de ADN que se
desea secuenciar
Una enzima que replique el
ADN, normalmente la ADN Polimerasa
Un cebador o "primer“
Los cuatro nucleótidos trifosfato (dATP,
dCTP, dGTP y dTTP)
Por último, se necesitan nucleótidos didesoxi
(ddATP, ddTTP, ddCTP y ddGTP)

6. 1° Paso
2°Paso
3° 4°
Paso Paso

7. 5° Paso 6° Paso
7° Paso 8° Paso

9. Secuenciación: Separación de fragmentos
 Los productos de las 4
reacciones, cada una
conteniendo una pequeña
cantidad de uno de los cuatro
didesoxinucleótidos, son
cargadas en el gel y sometidas
a electroforesis
Como la polimerización es solo
en dirección 5’ a 3’, los
fragmentos mas cortos estarán
en 5’ y los más largos que se
encontrarán en la dirección 3’ Autorradiografia resultante

11. - La principal diferencia entre método
enzimático de terminación de cadena y
el método automático de secuenciación
radica, en primer lugar en el tipo de
marcaje.
- La segunda diferencia radica en el
sistema de detección de los fragmentos
de ADN.

12.  Secuencia
obtenida por el método
automático de secuenciación.

13. UTILIDAD E IMPORTANCIA EN LA MEDICINA
1) LA PRODUCCIÓN DE SUSTANCIAS CON EFECTOS TERAPÉUTICOS.
Somatostatina (SS) que, segregada por el hipotálamo, inhibe la síntesis de
somatotropina (GH) u hormona del crecimiento.
Insulina que, segregada por el páncreas, regula la concentración de glucosa
en sangre.
Somatotropina (GH) que, segregada por la adenohipófisis controla y regula
el normal crecimiento (evitando enanismo).
Interferones, que son proteínas elaboradas por células animales en respuesta
a una infección vírica.
Factor VIII antihemofílico (AHF), es una globulina que estimula a las
plaquetas (para la coagulación sanguínea).
Renina, es una enzima que cuaja la leche, necesaria para la elaboración de
quesos (o para algunos fármacos).

14. UTILIDAD
2. El diagnóstico de enfermedades
hereditarias.
3. La identificación de genes
humanos específicos.
4. La terapia génica.