Laboratorio no.4   antibiograma
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  • Muy interesante y clara su explicación. Hace años obtuvimos actinomicetos que producían antibiótico. Finalmente, fue muy emocionante.
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    Laboratorio no.4   antibiograma Laboratorio no.4 antibiograma Presentation Transcript

    • ANTIBIOGRAMA
      Dra. Natalia Izurieta Cergneux
      PRÁCTICA NO. 4 - LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA Y MICOLOGÍA
    • DEFINICIÓN
      Prueba in vitro que determina la sensibilidad de un microorganismo frente a diferentes antibióticos.
      SENSIBLE
      RESISTENTE
    • OBJETIVOS
    • MÉTODOS - ANTIBIOGRAMA
    • CONCENTRACIÓN INHIBITORIA MÍNIMA
      Es la mínima concentración de un antimicrobiano que inhibe la multiplicación y crecimiento visible de una cepa bacteriana en un medio de cultivo.
    • CONCENTRACIÓN BACTERICIDA MÍNIMA
      Para determinar la CBM se seleccionan tubos donde no haya turbidez y se siembra el contenido en un medio de cultivo sólido y se observa si hay o no crecimiento.
      LA CBM corresponde a aquella dilución donde no hay crecimiento bacteriano.
    • CIM Y CBM
      CONTROL
      SIN AB
      AB
      AB
      AB
      AB
      AB
      S/C
      S/C
      S/C
      S/C
      C/C
      C/C
      C/C
      C/C
      S/C
      C/C
      S/C
      C/C
    • MÉTODO DE DILUCION
      Consiste en determinar el crecimiento de una bacteria en presencia de concentraciones decrecientes de un mismo antibiótico.
      Se observa el crecimiento de los microorganismos mediante la aparición de turbidez
    • MÉTODO DE DIFUSIÓN
      Es el método más empleado en el laboratorio.
      Se trabaja a partir de un microorganismo debidamente aislado e identificado (CULTIVO PURO)
    • MÉTODO DE DIFUSIÓNPRINCIPIO DEL MÉTODO
    • SELECCIÓN DE LAS COLONIAS
      Es el paso más importante.
      Se selecciona de 3 a 5 colonias del microorganismo.
    • PREPARACIÓN DEL INÓCULO Y ESTANDARIZACIÓN DE LA SUSPENSIÓN
      En ambos métodos, la turbidez de la suspensión debe ser estandarizada al estándar 0,5 de McFarland (que corresponde a aproximadamente 1,5 X 10 -8 CFU/ml).
    • SUSPENSIÓN DIRECTA DE LAS COLONIAS
      Se trabaja con cultivos jóvenes.
      En esta técnica se estandariza el inóculo al mismo tiempo que se prepara la suspensión.
      SS ó CALDO COMÚN
      3 A 5 COLONIAS
      AJUSTAR TURBIDEZ
      0,5 ESCALA DE McFARLAND
      ESTABILIZAR 15 MIN.
    • FASE LOGARÍTMICA DE CRECIMIENTO
      Se usa para la mayoría de microorganismos de rápido crecimiento.
      3 A 5 COLONIAS
      SS ó CALDO COMÚN
      INCUBACIÓN A 35 0 C 2-6 HORAS
      AJUSTAR TURBIDEZ
      0,5 ESCALA DE McFARLAND
    • PREPARACIÓN PARA LA INOCULACIÓN
      Losdiscos deben permanecer a temperatura ambiente durante 1-2 horas.
      El agar de elección para esta prueba es el agar Mueller-Hinton (MHA).
    • INOCULACIÓN DE LA PLACA
      2
      1
      3
    • INOCULACIÓN DE LA PLACA
      1ml de
      inóculo
    • APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS
      MÉTODO MANUAL
    • MÉTODO AUTOMÁTICO
    • APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS
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      3
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      5
      4
    • MEDICIÓN DE LAS ZONAS DE INHIBICIÓN