Dr. Carlos J. Coraspe D                              Médico Infectologo                             Hospital Universitario...
Toma de muestra en    médicina
TOMA DE MUESTRAS• Definición:  Obtención de especimenes biológicos para el apoyo  al diagnóstico clínico. Especimenes: * L...
QUIEN LA REALIZA?1. Personal Profesional:• Médicos• Enfermeros• Bioanalista• Microbiólogos• Personal Capacitado2. Paciente...
Requisitos generales para la seguridad personal1. Vestimenta y accesorios:    Es obligatorio el utilizar     bata durante ...
Medidas específicas durante la                  flebotomía1. Practique las precauciones universales mínimas con todo      ...
Medidas específicas durante la flebotomía9. Si hay derrame de sangre, limpie con Hipoclorito de sodio al      10%.10. Limp...
Medidas específicas durante la              flebotomía14. Si ocurre un pinchazo con aguja conteniendo    sangre de un paci...
LA PREPARACION DEL PACIENTE:• La primera impresión y las  observaciones inmediatas pueden  ser útiles para el flebotomista...
LA PREPARACION DEL PACIENTE:• El paciente espera de usted un trato  profesional, cortés y de comprensión, ya  que él está ...
Ética:• En todo momento debe mantener la ética y  confidencialidad del paciente y sus pruebas. Los  Códigos de Etica de lo...
CONCEPTOS• Espécimen              • Muestra Material extraído del    Parte del espécimen paciente .               debidame...
Si la probabilidad clínica de que el pacienteesté cursando con una determinadaenfermedad es tan alta, aunque el examenresu...
PROCEDIMIENTOS1.   Preparación del Paciente2.   Identificación3.   Fijación del Torniquete4.    Evaluación del sitio de pu...
PROCEDIMIENTO    Identificación del Paciente:NombreCedula/códigoEdadTeléfonoFecha-Hora de toma de muestraExámenes a ...
PROCEDIMIENTO• Fijación del Torniquete No dejarlo mucho  tiempo)  Provoca estasis venoso, facilita la selección  del siti...
PROCEDIMIENTO     Asepsia de la zona de punción *Limpieza en forma circular (adentro hacia fuera)  ---Alcohol/algodón *Sec...
METODOS•   Jeringa1. Elementos  *Aguja  *Jeringa  *Tubos
METODOS2. Procedimiento: *Introducción de la aguja en la jeringa *Localización y punción de la vena *Extracción del embolo...
METODOS• Lanceta Casos Recomendados: Necesidad de pequeños volúmenes de  sangre. (gota gruesa) Procedimiento: * Asepsia ...
FUNCIÓN DEL LABORATORIO:• Confirmar o descartar un diagnóstico.• Ofrecer la mejor opción en el tratamiento.• Incluir la op...
ADVERTENCIA• Por ello, es importante que los  pacientes estén todo lo informados que  sea posible. Deben protegerse  pregu...
El diagnóstico y tratamiento de lasenfermedades infecciosas generalmenterequiere el aislamiento e identificación deagente ...
Ruta de los errores:• Solicitud del examen.• Estilos de solicitudes.• Nombre del paciente completo y correcto• Nombre del ...
Toma de muestra para el laboratorio• Examen general y Exámenes  especiales• Muestras para coloraciones• Muestras para Cult...
PREPARACION DEL EQUIPO:•   Agujas: Están numeradas dependiendo de su calibre. Para colección de    sangre para hemogramas,...
EL PROCEDIMIENTO DE LA FLEBOTOMIA• La muestra debe tomarse correctamente y  bajo las condiciones más favorables para  evit...
Examen general y Exámenes                    especiales• Hematología completa, VSG, frotis sanguíneo, gota gruesa,    exte...
Tubos para toma de muestras
PREPARACION DEL EQUIPO:• Tubos de colección: Los tubos están  predeterminados para llenarse con un determinado  volumen de...
La palpación:• Antes de proceder a puncionar, se debe  escoger la vena. La mejor manera es  realizando una palpación de la...
La palpación:    Las venas más utilizadas para la venopunción,    están localizadas en el área antecubital. Entre éstas   ...
La palpación:
PALPACIÓN DE LAS VENAS
La Descontaminación:• Una vez que se ha decidido por la vena a  puncionar, debe proceder a descontaminar el  área con alco...
La punción venosa:• Ahora está preparado para realizar la extracción  sanguínea.• El brazo debe estar preferiblemente en p...
Extracción con jeringa:•   Cuando vaya a proceder a realizar la extracción con    jeringa, usted debe tener presente el ca...
Extracción con jeringa:
Extracción con jeringa:•   Apretando firmemente la jeringa, debe jalar    el émbolo con movimiento continuo para    extrae...
Extracción con jeringa:
Extracción con aguja:• Presione el algodón sobre el  sitio de la punción aplicando  una presión adecuada y no  excesiva   ...
Extracción con aguja:
Tubo tapa roja• Química sanguínea: Urea, creatinina, glicemia,  amilasa, ácido úrico, perfil lipídico(colesterol  total, c...
Detección de anticuerpos              específicos (serología)• Se estudia la respuesta inmune humoral  (anticuerpos especí...
Tubo tapa Morada: tiene           anticoagulante EDTA• Hematología completa, VSG, frotis  sanguíneo, gota gruesa, extendid...
