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Laboratorio no. 3   medios de cultivo
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Laboratorio no. 3 medios de cultivo

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  • 1. MEDIOS DE CULTIVO YTÉCNICAS DE INOCULACIÓN
    Dra. Natalia Izurieta Cergneux
    PRÁCTICA No. 3 – LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA
  • 2. GENERALIDADES
    El crecimiento de microorganismos en sustancias alimenticias artificiales es una de las técnicas más importantes usadas en el laboratorio.
  • 3. GENERALIDADES
    Permite reconocer las características culturales de las bacterias.
    A partir de estas se puede obtener cultivos puros
  • 4. GENERALIDADES
  • 5. MEDIO DE CULTIVO
    Conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes.
    Se crean condiciones adecuadas de desarrollo y reproducción de manera artificial.
    No existe un medio universal común.
  • 6.
    • Para su óptimo crecimiento es necesario dar condiciones ambientales adecuadas para su desarrollo en medios artificiales.
    • 7. Estas son: temperatura, pH, humedad, presión de oxígeno, grado de acidez o alcalinidad del medio…
  • Las características más importantes de los microorganismos a ser consideradas al momento de preparar un medio de cultivo son:
    • Tipo trófico: autótrofos, heterótrofos, quimiotrofos, fotótrofos.
    • 8. Tipo respiratorio: aerobios, anaerobios, anaerobios facultativos, microaerófilos.
    • 9. Temperatura: psicrófilos, mesófilos y termófilos.
    • 10. pH: acidófilos, neutrófilos, basófilos.
  • COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
    FUENTE DE CARBONO:
    • Pueden ser CO2 o compuestos carbonados orgánicos.
    • 11. Se utilizan en la construcción de innumerables moléculas necesarias para la célula.
    • 12. Los hidratos de carbono se consideran fuente de carbono y energía.
  • COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
    FUENTE DE NITRÓGENO
    • Es metabolizado para proveer proteínas, ácidos nucleicos y polímeros de pared.
    • 13. Algunos microorganismos pueden incorporar nitrógeno en forma de aminoácidos, bases purínicas o pirimidínicas.
    • 14. En ciertos medios de cultivo, el aporte de nitrógeno es realizado por las peptonas
  • COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
    FUENTE DE AZUFRE
    • Se adiciona como SO4, cisteína o metionina.
    • 15. En la célula se incorpora a aminoácidos y diferentes coenzimas.
    FUENTE DE FÓSFORO
    • Se agrega fosfatos de sodio o potasio.
    • 16. El fósforo se incorpora a ácidos nucleicos, fosfolípidos, polímeros de membrana, ATP, y sustancias de reserva.
  • COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
    FUENTE DE K+ , Mg2+ , Ca2+
    • Son cationes que estabilizan macromoléculas aniónicas.
    • 17. K+ actúa como coenzima y estabilizador de RNA.
    • 18. Mg2+ se integra a la clorofila en organismos fotosintéticos.
    • 19. Ca2+ abunda en esporas como dipicolinato de calcio.
    FUENTE DE Na
    • Contribuye a equilibrar la presión osmótica del medio extracelular.
    • 20. Se suele suministrar como NaCl.
  • COMPOSICIÓN QUÍMICA – FACTORES DE CRECIMIENTO
    Son compuestos orgánicos requeridos en muy bajas concentraciones.
    No pueden ser sintetizados por la propia célula.
    Deben ser agregados al medio de cultivo
    Pueden ser aportados en forma de:
    • Extracto de carne
    • 21. Extracto de levadura
    • 22. Extracto de malta
  • COMPOSICIÓN QUÍMICA – AGENTES SOLIDIFICANTES
    Su uso es opcional y el más usado es el agar.
    Se le adiciona en diferentes concentraciones.
    • 1.5 – 2 % en medios sólidos
    • 23. 0.2 – 0.3% en medios semisólidos
    • 24. 5% en medios de consistencia firme
  • COMPOSICIÓN QUÍMICA – AGUA
    Representa del 80-90% del peso total de una célula.
    Es fundamental para la realización de todos los procesos metabólicos, funciones enzimáticas….
    Los medios de cultivo se preparan en el laboratorio con agua destilada.
  • 25.
  • 26.
  • 27.
  • 28.
  • 29.
  • 30. CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
  • 31. POR SU COMPOSICIÓN
    MEDIOS LÍQUIDOS
    • Llamado también caldo.
    • 32. USO:
    • 33. diluciones
    • 34. homogenizar mezclas
    • 35. enriquecer cultivos
    • 36. rehidratarcepas liofilizadas
  • POR SU COMPOSICIÓN
    MEDIOS SÓLIDOS
    Llamado también agar.
    Se le añade 2% de agar.
    En cajas petri o en tubos
    USO:
    • Para separar microorganismos
    • 37. Para favorecer el desarrollo de colonias aisladas
  • POR SU COMPOSICIÓN
    MEDIOS SEMISÓLIDOS
    Consistencia leve o gelatinosa.
    Medio líquido al que se adiciona agar (0.4 a 0.8%).
    USO:
    • Para determinar la movilidad de los microorganismos microaerófilos.
  • POR SU FINALIDAD
  • 38. POR SU FINALIDAD
  • 39. POR SU FINALIDAD
  • 40. POR SU FINALIDAD
  • 41. POR SU FINALIDAD
  • 42. POR SU FINALIDAD
  • 43. POR SU FINALIDAD
  • 44. PREPARACIÓN – MEDIO DE CULTIVO