PREPARACION DEL EQUIPO:      TUBO CON TAPON MORADO           USO: Hematología     ADITIVO: Anticoagulante EDTA
PREPARACION DEL EQUIPO:       TUBO CON TAPON CELESTE      USO: Pruebas de Coagulación ADITIVO: Anticoagulante Citrato de s...
Tubo tapa Azul• Tiempos de coagulación( Debe ser  llenado hasta la marca)
General de orina• Envase apropiado para el examen: Envase  para Orina.• Rotularlo: nombre y fecha• Orina del chorro del me...
Envase estéril para examen de orina        Urocultivo y esputo
Heces• Envase de heces: Solo el envase especial  para ello• Rotularlo: Identificación• Llevarlo lo más rápido posible
Envase especial para heces
Muestras para coloraciones y             Cultivos• Bacteriología, Micología  y Parasitología• Virus• Anatomía patológica
MicrobiologíaBACTERIAS        PARASITOS      HONGOS        VIRUSBacteriología                Parasitología                ...
Concepto de flora normalMicroorganismos que se encuentran confrecuencia en el cuerpo de las personas sanassin provocarles ...
Zonas estériles y con flora normal en el              organismo humano• Zonas estériles           • Zonas con flora normal...
Bacteriología•Coloración : Gram, Zielknielsen•Cultivo
Laminas para examen directo y         coloración
Tinción de Gram          Utilidad Clínica• Permite al clínico plantear una hipótesis de  agente causal.• Orientación para ...
• Gran importancia en infecciones mixtas, por  bacterias anaeróbicas y aeróbicas. En la tinción se  observarán ambos micro...
Cultivo: bacterias, hongos y virus•   Hemocultivo•   Medula ósea•   Liquido cefalorraquídeo•   Pleural•   Articular•   Tej...
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Neisseria meningitidis. Aislamiento.     Caracteres bioquímicos.      • TOMA DE MUESTRAS:          – De LCR por punción lu...
TIPOS DE MUESTRA                                              ORINA (por punción                                          ...
TIPOS DE MUESTRA                           esputo/BA                                                 L                    ...
EsputoExpectoración:• Evaluación de la calidad de la muestra.• Ausencia microorganismos patógenos: informar  crecimiento f...
Materiales necesarios para la toma de muestra                      Para recoger exudados                           Biologí...
Materiales necesarios para la toma de muestra                   Aguja y jeringa Ampollas Abscesos cerrados Fluídos corp...
HemocultivoCultivo microbiológico de una muestra desangre obtenida par una punciónindependiente.
Hemocultivo• Materiales:• Frascos de hemocultivos  proporcionados por el  laboratorio.       – Al menos 2       – Son dife...
Materiales necesarios para la toma de muestra                Colectores estériles                     Orina por chorro med...
Método para obtención de la muestraOrina de 2° chorro:• Ventajas  – fácil de tomar  – no invasivo• Desventajas  – contamin...
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Materiales necesarios para la toma de muestra                Portaobjetos y bisturís     Muestras de piel     Escarificaci...
CONSERVACIÓN Y TRANSPORTELos medios de transporte sólo deben ser usados en casos necesarios               (Exudados y secr...
Cultivo de microorganismos• Gran parte de la microbiología depende de la capacidad de• cultivar y mantener microorganismos...
Requisitos de una buena muestra:• Obtener la muestra antes de iniciar el tratamiento  antimicrobiano.• Desde sitio más rep...
TOMA DE LA MUESTRA:La correcta recolección de una muestra parasu cultivo es la etapa más importante en elaislamiento de mi...
PRINCIPIOS BÁSICOS PARA LA CORRECTA     RECOLECCIÓN DE MUESTRA (S):• La muestra para cultivo debe ser material del  verdad...
• Obtener suficiente cantidad de muestra para  llevar a cabo las técnicas de cultivo solicitadas.• Utilizar dispositivos d...
• Si el paciente va a colectar su muestra,  asegúrese de que comprenda lo que le  explicó, mediante los siguientes consejo...
• Enseñe habilidad con progresos lógicos.• Y recuerde, los pacientes recuerdan el 90% de  lo que ellos dicen y hacen; pero...
Volumen:• En general la muestra obtenida con asa,  hisopo, guante, jeringa, etc. es suficiente para  su proceso.• En líqui...
Número de especímenes:• En cultivo de sangre, la más recomendable es  utilizar 2 muestras de diferente sitio de  punción.•...
Conservación:• Idealmente toda muestra debe ser incubada  inmediatamente.• Especímenes que se pueden conservar menos  de 6...
Transporte:• Evite que el líquido se contamine con el algodón, esté en contacto con la luz solar  directa y llevarlo en al...
Interpretación de resultados• Conocer las características del test que estoy  solicitando.• Conocer flora normal.• Microor...
Rechazo de Muestras:• Solicitud sin nombre del paciente.• Discrepancia entre la identificación del paciente  que figura en...
Causas de error en la toma de muestra  Técnica de extracción de muestra incorrecta:    Recolección en recipiente incorrec...
CAUSAS DE RECHAZO DE LA MUESTRASSE RECHAZARAN MUESTRAS:Sin rotular, o rotuladas inapropiadamente o con datos discordantes...
• Cultivos anaerobios solicitados en expectoración,  orina, heces fecales y/o Cultivo faríngeo.• Muestra sin identificar e...
• Muestra sin tapa o algodón contaminado con  líquido.• Puntas de sonda de foley.• Orina o expectoración recolectada duran...
• Orina mantenida más de 2 horas a  temperatura ambiente.• Recipiente con pérdidas de: orina, líquido,  heces fecales, exp...
• Jeringas que no se tapan con el protector de la  aguja.• Muestra con volumen escaso.• Si Usted rechaza un espécimen, ano...
Todos las muestras se consideranpotencialmente infecciosos y deben serremitidos ajustándose a las normas de        biosegu...
Micología•   Examen directo: KOH (hidróxido de potasio)•   Coloración para hogos•   Serología para hongos•   Cultivo para ...
Cultivos dermatofitos
Tema 4PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS PARA SU ANÁLISIS.Esta operación exige unas reglas de manipulación aséptica muy estrictas...
Parasitología• Examen directo: Helmintos( áscaris, stronguiloides, oxiuros, tricocéfalos, etc.)• Extendido o frotis en lam...
TOMA DE MUESTRAS EXÁMENES DE DEPOSICIONESParasitológico seriado o Coproparasitario Detección de parásitos como: • Helminto...
Toma de muestra capilar para gota           gruesa
Entrega de Resultados:Si Usted nos proporciona el número y letra   con el que se etiqueto su solicitud, los    resultados ...
Muestra de Heridas• Evitar tomar muestras de heridas  superficiales con tórula.• Evitar tomar muestras de trayectos fistul...
Heridas traumáticas        Heridas o úlceras de decúbito                 Mordeduras                Quemaduras         Cuer...
INTERPRETACIÓN DE LAS                             PRUEBAS DE SENSIBILIDAD BACTERIANA    “Ningún laboratorio debería tener ...
¿Qué espera el microbiólogo del               clínico?• Conocimiento “razonable de las políticas del  laboratorio y método...
Y RecuerdeLávese las  manos
Carlos Coraspe
8. Toma de muestras en medicina enero  2013
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8. Toma de muestras en medicina enero 2013

  1. 1. Dr. Carlos J. Coraspe D Médico Infectologo Hospital Universitario Ruiz y PáezLunes 14 de enero del 2013
  2. 2. Toma de muestra en médicina
  3. 3. TOMA DE MUESTRAS• Definición: Obtención de especimenes biológicos para el apoyo al diagnóstico clínico. Especimenes: * Líquidos * Secreciones * Otros materiales como tejidos
  4. 4. QUIEN LA REALIZA?1. Personal Profesional:• Médicos• Enfermeros• Bioanalista• Microbiólogos• Personal Capacitado2. Paciente Previa instrucción.
  5. 5. Requisitos generales para la seguridad personal1. Vestimenta y accesorios: Es obligatorio el utilizar bata durante todo el tiempo de trabajo en el laboratorio.2. No se permite comer ni tomar en el área de trabajo.3. No se permite fumar.4. No aplicación de cosméticos:5. Lentes de contacto: No manipulación en el área de trabajo.6. Cabello: Se recomienda que las damas aseguren por detrás su cabello.7. Lavado de las manos con frecuencia durante todo el día de labor, antes y después del contacto con los pacientes, antes de comer o tomar y antes de salir del laboratorio
  6. 6. Medidas específicas durante la flebotomía1. Practique las precauciones universales mínimas con todo paciente a ser atendido.2. Toda muestra debe ser considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las precauciones que garanticen la seguridad del flebotomista y de los pacientes.3. Limpie su mesa antes de iniciar sus labores.4. Si el paciente tose con frecuencia, colóquese una mascarilla.5. Evite tocar áreas visiblemente infectadas del paciente.6. Tome precauciones al manipular las agujas y lancetas.7. No deje agujas y lancetas usadas en la mesa de trabajo. Descartar inmediatamente en su contenedor apropiado.8. No coloque el protector a la aguja.
  7. 7. Medidas específicas durante la flebotomía9. Si hay derrame de sangre, limpie con Hipoclorito de sodio al 10%.10. Limpie el torniquete con alcohol isopropilico después de cada extracción.11. Cambie los guantes si se han manchado de sangre u otros fluidos corporales.12. Siempre que sea posible, cambie los guantes entre pacientes.13. Al terminar su labor, quitese los guantes y lávese bien las manos.
  8. 8. Medidas específicas durante la flebotomía14. Si ocurre un pinchazo con aguja conteniendo sangre de un paciente HIV positivo, informe inmediatamente al jefe del laboratorio y diríjase a el hospital, emergencia , con el residente de medicina interna e informe del riesgo profesional. Esta exposición debe quedar registrada. Se le indicará y suministrará el tratamiento gratuito de parte del programa control de VIH.15. Evite que los niños toquen o jueguen con los equipos de la flebotomía.
  9. 9. LA PREPARACION DEL PACIENTE:• La primera impresión y las observaciones inmediatas pueden ser útiles para el flebotomista. Ayudarán a establecer el tipo de paciente, el sitio de la punción, las precauciones necesarias y la forma correcta para el trato del paciente.
  10. 10. LA PREPARACION DEL PACIENTE:• El paciente espera de usted un trato profesional, cortés y de comprensión, ya que él está frente a usted porque le aqueja su salud. La comunicación afectiva es determinante en la relación con el paciente.• Hable con el paciente. Explique el procedimiento a seguir.
  11. 11. Ética:• En todo momento debe mantener la ética y confidencialidad del paciente y sus pruebas. Los Códigos de Etica de los trabajadores de la salud, prohiben estrictamente que los aspectos de salud del paciente sean divulgados con propósitos no profesionales.• Se deben evitar críticas, temas políticos, atención de asuntos personales y conversaciones que distraigan o dilaten la adecuada atención del paciente.• No de preferencia a familiares ni amistades, tal que afecte la atención de los pacientes.
  12. 12. CONCEPTOS• Espécimen • Muestra Material extraído del Parte del espécimen paciente . debidamente tratada *Liquido que se emplea para el análisis. *Secreción *Tejidos * Sangre total * Plasma * Suero
  13. 13. Si la probabilidad clínica de que el pacienteesté cursando con una determinadaenfermedad es tan alta, aunque el examenresulte negativo la conducta médica nosufrirá modificaciones.Cuestionarse si vale la pena solicitar elexamen.
  14. 14. PROCEDIMIENTOS1. Preparación del Paciente2. Identificación3. Fijación del Torniquete4. Evaluación del sitio de punción5. Asepsia de la zona de punción6. Punción7. Recolección de muestra/muestras.
  15. 15. PROCEDIMIENTO Identificación del Paciente:NombreCedula/códigoEdadTeléfonoFecha-Hora de toma de muestraExámenes a realizar
  16. 16. PROCEDIMIENTO• Fijación del Torniquete No dejarlo mucho tiempo) Provoca estasis venoso, facilita la selección del sitio a puncionar.• Evaluación del sitio de punción: Palpación : Selección de la vena.
  17. 17. PROCEDIMIENTO Asepsia de la zona de punción *Limpieza en forma circular (adentro hacia fuera) ---Alcohol/algodón *Secado. ---Algodón. Punción--- Venas basílica, cefálica, cubital media--- *Sistema al vacío *Jeringa *Palomilla / Lanceta.
  18. 18. METODOS• Jeringa1. Elementos *Aguja *Jeringa *Tubos
  19. 19. METODOS2. Procedimiento: *Introducción de la aguja en la jeringa *Localización y punción de la vena *Extracción del embolo hasta lograr el volumen de sangre deseado. *Llenado de los tubos necesarios.
  20. 20. METODOS• Lanceta Casos Recomendados: Necesidad de pequeños volúmenes de sangre. (gota gruesa) Procedimiento: * Asepsia * Presión/congestión * Punción de 2.5 mm * Eliminación de la primera gota y recolección del volumen deseado.
  21. 21. FUNCIÓN DEL LABORATORIO:• Confirmar o descartar un diagnóstico.• Ofrecer la mejor opción en el tratamiento.• Incluir la oportunidad de ofrecer otras pruebas.• Detectar enfermedades antes de su expresión clínica.• Monitorear la terapia de seguimiento .
  22. 22. ADVERTENCIA• Por ello, es importante que los pacientes estén todo lo informados que sea posible. Deben protegerse preguntando todos los asuntos de lo que no están seguros y desafiando cualquier política o practica hospitalaria que pueda parecer innecesaria o perjudicial.• Si los pacientes asumen una actitud pasiva, eso solamente aumenta sus posibilidades de ser victima de negligencia médica.
  23. 23. El diagnóstico y tratamiento de lasenfermedades infecciosas generalmenterequiere el aislamiento e identificación deagente etiológico y son funciones dellaboratorio clínico de bacteriología; elnúmero, tipo y significado clínico de losmicroorganismos aislados soninfluenciados por la técnica usada para lacolección y proceso del espécimen
  24. 24. Ruta de los errores:• Solicitud del examen.• Estilos de solicitudes.• Nombre del paciente completo y correcto• Nombre del médico.• Cómo se localiza.• Abuso de términos: prueba, examen, estudio, cultivo, antibiograma, inmediatamente , urgente, etc.• Datos Inventados.
  25. 25. Toma de muestra para el laboratorio• Examen general y Exámenes especiales• Muestras para coloraciones• Muestras para Cultivos
  26. 26. PREPARACION DEL EQUIPO:• Agujas: Están numeradas dependiendo de su calibre. Para colección de sangre para hemogramas, se recomienda una aguja de un diámetro de 0.8 mm ( 21G ) para evitar daño a las células. Las agujas de 0.9 mm a 1.1 mm de diámetro ( 20G – 19G ) se utilizan normalmente para punción venosa en adultos.• Jeringas: De 3, 5, 10 y 20 cc• Adaptador para tubos-Vacutainer: Se utilizan para tubos al vacío.• Torniquete: Recomendable de 2 tamaños para adultos y niños.• Alcohol : Etílico o Isopropílico al 70%.• Algodón• Gasa• Guantes• Curita o venda adhesiva• Iodo.• Frascos para hemocultivos.
  27. 27. EL PROCEDIMIENTO DE LA FLEBOTOMIA• La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones más favorables para evitar errores. Esto incluye la absoluta identificación del paciente, el sitio a puncionar y el volumen a colectar. El paciente debe estar en posición cómoda, de preferencia en una silla especial para veno-punción con descanso para los brazos y si está en cama, preferiblemente acostado.
  28. 28. Examen general y Exámenes especiales• Hematología completa, VSG, frotis sanguíneo, gota gruesa, extendido sanguíneo, drepanocitos,• Química sanguínea: Urea, creatinina, glicemia, amilasa, ácido úrico, perfil lipídico(colesterol total, colesterol HDL, colesterol LDL, triglicéridos) fosfatasa acida, fosfatasa alcalina, proteínas totales y fraccionadas( Albumina y globulina), transaminasas, bilirrubina, electrolitos séricos( Na, K, Cl),• Serología: Serología para dengue, hepatitis(A, B C,), Epstein Bar, citomegalovirus, antígenos febriles. Etc.• Hormonas• Drogas y medicamentos• Tiempo de coagulación• General de orina• Heces: especial
  29. 29. Tubos para toma de muestras
  30. 30. PREPARACION DEL EQUIPO:• Tubos de colección: Los tubos están predeterminados para llenarse con un determinado volumen de sangre por vacío. El tapón de caucho está codificado por color, de acuerdo a su uso o sus aditivos. TUBO CON TAPON ROJO USO: Química, Inmunología, Banco de sangre ADITIVO: Ninguno
  31. 31. La palpación:• Antes de proceder a puncionar, se debe escoger la vena. La mejor manera es realizando una palpación de las mismas para esa decisión. Para ello coloque el torniquete 3 a 4 pulgadas por arriba del sitio seleccionado, para visualizarlas mejor. Debe tener presente en no mantener el torniquete por más de 3 minutos, para evitar la hemoconcentración.
  32. 32. La palpación: Las venas más utilizadas para la venopunción, están localizadas en el área antecubital. Entre éstas tenemos:• Vena Cubital: Es la más larga y gruesa de todas y es la preferida por bordear la musculatura del brazo.• Vena Cefálica: Tiene iguales características de la anterior, pero es un poco menos gruesa.• Vena Basílica: Es más pequeña que las anteriores. Esta vena está cerca de la arteria braquial, por lo que su punción es riesgosa y su área es más sensible y dolorosa para el paciente.
  33. 33. La palpación:
  34. 34. PALPACIÓN DE LAS VENAS
  35. 35. La Descontaminación:• Una vez que se ha decidido por la vena a puncionar, debe proceder a descontaminar el área con alcohol etílico o isopropílico al 70% utilizando algodón y con movimientos circulares del interior al exterior.• Debe tener presente que una vez realizada la descontaminación, no debe volver a tocar el área venosa.
  36. 36. La punción venosa:• Ahora está preparado para realizar la extracción sanguínea.• El brazo debe estar preferiblemente en posición cómoda horizontalmente. Con el torniquete en posición, haga que el paciente cierre y abra el puño de 3 a 5 veces para bombear mejor la sangre, y luego que mantenga el puño cerrado.• Si se trata de un niño, es recomendable colocar 2 dedos de la mano, debajo del codo del paciente, para evitar que doble el brazo durante la extracción.
  37. 37. Extracción con jeringa:• Cuando vaya a proceder a realizar la extracción con jeringa, usted debe tener presente el calibre a utilizar y el tamaño de la jeringa según el volumen a extraer.• Coloque la punta de la aguja en un ángulo de 15 a 30 grados sobre la superficie de la vena escogida y atraviese la piel con un movimiento firme y seguro, hasta el lumen de la vena.
  38. 38. Extracción con jeringa:
  39. 39. Extracción con jeringa:• Apretando firmemente la jeringa, debe jalar el émbolo con movimiento continuo para extraer la sangre hasta el volumen requerido. Evite presionar fuertemente la aguja durante la extracción.• Afloje el torniquete para que la sangre fluya mejor y remueva la aguja del brazo con movimiento suave al terminar de colectar, sin apretar el área de la punción con el algodón.
  40. 40. Extracción con jeringa:
  41. 41. Extracción con aguja:• Presione el algodón sobre el sitio de la punción aplicando una presión adecuada y no excesiva para evitar la formación de hematoma.
  42. 42. Extracción con aguja:
  43. 43. Tubo tapa roja• Química sanguínea: Urea, creatinina, glicemia, amilasa, ácido úrico, perfil lipídico(colesterol total, colesterol HDL, colesterol LDL, triglicéridos) fosfatasa acida, fosfatasa alcalina, proteínas totales y fraccionadas( Albumina y globulina), transaminasas, bilirrubina, electrolitos séricos( Na, K, Cl),• Serología: Serología para dengue, hepatitis(A, B C,), Epstein Bar, citomegalovirus, antígenos febriles. Etc.• Hormonas• Drogas y medicamentos
  44. 44. Detección de anticuerpos específicos (serología)• Se estudia la respuesta inmune humoral (anticuerpos específicos), que la presencia del agente infeccioso genera en el huésped.
  45. 45. Tubo tapa Morada: tiene anticoagulante EDTA• Hematología completa, VSG, frotis sanguíneo, gota gruesa, extendido sanguíneo, drepanocitos, hemoglobina glicosilada,PCR,
  46. 46. PREPARACION DEL EQUIPO: TUBO CON TAPON MORADO USO: Hematología ADITIVO: Anticoagulante EDTA
  47. 47. PREPARACION DEL EQUIPO: TUBO CON TAPON CELESTE USO: Pruebas de Coagulación ADITIVO: Anticoagulante Citrato de sodio
  48. 48. Tubo tapa Azul• Tiempos de coagulación( Debe ser llenado hasta la marca)
  49. 49. General de orina• Envase apropiado para el examen: Envase para Orina.• Rotularlo: nombre y fecha• Orina del chorro del medio: dejar correr un poco y luego tomar la muestra( No llenarlo)• Llevarlo lo más rápido posible al laboratorio• El laboratorio reportará lo observado
  50. 50. Envase estéril para examen de orina Urocultivo y esputo
  51. 51. Heces• Envase de heces: Solo el envase especial para ello• Rotularlo: Identificación• Llevarlo lo más rápido posible
  52. 52. Envase especial para heces
  53. 53. Muestras para coloraciones y Cultivos• Bacteriología, Micología y Parasitología• Virus• Anatomía patológica
  54. 54. MicrobiologíaBACTERIAS PARASITOS HONGOS VIRUSBacteriología Parasitología Micología Virología
  55. 55. Concepto de flora normalMicroorganismos que se encuentran confrecuencia en el cuerpo de las personas sanassin provocarles enfermedad.
  56. 56. Zonas estériles y con flora normal en el organismo humano• Zonas estériles • Zonas con flora normal – Sangre, médula ósea – Tracto respiratorio – SNC (LCR, cerebro) superior – Líquido articular, – Tracto gastrointestinal pleural, peritoneal, – Uretra pericárdico – Vagina – Tejidos – Tracto urinario inferior – Tracto respiratorio inferior – Tracto urinario superior
  57. 57. Bacteriología•Coloración : Gram, Zielknielsen•Cultivo
  58. 58. Laminas para examen directo y coloración
  59. 59. Tinción de Gram Utilidad Clínica• Permite al clínico plantear una hipótesis de agente causal.• Orientación para iniciar terapia antimicrobiana.• Debe ser solicitada en toda muestra para estudio microbiológico.
  60. 60. • Gran importancia en infecciones mixtas, por bacterias anaeróbicas y aeróbicas. En la tinción se observarán ambos microorganismos, pero es probable que en el cultivo sólo se desarrollen las bacterias aeróbicas.
  61. 61. Cultivo: bacterias, hongos y virus• Hemocultivo• Medula ósea• Liquido cefalorraquídeo• Pleural• Articular• Tejido• Urocultivo• Coprocultivo
  62. 62. Acción patógena e interés Clínico enStreptococcus del grupo A (S. pyogenes) Los cuadros más frecuentes son de ANGINAS o FARINGITIS • Pueden dar lugar a complicaciones: – Supuradas: Otitis, sinusitis, meningitis, etc. – No supuradas: • Glomerulonefritis • Fiebres reumáticas (x infecciones no tratadas) afectando a articulaciones e incluso al corazón.
  63. 63. Neisseria meningitidis. Aislamiento. Caracteres bioquímicos. • TOMA DE MUESTRAS: – De LCR por punción lumbar – Examinar rápidamente (sensible) • A la muestra de LCR turbio y purulento se le realiza: – Examen directo: Se centrifuga: • Sedimento  Frotis para tinciones (gram, tinta china, etc.) • Sobrenadante: Técnicas inmunológicas para detectar Polisacáridos capsulares y proteínas. – Siembra en Agar sangre, agar chocolate, etc. – Puede realizarse también un hemocultivo.
  64. 64. TIPOS DE MUESTRA ORINA (por punción supra púbica-PSP) LCR Sinovial # Liq. deSITIOS ESTÉRILES Hemocultivo Punción Pericárdico Pleural Peritoneal Biopsias Puede ser de cualquier órgano # No las toma el bioquímico
  65. 65. TIPOS DE MUESTRA esputo/BA L vaginal uretralSITIOS NO ESTÉRILES Secreciones oral ótica heridas piel Piel y faneras uñas pelos Materia Fecal # # No las toma el bioquímico
  66. 66. EsputoExpectoración:• Evaluación de la calidad de la muestra.• Ausencia microorganismos patógenos: informar crecimiento flora comensal• Ausencia de crecimiento bacteriano: sospechar etiología no habitual• Cultivo puro de agente propio de la flora comensal: interpretar en relación a la clínica.
  67. 67. Materiales necesarios para la toma de muestra Para recoger exudados Biología Molecular Hisopos DACRON Neisseria gonorrhoeae y rayón Ureaplasma urealyliticum Diag. rápido de infec.Hisopos de Alginato Bordetellade Ca pertussisEscobillones
  68. 68. Materiales necesarios para la toma de muestra Aguja y jeringa Ampollas Abscesos cerrados Fluídos corporales de cavidades cerradas Muestras p/ estudio de gérmenes anaerobios Orina PSP Hemocultivos Médula ósea NO RE-ENCAPUCHAR NI CLAVAR LAS AGUJAS EN TAPONES DE GOMA O CORCHO
  69. 69. HemocultivoCultivo microbiológico de una muestra desangre obtenida par una punciónindependiente.
  70. 70. Hemocultivo• Materiales:• Frascos de hemocultivos proporcionados por el laboratorio. – Al menos 2 – Son diferentes para paciente adulto y pediátrico• Jeringas y agujas – Al menos 2, o de acuerdo al núm de frascos de hemocultivo• Gasas estériles• Guantes estériles• Torniquete• Alcohol y yodo.
  71. 71. Materiales necesarios para la toma de muestra Colectores estériles Orina por chorro medio Primer chorro miccional Espontáneas Materia fecal fresca Materia fecal con formol Biopsias Secreciones NO ACEPTAR MUESTRAS FORMOLADAS
  72. 72. Método para obtención de la muestraOrina de 2° chorro:• Ventajas – fácil de tomar – no invasivo• Desventajas – contaminación frecuente
  73. 73. Orina obtenida a través de catéter vesical permanente: – colonizado a las 48 horas de instalaciónPunción vesical: – método de referencia – procedimiento invasivoCateterismo vesical transitorio: – arrastre retrógrado de microorganismos – procedimiento invasivo.
  74. 74. Materiales necesarios para la toma de muestra Portaobjetos y bisturís Muestras de piel Escarificación de lesiones
  75. 75. CONSERVACIÓN Y TRANSPORTELos medios de transporte sólo deben ser usados en casos necesarios (Exudados y secreciones bacterianas) Evitar la desecación de biopsias y/o la evaporación de muestras líquidas de escaso volumen Solución Frascos estériles tapa fisiológica rosca
  76. 76. Cultivo de microorganismos• Gran parte de la microbiología depende de la capacidad de• cultivar y mantener microorganismos en un laboratorio, y esto• solo es posible si se dispone de los medios de cultivo adecuados.• Además, los medios especiales son imprescindibles para aislar e identificar los microorganismos, evaluar la sensibilidad a los antibióticos, analizar el agua y los alimentos, en la microbiología industrial y en muchas otras actividades.
  77. 77. Requisitos de una buena muestra:• Obtener la muestra antes de iniciar el tratamiento antimicrobiano.• Desde sitio más representativo de la infección.• Tomada en forma aséptica y en recipientes estériles.• Correctamente identificada, acompañada de una orden de solicitud completa.• Transportar al laboratorio en el menor tiempo posible con las medidas de bioseguridad adecuadas.
  78. 78. TOMA DE LA MUESTRA:La correcta recolección de una muestra parasu cultivo es la etapa más importante en elaislamiento de microorganismos responsablesde enfermedades infecciosas. Una muestradeficientemente colectada, conservada,transportada, y/o identificada puede ser elmotivo del fracaso de aislar elmicroorganismo causante, y la recuperaciónde contaminantes pueda conducir a unaterapia incorrecta o aún perjudicial.
  79. 79. PRINCIPIOS BÁSICOS PARA LA CORRECTA RECOLECCIÓN DE MUESTRA (S):• La muestra para cultivo debe ser material del verdadero sitio de infección y debe recogerse con un mínimo de contaminación de tejidos, órganos o secreciones adyacentes.• Establecer periodos óptimos para la recolección de muestras a fin de tener la mejor oportunidad de aislar los microorganismos causantes.
  80. 80. • Obtener suficiente cantidad de muestra para llevar a cabo las técnicas de cultivo solicitadas.• Utilizar dispositivos de recolección, recipientes para las muestras y medios de cultivo adecuados para asegurar el óptimo aislamiento de microorganismos.• Siempre que sea posible, obtener las muestras antes de la administración de antibióticos.• El envase recolector de la muestra debe estar correctamente rotulado.
  81. 81. • Si el paciente va a colectar su muestra, asegúrese de que comprenda lo que le explicó, mediante los siguientes consejos:• Propicie un ambiente de aprendizaje.• Sea corto, separe el conocimiento largo y complejo; en segmentos pequeños.• Haga que el paciente use sentidos al máximo, esto incluye escuchar, ver, tocar, escribir, hablar y hacer.
  82. 82. • Enseñe habilidad con progresos lógicos.• Y recuerde, los pacientes recuerdan el 90% de lo que ellos dicen y hacen; pero sólo el 10% de lo que ellos escuchan.• Documente lo que el paciente debe hacer.
  83. 83. Volumen:• En general la muestra obtenida con asa, hisopo, guante, jeringa, etc. es suficiente para su proceso.• En líquidos, lo recomendable es que se comunique al Laboratorio.• En Baciloscopías obtener de 5 a 10 muestras de expectoración, idealmente matutinas.
  84. 84. Número de especímenes:• En cultivo de sangre, la más recomendable es utilizar 2 muestras de diferente sitio de punción.• En Tuberculosis pulmonar dos Baciloscopías son suficientes.
  85. 85. Conservación:• Idealmente toda muestra debe ser incubada inmediatamente.• Especímenes que se pueden conservar menos de 6 horas en el refrigerador son heces fecales y orinas.• En Tuberculosis hasta 48 horas.
  86. 86. Transporte:• Evite que el líquido se contamine con el algodón, esté en contacto con la luz solar directa y llevarlo en altas temperaturas (automóvil).
  87. 87. Interpretación de resultados• Conocer las características del test que estoy solicitando.• Conocer flora normal.• Microorganismos aislados de sitios estériles tienen potencialmente un rol patógeno.• Análisis particular: microorganismos considerados como contaminantes en hemocultivos.
  88. 88. Rechazo de Muestras:• Solicitud sin nombre del paciente.• Discrepancia entre la identificación del paciente que figura en la solicitud del estudio y la que figura en el recipiente que contiene la muestra.• Falta de identificación en el envase que contenga la muestra.• No se indica en la solicitud del examen el origen de la muestra o el tipo de cultivo deseado.
  89. 89. Causas de error en la toma de muestra Técnica de extracción de muestra incorrecta: Recolección en recipiente incorrectoRecolección de sitio NO representativo Traumatismo durante la venopunción (volumen inadecuado de muestra) Muestra recogida en una hora inadecuada Almacenamiento incorrecto de la muestra Cantidad insuficiente de muestra
  90. 90. CAUSAS DE RECHAZO DE LA MUESTRASSE RECHAZARAN MUESTRAS:Sin rotular, o rotuladas inapropiadamente o con datos discordantes con respecto a losque figuran en el pedidoDerramadas Enviadas sin el medio de transporte correspondiente o incorrectamenteconservadas.Duplicadas en el transcurso de 24hs, sin la aclaración del médico solicitanteque la justifique. Se exceptúan los HemocultivosQue llegan al laboratorio con agujas o cualquier otro material corto-punzante
  91. 91. • Cultivos anaerobios solicitados en expectoración, orina, heces fecales y/o Cultivo faríngeo.• Muestra sin identificar el sitio de la infección.• Expectoración obtenida en forma inadecuada (saliva) para un cultivo de rutina.• Muestra enviada en un fijador (formol).• Muestra en hisopo seco.
  92. 92. • Muestra sin tapa o algodón contaminado con líquido.• Puntas de sonda de foley.• Orina o expectoración recolectada durante 24 horas para búsqueda de hongos o Mycobacterias.• Orina en recipiente inadecuado.
  93. 93. • Orina mantenida más de 2 horas a temperatura ambiente.• Recipiente con pérdidas de: orina, líquido, heces fecales, expectoración, sangre.• Presencia de bario en heces para búsqueda de Protozoarios y Helmintos.• Muestra evidentemente contaminada.
  94. 94. • Jeringas que no se tapan con el protector de la aguja.• Muestra con volumen escaso.• Si Usted rechaza un espécimen, anote y firme en la solicitud y en el reverso de la libreta el motivo.• Todos los especímenes sin número y letra no serán procesados.• Toda solicitud llenada en el laboratorio inventando el registro no será procesada.
  95. 95. Todos las muestras se consideranpotencialmente infecciosos y deben serremitidos ajustándose a las normas de bioseguridad vigentes.
  96. 96. Micología• Examen directo: KOH (hidróxido de potasio)• Coloración para hogos• Serología para hongos• Cultivo para hongos: Sangre, medula ósea, líquidos cefalorraquídeos, pleural, raspado: piel,uñas
  97. 97. Cultivos dermatofitos
  98. 98. Tema 4PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS PARA SU ANÁLISIS.Esta operación exige unas reglas de manipulación aséptica muy estrictas, así como la utilización dematerial y diluyentes estériles, para evitar la contaminación exterior del alimento. Se utilizan campanaso cámaras de flujo laminar adecuadas para la toma de muestras, que suponen una gran ayuda paraevitar el riesgo de cualquier contaminación
  99. 99. Parasitología• Examen directo: Helmintos( áscaris, stronguiloides, oxiuros, tricocéfalos, etc.)• Extendido o frotis en lamina y Gota gruesa de sangre y extendido de medula ósea: Paludismo, Tripanosoma, etc.• Coloraciones: Hematoxilina y eosina, giemsa.
  100. 100. TOMA DE MUESTRAS EXÁMENES DE DEPOSICIONESParasitológico seriado o Coproparasitario Detección de parásitos como: • Helmintos (Áscaris, taenias) • Huevos o larvas de helmintos • Protozoos (Giardia)
  101. 101. Toma de muestra capilar para gota gruesa
  102. 102. Entrega de Resultados:Si Usted nos proporciona el número y letra con el que se etiqueto su solicitud, los resultados se localizan más rápido.
  103. 103. Muestra de Heridas• Evitar tomar muestras de heridas superficiales con tórula.• Evitar tomar muestras de trayectos fistulosos o a través de drenajes.• Para cultivar muestras de heridas se requiere una muestra profunda, idealmente de tejido. – Tórula medio de transporte (Stuart) – Tejido tubo con caldo de cultivo.
  104. 104. Heridas traumáticas Heridas o úlceras de decúbito Mordeduras Quemaduras Cuerpos extraños en piel o mucosas Generalmente colonizadas por bacterias ambientales y floraHisopado no refleja verdadera causadel proceso infeccioso
  105. 105. INTERPRETACIÓN DE LAS PRUEBAS DE SENSIBILIDAD BACTERIANA “Ningún laboratorio debería tener complicidad en la negligencia de colocar a un paciente en riesgo, reportando resultados que conduzcan a decisiones terapéuticas inapropiadas por parte de los médicos”• Jones RN. Method preferences and test accuracy of antimicrobial susceptibility testing. Updates from the College of American Pathologists Microbiology Surveys Program (2000).• Arch Pathol Lab Med. 2001; 125:1285-1289
  106. 106. ¿Qué espera el microbiólogo del clínico?• Conocimiento “razonable de las políticas del laboratorio y métodos utilizados• Conocer qué exámenes están disponibles y cuál es la muestra más adecuada• Información clínica relevante: día´gnóstico, uso de antimicrobianos, etc..• Contacto frecuente para solicitudes especiales.
  107. 107. Y RecuerdeLávese las manos
  108. 108. Carlos Coraspe
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